维生素D受体基因FokⅠ及BsmⅠ多态性与老年男性2型糖尿病脂代谢异常的相关性

目的探讨维生素D受体（VDR）基因FokⅠ和BsmⅠ位点多态性与北京地区汉族老年男性2型糖尿病脂代谢异常的相关
性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）和基因测序技术,检测328例北京汉族老年男性VDR
基因FokⅠ和BsmⅠ位点基因型和等位基因频率,同时与相关临床指标进行比较。其中2型糖尿病患者（DM组）237例与正常对
照（NC组）91例。根据血脂情况将DM组分为非血脂异常组（DO组）134例和血脂异常组（DH组）103例。结果VDR基因Fok
Ⅰ和BsmⅠ位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,具有群体代表性。VDR基因FokⅠ位点F等位基因频率在DM组较
NC组显著升高（χ2=3.873,P=0.049,OR=1.439,95% CI：1.001-2.071）。在显性模型下,DM组FF基因型频率较NC组显著升高（χ2=
5.057,P=0.025,OR=1.756,95% CI：1.072-2.875）;DH组FF基因型频率较NC组显著升高（χ2=6.168,P=0.013,OR=2.06,95% CI：
1.161-3.663）;其余各组组间比较,基因型及等位基因频率差异均无统计学意义（P>0.05）;与Ff+ff基因型比较,FF基因型人群的
平均舒张压水平显著降低,而餐后2 h血糖、甘油三酯、尿酸的水平显著升高,差异有统计学意义（分别是P=0.039;P=0.035;P=
0.049;P=0.031）。BsmⅠ位点基因型及等位基因频率在各组间的差异均无统计学意义（P>0.05）。bb基因型人群血肌酐水平显
著高于BB+Bb基因型,差异有统计学意义（P=0.011）。结论VDR基因FokⅠ位点多态性可能是老年男性2型糖尿病合并脂代
谢异常的危险因素,而BsmⅠ多态性可能与老年男性2型糖尿病无相关。
     

氯吡格雷抗血小板功能的两种检测方法比较

目的氯吡格雷抗血小板功能的两种检测方法比较:Verifynow抗血小板治疗监测系统与流式细胞仪法.方法随机收集72例门诊、住院患者静脉血标本,同时采用Verifynow抗血小板治疗监测系统与流式细胞仪法检测血小板聚集功能.结果 Verifynow的测试结果P2Y12 Reaction Units(PRU)19例<240(26.4%);血小板膜糖蛋白分子PAC-1(Fg、Ca2+与血小板GPⅡb/Ⅲa形成复合物的受体)活性值主要集中在20-60,2例<20,12例>60;血小板膜糖蛋白分子CD62p(P选择素)活性值主要集中在10以下,3例>20;血小板膜糖蛋白分子PAC-1与CD62p活性值呈正相关(r=0.812,P<0.01);PAC-1、CD62p的活性值分别与PRU呈正相关(r=0.565,P<0.01;r=0.314,P<0.01);PRU与Verifynow测试的血小板聚集抑制百分率(INHI)呈负相关(r=-0.0802,P<0.01).结论 PAC-1、CD62p活性值与PRU呈正相关,相关性良好,PRU与INHI呈负相关.氯吡格雷抗血小板功能的两种检测方法存在同一性效用,但流式细胞仪法检测过程繁琐,对检验人员操作水平要求严格,若想得到药物的具体效用结果,必须在服药前、后分别抽血取样测定才能得出药物的抑制率;Verifynow操作简单快速,只需在服药后抽取一份样本即可得到样本的聚集基础值、服药后聚集值和药物的抑制率.     

利用shotgun蛋白组学策略鉴定健康生育男性精浆蛋白质

目的:鉴定正常生育男性的精浆蛋白质。方法:3例正常健康已生育的自愿者精液标本通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,抽提肽段后利用shotgun蛋白组学策略鉴定蛋白质。结果:正常生育男性精浆鉴定出331种蛋白质,相对分子质量范围8000～572068,等电点范围4.36～11.05;这些蛋白质按功能和生物进程归类,大致有51个(15.4%)运输蛋白质,11个(3.32%)细胞运动蛋白,63个(19.03%)信号转导蛋白质,147个(44.4%)蛋白酶及38个(11.5%)酶调节蛋白质,21个(6.3%)细胞凋亡蛋白,12个(3.62%)结构和支撑蛋白质,59个(17.8%)分子功能未知蛋白质。结论:shotgun蛋白组学策略是鉴定蛋白质的一个较好的方法。膜联蛋白及相关蛋白、Ras相关蛋白Rab是鉴定到的信号转导蛋白中的主要成员,因此推测钙离子和G蛋白信号通路是精子胞外信号传递到胞内的最重要途径,但是这些蛋白间的相互作用还不清楚。另外,精浆中鉴定到了大量的酶类,可能与维持精子活力和代谢有密切关系。     

慢性髓细胞白血病相关蛋白CMLAP的基因克隆化研究

目的了解慢性髓细胞白血病(CML)基因表达谱的规律,并对在CML中特异性高表达的一个新基因进行克隆、分析与鉴定。方法应用基因表达谱芯片技术,比较CML患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC)基因的表达差异。检索核苷酸序列数据库(GenBank)和蛋白质一级结构序列数据库(SwissProt),对差异表达的基因进行生物信息学分析,与已知功能基因序列进行同源性比较。根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新基因序列,据此设计并合成该基因序列的特异性引物,提取CMLPBMC的总RNA,以RT-PCR技术扩增获得该新基因的全长序列,并对克隆的基因及其编码产物的序列进行分析。结果在CML患者PBMC中克隆一个新的基因,经测序证实,其编码序列全长为1872个核苷酸(nt),编码产物由624个氨基酸残基(aa)组成,命名为CMLAP。在GenBank中注册,注册号为AY762229。结论基因表达谱芯片技术与生物信息学技术相结合,发现并鉴定、克隆了在CML中高表达的新基因CMLAP,为进一步研究CML发生发展的分子生物学机制奠定基础。     

我国现阶段粪便常规检查指标异常率调查分析

目的探讨现阶段中国人口模式、人群健康水平、公共卫生及医疗水平下，粪便常规检查对疾病检诊的指导意义。方法回顾性分析解放军总医院11030例粪便常规检查结果，按科室分类统计粪便颜色、性状、红细胞、白细胞、寄生虫：和潜血试验的异常检出率。结果各指标总的异常率为12．19％，其中以颜色异常最高，性状异常次之，再次是白细胞和潜血的异常率。值得关注的是寄生虫和大吞噬细胞、病理结晶等未检出。检查频次以消化内科、心脏内科和骨科为高，但是各指标的异常检出率砷不高；外科监护室在所有指标的异常率上均居首位，其次是门诊患者。结论此次调查结果提示：由于中国的人口模式和疾病流行谱已发生显著变化，使得现用的粪便常规检查对消化系统疾病和肠道寄生虫病诊治的指导意义已经大为降低。在以门诊筛检为主的初级医疗机构如乡村卫生院或城市社区门诊部等，粪便常规检验还具有相当的实用价值。但粪便检查依旧重要，其检测方向亟待改变、检测指标亟待丰富、检测手段亟待提高。     

老年高血压患者危险因素分析及其对靶器官损害的影响

目的分析老年高血压患者多重危险因素的聚集和其对靶器官损害的特征。方法选择老年高血压患者416例,根据合并危险因素的个数分为:A组(单纯高血压)24例,高血压合并1、2、3及≥4项危险因素分别为B组75例、C组125例、D组127例和E组65例,综合评估危险因素及其对靶器官损害的情况。结果与A组比较,D、E组患者体重指数、血糖、TG、LDL-C、肌酐、尿酸等指标明显升高(P<0.05),且需要更多的降压药物种类(P<0.05),C、D、E组患者左心室重量指数、颈动脉内膜中层厚度和尿微量白蛋白/肌酐均明显升高(P<0.05),内生肌酐清除率明显下降(P<0.05),并发冠心病、脑血管病和慢性肾脏疾病的发生率明显增加(P<0.05)。结论老年高血压患者以多重危险因素聚集为特征,危险因素越多,靶器官损害和并发症的发生越多,需要更多抗高血压药物联合应用以控制血压。     

光学比浊法与连续血小板计数法监测血小板聚集功能的比较

目的评价血小板功能检测仪PL-11应用的连续血小板计数方法 （PL-11）监测血小板功能的价值。方法通过光学比浊法（light transmittance aggregometry,LTA）与PL-11连续血小板计数法检测本院2012年26例服用氯吡格雷抗凝治疗的心血管病患者和45例健康志愿者的血小板聚集功能,分析两种方法相关性及差异。结果血小板聚集诱聚剂二磷酸腺苷（adenosine diphosphate,ADP）诱导的LTA与PL-11最大血小板聚集率（maximal aggregation ratio,MAR）存在较好相关性（r=0.766,P〈0.000 1）。分别用LTA与PL-11检测健康志愿者组、服药患者组,最大血小板聚集率均存在统计学差异（P〈0.000 1）。在两组人群中,LTA测得最大血小板聚集率范围均较PL-11广。PL-11在每例标本检测过程中,各测试点提供的平均血小板体积（mean platelet volume,MPV）变化趋势与检测期间血小板聚集率变化情况一致。结论 PL-11连续血小板计数法与＂金标准＂的光学比浊法检测血小板聚集功能时有较好的相关性,其应用价值可供临床及实验室参考。富血小板血浆标本与全血标本可能是两种方法检测结果差异的原因。     

检验医师临床思维能力培训中运用病例教学的探索与实践

在临床检验中，如何保证检验结果真实无误非常重要。如何对检验结果进行临床分析和解释．使之为疾病诊疗发挥作用，以体现其生命力和价值，亦是十分值得探讨的课题。纵观世界主要发达国家对临床检验医师的教育、培训和准人体系，均将试验数据的咨询和解释能力纳入要求。     

我院2000-2010年住院慢性阻塞性肺疾病患者死亡原因分析

目的 回顾性研究住院慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD) 死亡患者人群分布特征、死亡原因和相对危险度.方法 对2000 年1 月-2010 年3 月解放军总医院、北京协和医院及卫生部北京医院的住院病案数据库进行回顾性调查,共入选病例4 960 例,院内死亡患者361 例( 占7.28%),男性221 例,女性140 例,平均年龄男性(67.6±11.7) 岁,女性(72.2±10.4) 岁,平均住院(25.39±7.58)d,其中男性平均住院(27±7.9)d,女性(20±6.7)d.结果 1) 年龄、COPD、呼吸衰竭、慢性肾功能衰竭、糖尿病和血糖水平升高均与COPD 患者院内死亡呈正相关;2) 危险度排序为:呼吸衰竭19.94%、慢性肾功能衰竭14.40%、急性肾功能衰竭12.74%、肺源性心脏病11.36%、心力衰竭10.80%、急性心肌梗死9.42%、恶性肿瘤5.54%、心室扑动/ 心室颤动/ 室性心动过速5.26%、脑梗死4.98%、肺栓塞3.05%、脑出血2.49%.结论 COPD 死亡原因除呼吸系统外,其他系统疾病也是导致住院COPD 患者死亡的主要原因,所以,全身系统治疗和器官保护对COPD 患者的预后十分重要.     

胃腺癌患者粪便蛋白质的提取及初步质谱分析

目的 建立一个良好的粪便蛋白质提取、分析和鉴定的方法,为进一步探索消化系统疾病无创性诊治靶标提供新思路和奠定良好研究体系。方法 采用生理盐水、Tris-HCl和尿素缓冲液三种粪便蛋白质提取体系,处理健康人群、慢性萎缩性胃炎、胃腺癌术前、胃腺癌术后的粪便标本,通过SDS-PAGE进行比较,获得较好的粪便蛋白质提取方法。再利用液相串联质谱(1D LC-MS/MS)对提取的蛋白质进行初步分析。结果 生理盐水和Tris-HCl缓冲液提取粪便蛋白质的效率明显较尿素法高,损失少,是粪便蛋白质比较有效和合理的提取方法。不同人群来源的粪便中均含有丰富的蛋白质,正常人、胃腺癌手术前及术后鉴定到的蛋白质达一百多种,在组成和含量上个体差异明显。疾病与正常间、疾病治疗前后,粪便蛋白质指纹图谱变化大。胃腺癌术前粪便中含有大量的免疫球蛋白和角蛋白,同时也鉴定到了α1-抗胰蛋白酶,但在其术后和健康者粪便中未见到这一现象。结论 正常与胃癌、胃癌手术前与术后粪便蛋白质不仅有蛋白质种类的差异,而且相同蛋白质量的差异也相当明显。因此,利用蛋白质组学技术筛选人粪便中胃癌相关的蛋白质标志物有较强的可行性,但在未来的研究中需要差异分析结合定量质谱的方法进行。