ELISA测定血清Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎的诊断意义

应用ELISA测定了54例类风湿性关节炎患者、99例非类风湿性关节炎患者以及100例正常人的血清Ⅱ型胶原抗体,结果阳性率分别为90.7%、0、0.54例类风湿性关节炎患者中有7例血清类风湿因子为阴性而Ⅱ型胶原抗体为阳性,且病程均在半年之内。结果表明:Ⅱ型胶原抗体的检测对类风湿性关节炎具有特异性诊断和早期诊断的临床意义。     

胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织MMP2mRNA的表达及复方861抑制作用的研究

观察胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织MMP2mRNA表达以及复方 86 1的抑制作用。给雌性Wis tar大鼠进行胆管内逆行性注入粘合剂加胆管结扎导致胆管阻塞 ,制备胆管阻塞性肝纤维化模型。于术后 7天开始给予不同剂量的复方 86 1灌胃 ,共 4 9天。以RT -PCR法观察肝组织MMP2mRNA表达水平。胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型组 (造模 5 6天 )MMP2mRNA为 0 6 33± 0 35 ,明显高于正常对照组 (0 0 2 5± 0 0 18,P <0 0 1) ;复方86 13g/kg、6g/kg、9g/kg组的MMP2mRNA分别为 0 10 7± 0 0 70、0 2 4 8± 0 0 192、0 2 2 2± 0 10 6 ,明显低于模型对照组 (P <0 0 5 )。复方 86 1能够抑制胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织MMP2mRNA表达增高 ,可能是其抗肝纤维化作用的机理之一。     

细胞色素酶P4502E1介导的氧化应激对人肝星状细胞的活化作用

目的 研究细胞色素酶P4502E1(CYP2E1)介导的氧化应激对人肝星状细胞的活化作用. 方法 以CYP2E1为目的 基因,将CYP2E1表达载体PCI-CYP2E1及空载体PCI-neo转染到人肝癌细胞株HepG2细胞,分别为HepG2/CYP2E1,HepG2/PCI.检测HepG2/CYP2E1,HepG2/PCI及正常HepG23组细胞上清液中丙二醛(MDA)含量.将上述3种细胞分别与人肝星状细胞LX2共培养48 h,分别命名为CYP2E1/LX2组,PCI/LX2组,HepG2/LX2组,提取RNA、上清液,用羟脯氨酸(Hyp)试剂盒检测3组LX2上清液中Hyp含量,用逆转录多聚酶链反应检测LX2细胞内Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA水平,用酶联免疫吸附试验检测3组上清液中LX2分泌的Ⅰ型前胶原羧基肽(PICP)蛋白水平,用明胶酶谱法检测3组上清液中LX2分泌的MMP2酶活性.组间比较用单因素方差分析进行统计学分析. 结果 (1)HepG2/CYP2E1细胞、阴性对照组HepG2细胞及HepG2/PCI细胞的MDA值分别为(6.51±0.25)nmol/ml、(3.07±0.29)nmol/ml和(2.57±0.29)nmol/ml,F值为22.66,P值均<0.01.(2)HepG2/CYP2E1、HepG2、HepG2/PCI 3组细胞培养液中Hyp含量分别为(35.24±3.52)nmol/ml、(24.50±1.37)nmol/ml和(17.77±2.58)nmol/ml,F值为58.89,P值均<0.01; 3组LX2细胞Ⅰ型胶原mRNA水平表达,差异无统计学意义.CYP2E1/LX2组、阴性对照组HepG2组及PCI/LX2组LX2分泌的PICP蛋白吸光度值分别为540.01±11.38、262.57±15.61和231.59±12.76,F值为124.97,P值均<0.01; 3组LX2细胞内MMP2 mRNA水平表达、MMP2的酶活性,差异无统计学意义. 结论 CYP2E1可引起氧化应激,CYP2E可增加LX2细胞外Hyp的合成和分泌.CYP2E1活化了肝星状细胞,可促进其细胞外PICP合成与分泌.     

Lipidoid作为新型脂质载体对肝脏非实质细胞的靶向作用实验研究

目的探讨新型脂质载体Lipidoid对肝脏的细胞靶向效率,为抗肝纤维化治疗提供一定实验室依据。方法C57BL/6小鼠分别给予CCl_4灌胃建立肝纤维化模型,同时给予Lipidoid、Lipidoid/siRNA-TIMP-1尾静脉注射,通过Masson染色观察各组小鼠肝脏纤维化情况,并通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测Lipidoid/siRNA-TIMP-1对TIMP-1表达水平的影响;通过对小鼠尾静脉注射绿色荧光(GFP)标记的Lipidoid-GFP,取其肝组织进行冰冻切片分别进行Desmin及F4/80染色,评价Lipidoid-GFP对肝脏非实质细胞的靶向作用;通过对小鼠分离的原代肝星状细胞SW-HSC、小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)转染Lipidoid-GFP,流式细胞仪分别检测上述两种细胞中GFP荧光强度。结果通过对肝组织进行Masson染色发现,在CCl_4诱导的肝纤维化小鼠模型中,给予Lipidoid/siRNA-TIMP-1治疗可显著降低胶原纤维的沉积;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果显示Lipidoid/siRNA-TIMP-1可以显著抑制TIMP-1基因的表达;肝组织冰冻切片Desmin及F4/80染色结果显示,Lipidoid-GFP主要被肝脏肝星状细胞和Kuffer所捕获,肝星状细胞、Kuffer细胞捕获Lipidoid-GFP的阳性率分别为13.4%、43.8%;原代肝星状细胞SW-HSC、小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)转染Lipidoid-GFP后经流式细胞仪检测,结果显示转染Lipidoid-GFP的SW-HSC及RAW264.7GFP阳性率分别为66.9%、75.8%,均显著高于对照组。结论小鼠实验结果表明,Lipidoid/siRNA-TIMP-1可有效降低肝脏TIMP-1水平,发挥抗肝纤维化作用。Lipidoid作为一种新型脂质载体可有效感染肝脏非实质细胞(肝星状细胞和Kuffer细胞)。     

耳廓全部断离6小时再植成功1例

耳廓全部断离６小时再植成功１例刘天会，王建国伤者．男２１岁，被快刀砍掉左耳廓，并伤及左胸部，流血不上，剧烈疼痛６小时，于１９９３年５月１６日入院，伤者全身一般情况好，左耳廓全部缺夫，创面被大量血凝块粘附，仍有少量出血，清除血凝块，可见创面约６×２．５...     

半胱天冬酶的磷酸化

磷酸化是蛋白质最重要的修饰方式之一，尤其对于酶的激活，失活等过程发挥至关重要的作用，而半胱无冬酶作为参与细胞凋亡的关键酶，磷酸化同样对其功能发挥具有重要意义，本文对这方面的影响做一综述。     

旋覆代赭汤加减治疗咽神经官能症500例

依理气开郁,降逆化痰为法,用旋覆代赭汤加减治疗咽神经官能症500例,总有效率93％。     

腺相关病毒介导的小干扰RNA对大鼠肝星状细胞金属蛋白酶组织抑制因子-1及基质金属蛋白酶13表达的影响

目的 观察以腺相关病毒(AAV)为载体含有针对金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1具有较强抑制作用的小干扰RNA(siRNA)感染大鼠星状细胞系HSC-T6后TIMP-1及基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达情况.方法 将对大鼠TIMP-1基因具有最强抑制作用的一对siRNA,在体外构建为短发夹siRNA表达载体后,将其包装为重组AAV-rAAV/siRNA-TIMP-1/neo并感染HSC-T6,于感染后4周及12周应用荧光定量PCR方法及Western blot方法分别检测TIMP-1及MMP13 mRNA及蛋白质表达情况.结果 经PCR、酶切及序列测定证实抑制作用最强的1对siRNA在体外构建的shRNA表达载体成功克隆.将重组质粒包装成病毒后感染HSC-T6细胞,与对照组细胞相比,rAAV/siRNA-TIMP-1/neo感染组在感染后4周及12周细胞TIMP-1 mRNA及蛋白质表达水平明显降低(P＜0.01),而MMP13 mRNA及蛋白质表达水平明显增高(P＜0.01).结论 化学合成的siRNA在短时期内可有效地抑制TIMP-1基因的表达,重组病毒rAAV/siRNA-TIMP-1/neo可长期有效地抑制TIMP-1基因表达.     

慢性运动性中枢疲劳大鼠血清色氨酸与亮氨酸的测定价值

目的通过对于慢性运动性中枢疲劳模型大鼠血清色氨酸及亮氨酸含量测定,探讨色氨酸及支链氨基酸在慢性运动性中枢疲劳调控机制方面的变化规律。方法建立大鼠慢性运动性中枢疲劳模型;应用高效液相色谱-质谱的研究方法对大鼠血清色氨酸及亮氨酸进行测定。结果与正常饲养大鼠比较发现,奔跑条件下运动性中枢疲劳大鼠血清中色氨酸水平明显降低,差异有显著性(P0.05);亮氨酸的水平无统计学差异(P0.05);亮氨酸/色氨酸明显升高,差异有显著性(P0.05)。结论慢性运动性中枢疲劳时大鼠血中色氨酸表现为明显下降的趋势,支链氨基酸亮氨酸与其比值明显升高可能进一步抑制其进入中枢,调控中枢性疲劳的发生和发展,该变化可能是机体为适应慢性运动性中枢疲劳状态的一种自我调控反应。     

强化副导师责任提高医学研究生的科研能力

研究生教育不同于本科教育,学生要从本科阶段的教师课堂讲解的教学实验转变为研究生阶段的导师指导下的独立从事探索性的科研实验,这是学生走向独立科研工作的关键性过渡阶段,对于临床科研双向型人才的培养起着至关重要的作用.尽管研究生阶段,开设了类似《医学科研方法》、《医学科学研究导论》等科研入门课程,但这种普遍意义上的教学只能使学生对医学科研建立起宏观的、系统的和全面的认识,而学生真正的科学研究能力的获得与其硕士、博士阶段导师以及前辈的指导与培养密切相关,研究生阶段科研工作的优劣直接决定了学生未来的科研建树.