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基因治疗成骨肉瘤的探索:人成骨肉瘤细胞CD147基因编码区克隆和反义RNA表达质粒构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建CD147反义RNA表达质粒载体,探索治疗骨肉瘤侵袭和转移的新方法.方法:实验于2004-05在第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所实施,以人成骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板,采用反转录聚合酶链反应方法得到人CD147的编码区cDNA,用DNA重组技术将人CD147编码区基因反向克隆到真核表达质粒PcDNA3.1( )中,构建成CD147反义RNA表达质粒PcDNAasCD147.用阳离子脂质体介导转染人成骨肉瘤细胞系MG63,经G418筛选后获得的克隆进行鉴定. 结果:CD147反义RNA表达质粒载体PcDNAasCD147经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确.免疫组化SP法染色证实:转染细胞MG63/PcDNAasCD147,与亲本细胞相比,CD147的表达明显下降.结论:成功地从人成骨肉瘤细胞中克隆出CD147编码区基因,构建了CD147反义RNA表达质粒载体PcDNAas CD147,此实验结果为进一步研究CD147蛋白分子的生物学功能以及为成骨肉瘤的基因治疗研究奠定了基础. 相似文献
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骨肉瘤HER2基因表达增加肺转移发生危险度 总被引:3,自引:1,他引:3
目的:研究骨肉瘤中HER2基因表达与骨肉瘤患者发生肺转移的关系。方法:对43例骨肉瘤患者的临床病理资料进行回顾性研究,应用HER2单克隆抗体对组织切片进行免疫组织化学染色,并将上述资料与随访患者发生肺转移情况进行统计学分析。结果:骨肉瘤患者HER2表达与患者发生肺转移相关(P<0.05),HER2高表达的骨肉瘤患者发生肺转移的可能性大。结论:HER2检测是判断骨肉瘤发生肺转移的一项有价值的指标;同时,HER2基因为骨肉瘤的生物治疗提供一种可能的靶点。 相似文献
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目的:探讨根皮苷联合索拉非尼对肝癌细胞能量代谢与凋亡的影响。方法:将根皮苷5 μmol/L和(或)索拉非尼5 μmol/L作用于HepG2细胞48 h后,检测肝癌细胞活力、肝癌细胞葡萄糖摄取与细胞内ATP含量、caspase-3活力与凋亡细胞计数。结果:索拉非尼组肝癌细胞活力降低,与对照组差异有统计学意义(P<0.05);索拉非尼与根皮苷联合组肝癌细胞活力进一步降低,与其他各组(对照组、索拉非尼组及根皮苷组)差异均有统计学意义(P<0.05)。根皮苷组葡萄糖摄取及ATP生成减少,与对照组差异有统计学意义(P<0.05);索拉非尼与根皮苷联合组葡萄糖摄取及ATP生成进一步减少,与其他组差异均有统计学意义(P<0.05)。索拉非尼组与根皮苷组caspase-3活力与细胞凋亡较对照组增强(P<0.05);索拉非尼与根皮苷联合组caspase-3活力与细胞凋亡进一步增强,与其他组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:根皮苷可以通过抑制肿瘤细胞ATP生成和促进肿瘤细胞凋亡来提高索拉非尼疗效。 相似文献
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目的 探索抑癌基因BRCA1基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞SOSP 96 0 7的影响。方法 通过细胞培养 ,测量细胞生长曲线、计算细胞集落形成率、检测细胞周期等 ,观察BRCA1基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞系SOSP 96 0 7的影响。结果 BRCA1基因反义寡核苷酸浓度为 1 0 μmol/L时 ,骨肉瘤细胞的生长速度变快 ,集落形成率明显增高 ;流式细胞仪检测发现其引起细胞周期变化 ,细胞增殖活性提高。结论 BRCA1基因反义寡核苷酸对人骨肉瘤细胞SOSP 96 0 7有明显的影响 ,使得骨肉瘤细胞恶性生物学特性更加显著 ,提示BRCA1基因在人骨肉瘤发展过程中起作用 相似文献
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目的观察不同临床类型HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群的变化,以探讨HBV感染对人体细胞免疫功能的影响。方法使用流式细胞仪技术检测22例HBV携带者、231例慢性乙型肝炎、61例肝炎肝硬化、18例原发性肝癌和22例健康志愿者外周血T淋巴细胞亚群。结果本组正常人外周血CD3+、CD4+和CD8+细胞百分比分别为73.7±5.4、43.6±4.3和29.2±5.4;HBV携带者、慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和肝癌患者外周血CD3+细胞百分比分别为67.3±11.2、70.0±12.5、64.4±16.5和58.4±43.4,除HBV携带者外,均明显低于正常人(P〈0.05);CD4+细胞百分比分别为32.9±7.7、36.6±12.5、35.4±12.4和31.2±22.0;CD8+细胞百分比分别为29.2±7.4、28.8±9.9、24.5±9.7和20.6±13.0,其中肝硬化和肝癌患者与正常人比,均有显著性差异(P〈0.05)。结论慢性HBV感染者随着病情进展,外周血淋巴细胞百分比逐渐发生变化,这可能影响了细胞免疫功能而致感染慢性化和重症化。 相似文献
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[目的]探讨多药耐药相关基因如缺氧诱导因子1d(HIF-1α)、多药耐药基因(MDR1)及多药耐药相关蛋白(MRP1)在脊索瘤细胞系CM-319中的表达及临床意义。[方法]用RT—PCR检测HIF-1α、MDR1、MRP1基因表达,间接免疫荧光及免疫细胞化学Envision法检测HIF-1α、MRPl蛋白在CM-319中的表达情况,并分析其与放化疗抵抗的关系。[结果]常氧条件下,在脊索瘤细胞系中能检测到HIF~1α及MRP1 mRNA的表达,但未检测到MDR1 mRNA的表达(P〈0.01),间接免疫荧光及免疫细胞化学可以检测到HIF-1α表达在细胞浆及核中,而MRP1主要表达在细胞浆中。[结论]HIF-1α与MRP1的过度表达在脊索瘤的放化疗抵抗中可能具有重要作用,而MDR1表达未被检测到,提示脊索瘤的放化疗抵抗主要与HIF-1α和MRP1相关。 相似文献
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目的探讨中西医结合治疗肝性脊髓病(HM)的临床疗效。方法采用中西医结合方法治疗19例HM患者,观察患者下肢肌力恢复情况。结果中西医结合治疗全组缓解6例,无效13例,缓解率32%。A组(肌力≤2级)10例,缓解1例(10%);B组(肌力≥3级)9例,缓解5例(56%)。B组的缓解率明显高于A组。结论早期中西医结合治疗HM有一定疗效,中药及针灸治疗为HM的治疗带来希望。 相似文献