中国大陆EV71病毒分离株的分子流行病学研究

目的了解1987-2010年中国大陆肠道病毒71型（EV71）分离株的分子流行病学特点及其种系进化、基因分型和遗传变异性。方法从GenBank/NCBI上获得中国大陆来源的具有完整VP1或近似完整VP1基因的核苷酸序列信息的413株EV71毒株进行分析,采用MEGA5.0软件,构建系统进化树,计算相同或不同基因型及基因亚型毒株的核苷酸与氨基酸的相似性。结果 1987-2010年,中国大陆20个省、市或地区均分离到具有完整VP1序列的毒株,且2008年以来数量陡增;中国大陆流行的主要是C型,只有2008年安徽和2009年湖北发现了A型;各基因型在43、58、142、164、167、184、240、249、292等氨基酸位点发生了特异性变异;从健康人体内分离的HQ129932毒株与其他序列比较,氨基酸无特异性变异。结论 C型株可能具有更强的传染力;氨基酸位点变异对于EV71病毒进化有重要意义;VP1基因与疾病的严重程度无明显关联;应加强C4a亚型疫苗候选疫苗株对其他基因型毒株的交叉保护作用研究。     

中国大陆柯萨奇病毒A组16型全基因参照序列的初步建立和分析

目的建立中国大陆柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)流行株的全基因参照序列。方法从GenBank中获得CoxA16中国大陆分离株的所有全基因序列和氨基酸序列,用DNAstar/MegAlign软件对所得序列进行多序列比对和进化分析,按照参照序列标准拟定CoxA16的全基因参照序列和氨基酸序列,并与参考序列进行比对分析。结果中国大陆分离的CoxA16毒株全基因序列共8株,分离于2005-2009年,其中2008年5株,广东省5株;通过序列比对获得了大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列;参考毒株间核苷酸序列同源性介于79.0%～98.8%,氨基酸序列同源性为94.3%～99.9%,与参照序列的核苷酸同源性为79.7%～97.0%,氨基酸同源性介于95.1%～99.5%之间,同源性最低的为2008年安徽阜阳的FY18株。结论比对分析了中国大陆CoxA16毒株全序列,成功建立了中国大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列。     

中国大陆柯萨奇病毒A组16型全基因参照序列的初步建立和分析

目的建立中国大陆柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）流行株的全基因参照序列。方法从GenBank中获得CoxA16中国大陆分离株的所有全基因序列和氨基酸序列,用DNAstar/MegAlign软件对所得序列进行多序列比对和进化分析,按照参照序列标准拟定CoxA16的全基因参照序列和氨基酸序列,并与参考序列进行比对分析。结果中国大陆分离的CoxA16毒株全基因序列共8株,分离于2005-2009年,其中2008年5株,广东省5株;通过序列比对获得了大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列;参考毒株间核苷酸序列同源性介于79.0%～98.8%,氨基酸序列同源性为94.3%～99.9%,与参照序列的核苷酸同源性为79.7%～97.0%,氨基酸同源性介于95.1%～99.5%之间,同源性最低的为2008年安徽阜阳的FY18株。结论比对分析了中国大陆CoxA16毒株全序列,成功建立了中国大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列。     

1172例高龄孕妇妊娠中期羊水染色体核型分析

目的探讨高龄孕妇胎儿的染色体异常核型的发生风险。方法收集在中山市人民医院进行羊水染色体核型分析的高龄孕妇的资料,统计分析胎儿染色体异常核型的种类及发生率。结果 1 172例高龄孕妇(≥35周岁)中,共检出胎儿染色体异常核型42例,异常发生率为3.58%(42/1 172)。其中非整倍体31例,染色体结构异常8例,其他异常核型包括三倍体、标记染色体及嵌合体各1例。结论高龄孕妇胎儿染色体异常核型以非整倍体为主,其中21三体综合征的发生风险最高。对高龄孕妇进行细胞遗传学产前诊断能有效减少染色体异常胎儿的出生。     

中国大陆2002～2010年法定传染病疫情分析

目的分析中国大陆(不含港澳台)近9年法定传染病的发生、发展及其变化规律,为制定更为有效的传染病预防控制政策、策略和措施提供科学依据。方法用Excel和SPSS17.0对中国卫生部来源的2002～2010年法定传染病报告疫情资料进行整理和统计分析。结果中国大陆9年法定传染病发病39592193例,年均发病率321.9270/10万;甲类传染病报告2种2997例,年均发病率0.0245/10万,乙类报告25种17932261例,发病率152.4331/10万,丙类11种共21656935例,发病率为175.3497/10万;9年间丙类传染病发病最多,但乙类传染病死亡病例最多;各类传染病在不同年份的流行情况不同,其发病顺位各有差异;9年中报告的主要传染病病种为病毒性肝炎(乙肝)、肺结核、痢疾、其他感染性腹泻、手足口病、淋病等。结论传染病防控应重点放在病毒性肝炎(尤其是乙肝)、肺结核、痢疾、手足口病、艾滋病等新老传染病上,应加强疫情监测,针对疾病及其流行特点制定并采取疫情预防和控制措施,保护人民健康,维护社会稳定。     

基于EV71交叉保护抗原P1的前体蛋白B细胞抗原位点的预测

目的 获得EV71 P1保守氨基酸序列COBRA EV71 P1和基于此序列的B细胞抗原表位预测信息.方法 从NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)上下载获取1970-2010年间世界各地暴发流行的包含P1或VP1基因片段的EV71源序列和对应的氨基酸序列,根据VP1基因片段信息构建系统进化树,对源序列进行基因分组;对多基因型的EV71 P1氨基酸源序列采用多序列比对,以优势氨基酸位点代替差异氨基酸位点的方法,获得EV71 P1保守序列(COBRA EV71 P1),并运用IEDB Analysis Resource(http://tools.immuneepitope.org/main/)在线预测工具和DNASTAR软件里的Protean模块,运用单参数和二级结构预测综合考虑的方法,对COBRA EV71 P1前体蛋白的B细胞抗原表位进行预测.结果 成功比对出COBRA EV71 P1氨基酸序列,预测结果发现在COBRA EV71 P1前体蛋白的第10-24,41-60,68-82,208-225,328-345,498-514,592-609,664-678,772-786和841-855位点均具有较好的亲水性、表面可及性、柔韧性和抗原指数,并且在二级结构上含有易形成抗原表位的无规则卷曲和β-转角,有可能是COBRA EV71 P1前体蛋白的优势表位.结论 经生物信息学分析,推测COBRA EV71 P1可能具有三个基因型EV71 P1前体蛋白的候选B细胞线性抗原表位,为EV71重组多表位疫苗设计和多基因型病毒样颗粒疫苗实验提供了理论基础.     

多指标联合检测在肝癌筛查中的可行性研究

目的探索乙肝表面抗原(HBs Ag)、抗丙型肝炎病毒(Anti-HCV)、HBV-DNA和甲胎蛋白(AFP)多指标联合检测在肝癌筛查中的可行性。方法选择2014年5月至2015年10月收治的原发性肝癌患者139例为病例组。在2012年中山市肝癌筛查队列人群中按年龄±5和性别以4∶1与病例组随机匹配,选择对照样本556人纳入对照组;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测研究对象血清标本中HBs Ag、Anti-HCV和AFP;运用PCR体外扩增荧光定量(FQ-PCR)法检测血清HBV-DNA;比较两组四项指标的阳性率,探讨单指标和多指标联合检测在肝癌筛查中的敏感度、特异度和漏检率。结果单一指标筛查时,AFP敏感度最高,其次为HBs Ag。以HBs Ag为主体的联合筛查,不同指标联合筛查有不同的敏感度和漏检率,以HBs Ag、Anti-HCV、AFP联合HBV-DNA的敏感度最高,漏检率最低;其次为HBs Ag、AFP联合HBV-DNA;再次为HBs Ag、Anti-HCV联合AFP。结论联合检测HBs Ag、Anti-HCV和AFP进行初筛,可以极大地提高肝癌高危人群的早期筛查效果。     

中国大陆柯萨奇病毒A组16型全基因参照序列的初步建立和分析

目的 建立中国大陆柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)流行株的全基因参照序列.方法 从GenBank中获得CoxA16中国大陆分离株的所有全基因序列和氨基酸序列,用DNAstar/MegAlign软件对所得序列进行多序列比对和进化分析,按照参照序列标准拟定CoxA16的全基因参照序列和氨基酸序列,并与参考序列进行比对分析.结果 中国大陆分离的CoxA16毒株全基因序列共8株,分离于2005-2009年,其中2008年5株,广东省5株;通过序列比对获得了大陆CoxA 16全基因和氨基酸参照序列;参考毒株间核苷酸序列同源性介于79.0％～98.8％,氨基酸序列同源性为94.3％～99.9％,与参照序列的核苷酸同源性为79.7％～97.0％,氨基酸同源性介于95.1％～99.5％之间,同源性最低的为2008年安徽阜阳的FY18株.结论 比对分析了中国大陆CoxA16毒株全序列,成功建立了中国大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列.     

硝酸亚铈对自然衰老小鼠细胞免疫功能的影响

目的 探讨硝酸亚铈对自然衰老小鼠的细胞免疫功能的影响.方法 用自然衰老建立衰老模型,随机分配到O、0.005、0.05、0.5、5、10、15、30、60 mg/kg9个实验组,分别经口给予相应剂量的硝酸亚铈4 w.称量动物的体重和胸腺、脾脏的重量,计算胸腺指数和脾指数；通过MTT法观察淋巴细胞增殖,计算刺激指数(S1).结果 硝酸亚铈0.005、0.05、0.5、5、10、15 mg/kg组与自然衰老组比较胸腺指数和脾指数明显升高(P＜0.O1),硝酸亚铈0.005、0.05、0.5、5 mg/kg组与自然衰老组和正常对照组比较S1明显升高(P＜0.01).结论 低剂量硝酸亚铈能明显增强自然衰老小鼠的细胞免疫功能.     

1685名乙肝病毒携带者肝癌防治知识的问卷调查分析

[目的]了解乙肝病毒携带者肝癌防治知识的知晓情况及其影响因素,为提高肝癌筛查参与率提供参考.[方法] 2012年1～11月,在中山市小榄镇肝癌筛查乙肝表面抗原阳性人群中,对1750名乙肝病毒携带者进行现场一对一问卷调查.问卷主要内容包含肝癌的诊治方法、调查者对肝癌筛查的态度以及既往参加筛查的情况.[结果]共调查1750人,获得有效完整问卷1685份,有效问卷率为96.3％.调查人群知晓血清甲胎蛋白检查可用于诊断早期肝癌的占65.9％,知晓手术可治疗肝癌的占76.8％.96.8％的调查人群愿意经常参加健康体检.既往参加过免费抽血、免费B超的人群分别占调查人群的44.0％、9.4％.调查人群不参加筛查的原因主要是查出病有心理负担(53.4％).多因素Logistic分析显示,年龄对肝癌的诊断认知有影响,性别、年龄对肝癌的治疗认知有影响.[结论]绝大多数调查者体检意愿较强,既往筛查参与率却不高.缓解目标人群的心理压力,可提高人群的筛查参与率.应加强女性、低年龄组人群的癌症健康教育.在肝癌高危人群中,将肝癌筛查与健康教育紧密结合,有利于肝癌综合防治工作的进行.