刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达

目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。     

人囊虫病T淋巴细胞亚群及血清IgE的变化

应用直接ＳＰＡ菌花环法对２７例囊虫病患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群进行检测，同时用ＥＬＩＳＡ法测定血清ＩｇＥ水平。发现患者ＣＤ３＋，ＣＤ４＋细胞的百分率明显降低，ＣＤ４／ＣＤ８比值明显下降，血清ＩｇＥ含量显著升高。经分析，患者ＣＤ４细胞、ＣＤ４／ＣＤ８比值与ＩｇＥ对数值呈负相关。揭示囊虫病患者Ｔ细胞亚群比例失调，免疫功能紊乱。本文对可能的免疫调节机制和发病机理进行了探讨。     

山东济宁骚扰库蚊对常用杀虫剂的抗性研究

目的 对山东济宁发现的骚扰库蚊进行鉴定,研究其对5种常用杀虫剂的抗性水平。方法 在某小区半地下车库积水中采集库蚊幼虫,对收集到的库蚊进行初步形态学和分子生物学鉴定,确定库蚊的种类。采用幼虫浸渍法研究其对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯、苏云金杆菌以色列变种(Bti)5种杀虫剂的抗性。结果 采集到的库蚊幼虫是骚扰库蚊,为山东省首次报道,其对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯、Bti的抗性倍数分别为117.34、53.47、113.50、140.00、2.71。结论 骚扰库蚊作为山东省新出现的蚊种,有必要对其生物学行为和流行病学意义进行深入研究。     

医院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌的分布及同源性分析

目的对医院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)的分布及同源性进行分析,为临床MDR-Ab感染的控制与治疗提供参考。方法采用纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)对本院2009年7月～2011年7月培养出的78株鲍曼不动杆菌(Ab)进行药敏试验,从中挑选出MDR-Ab,应用脉冲场凝胶电泳(PFDE)进行同源性分析,对同源性MDR-Ab感染者所在的床单元进行多部位取样培养及药敏试验,确定其感染来源、途径及分布特点。结果 1)共培养出的78株Ab,其中44株(56.4%)来自呼吸道标本;2)78株Ab对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦及米诺环素的耐药率相对较低,共分离出8株MDR-Ab,A型4株,B型3株,C型1株;3)医护人员的手及清理床旁仪器的抹布MDR-Ab检出率为66.7%。结论本研究培养出的A、B型MDR-Ab有同源性且存在交叉感染现象;医务人员的无菌观念及无菌操作技术薄弱,手部卫生状况差是医院ICU MDR-Ab流行的重要因素。     

巴西藁杆双脐螺对3株曼氏血吸虫的敏感性

人工湖等水利工程可能成为淡水螺的孳生地 ,增加人类及动物感染血吸虫的机会。作者在人工湖周围地区藁杆双脐螺的发生和分布的流行病学调查的基础上 ,研究了藁杆双脐螺对曼氏血吸虫毛蚴的敏感性。根据最近两年来螺的种群研究结果 ,选择湖区周围曼氏血吸虫病主要流行的地区进行调查。实验所需的 1 9个藁杆双脐螺种群中 ,大部分在流行区获得 ,另外两个对照种群来自于其它地区。螺分别暴露于 5个曼氏血吸虫毛蚴 (从 3株曼氏血吸虫分离获得 ,分别为CM、EC和PB株 )。观察感染的阳性率和尾蚴前期发育时间。暴露 6 0d后 ,尾蚴未逸出但仍然存活的…     

间接荧光抗体试验用于基本消灭丝虫病地区人群抗体水平的监测

本文报告了用马来丝虫成虫冰冻切片抗原作 IFAT 检测班氏丝虫微丝蚴血症者抗体阳性率为88.89％;非流行区健康居民抗体阳性率为3.92％。基本消灭丝虫病后8年的地区原微丝蚴血症者和阴性居民抗体阳性率分别为13.54％和10.84％;基本消灭后15年原微丝蚴血症者和阴性居民抗体阳性率分别为6.45％和5.16％;基本消灭后24年原微丝蚴血症者和阴性居民抗体阳性率分别为3.67％和3.96％。基本消灭丝虫病后15年的地区人群抗体阳性率已降到非流行区健康人群水平(X~2=0.48 P>0.05)。因此认为 IFAT 可作为我省丝虫病防治后期和基本消灭丝虫病后流行病学监测的主要方法之一。此外,观察到微丝蚴血症者血清抗体阳性率和阳性 GMRT 与微丝蚴密度无相关性。     

抗蚊媒中肠抗体对冈比亚按蚊生殖率和死亡率影响的研究

目的探讨冈比亚按蚊中肠抗原抗媒介免疫的作用,进一步研究抗媒介疫苗抗原. 方法解剖室内饲养的冈比亚按蚊雌蚊中肠,立即置于冷的pH 7.4 PBS溶液中,用SDS-PAGE方法获得分子质量为43 ku中肠蛋白抗原,皮下注射免疫大白兔3次,获得的免疫血浆膜饲冈比亚按蚊成蚊,与对照组比较,观察其对冈比亚按蚊死亡率和生殖率的影响. 结果膜饲免疫血浆的冈比亚按蚊的死亡率与对照组相比显著增高,死亡率增加56%;生殖率明显下降,实验组蚊虫平均产卵率为71.4个,对照组为88.1个,下降18.7%. 结论采用有效的方法分离蚊媒中肠的关键性抗原-中肠蛋白抗原可能成为抗蚊媒和其它抗媒介疫苗的靶抗原.     

山东省部分地区蚊虫种类与分布的变化

为解山东省部分地区的蚊虫种类、分布及生态习性,本文采用成蚊诱捕和幼虫采集等方法,调查了山东省济宁、临沂和青岛3个地区的蚊虫及其孳生环境。本次调查共捕获成蚊23059只,幼虫638瓶,经鉴定为5属17种。3个地区分布的蚊虫种类不同,其中青岛蚊种最多,有16种;各种蚊幼的孳生地类型也有所差异。与1990年有关报道相比,蚊虫种类的数量有所减少;在蚊虫种群构成方面,淡色库蚊所占比例明显下降,白蚊伊蚊数量增加,成为优势蚊种之一。中华按蚊等蚊幼的孳生地范围扩大,增加了传播疾病的潜在危险。     

淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的　获取淡色库蚊CYP4家族新基因。　方法　根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR的方法 ,从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T/A克隆方法 ,将获得的基因片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,经PCR鉴定重组成功 ,测序并进行比对。　 结果　共克隆出 3 6个阳性克隆 ,将其中 9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析 ,表明为CYP4家族中 9个新的cDNA序列 ,由GeneBank登录上网 ;经国际细胞色素P45 0命名委员会鉴定 ,属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P45 0的多样性及其与抗药性的关系打下基础。　结论　克隆 9个淡色库蚊基因部分序列 ,被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。     

山东城市居民蚊媒防制知识态度行为现状调查

目的了解城市居民有关蚊媒防制知识、态度和行为，为今后更好的开展相关疾病健康教育及蚊媒的防治工作提供科学依据。方法采用统一设计的调查问卷，本省内选择五个地区，每个区随机抽取300户居民家庭，每个家庭选一位18岁以上成人作为调查对象进行答卷。结果调查结果显示，居民对蚊媒传病知识方面有67．6％的被调查者知道疟疾是由蚊子传播，63．2％的居民知道雌蚊吸血，66．2％的居民能识别适合蚊子生长的环境。居民家庭及个人所采取的防护措施方面，有90．1％的居民家庭住房装有纱门纱窗，有54．6％的人认为居室内驱杀蚊虫最有效的是喷雾杀虫剂，54．8％的人愿意使用有芳香气味的杀虫剂。有19．19％的人认为悬挂蚊帐比较麻烦，夏季蚊帐内闷热，影响睡眠，超过半数（5z．3％）的人不愿使用涂抹在皮肤表面的驱避剂．居民对政府部门蚊媒防治措施方面，有91．2％的居民认为当地政府有必要采取统一的灭蚊措施。66．7％的人认为在本社区内消杀工作可以通过居民集资的做法是合理的，58．9％的居民认为每年每户家庭集资5元以下可以接受。结论城乡居民蚊媒防治知识偏低．卫生防疫部门与地方政府应重视开展蚊媒及其传播疾病的健康教育活动，在蚊媒防制工作中充分发挥群众的力量，以取得更好的成效。