机械牵张对人肺血管内皮细胞通透性的影响及其分子机制

目的观察机械牵张对人肺动脉内皮细胞（HPAEC）和人肺微血管内皮细胞（HPMVEC）通透性的影响及对通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5和Caveolin-1表达的调控。 方法采用机械牵张装置Flexcell FX-5000T对HPAEC（ATCC）和HPMVEC（ATCC）施加0.5 Hz频率10%或20%牵张应力。应用qRT-PCR及Western Blot方法检测机械牵张前后内皮通透性关键蛋白VE-cadherin、Claudin-5、Caveolin-1 mRNA和蛋白含量表达变化。采用细胞动态分析仪以及Transwell小室/异硫氰酸荧光素（FITC）-白蛋白法检测机械牵张后的HPAEC细胞和HPMVEC细胞通透性改变。 结果20%机械牵张后，与对照组比较，HPAEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达、Claudin-5 mRNA和蛋白表达和Caveolin-1 mRNA表达均下降（P<0.05），而Caveolin-1蛋白水平较对照组无明显变化；HPMVEC细胞通透性关键蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白表达，Caveolin-1 mRNA和蛋白表达均下降（P<0.05），而Claudin-5 mRNA和蛋白水平较对照组无明显变化。 结论机械牵张会导致肺血管内皮通透性增高，是通过下调通透性关键蛋白的表达，并且两种细胞的通透性影响机制有差异，HPAEC牵涉紧密连接，HPMVEC牵涉跨内皮细胞途径。