介绍二种简便的菌种保存方法

菌种是所有与微生物有关的专业教学、科研、质控以至生产的必要条件。而菌种的保存是医学微生物实验室的一项重要工作。在细菌实验室中，用于研究材料的是某一系统的微生物-菌株。每株菌种的性质各个相同，其基础的研究和病原微生物的研究必须依靠菌种的重复实验。要使菌种长期保存，保持遗传性     

实验动物屏障环境的微生物学监测

采取不定期的对进入屏障系统的水、饲料、垫料的细茵学检测;对大小鼠饲育室进行落下茵的监测.结果表明,我们所使用的消毒和检测方法对屏障系统的动态环境维持有良好的效果.     

幽门螺杆菌黏附素A有效T和B联合抗原表位噬菌体展示和抗原性测定

目的 分析并确定幽门螺杆菌黏附素A(HpaA)分子中有效T细胞和B细胞联合(T/B)抗原表位.方法 重组表达HpaA(rHpaA)并免疫家兔制备抗血清.采用生物信息学技术预测和分析HpaA分子中T细胞和B细胞表位,PCB扩增T/B联合表位肽片段并构建其噬菌体展示系统.采用PEG/NaCl沉淀法提纯展示了T/B联合表位的重组噬菌体PⅢ蛋白(rPⅢ).分别以商品化幽门螺杆菌全菌IgG抗体和rHpaA抗血清为一抗,采用Western blot和ELISA对rPⅢ蛋白中展示的T/B联合表位进行筛选和鉴定.采用MTT检测rHpaA免疫小鼠脾细胞在不同重组噬菌体蛋白刺激下的增殖情况.结果 HpaA分子中共有5个T/B联合表位:HpaA10、HpaA37、HpaA79、HpaA116和HpaA143.所有T/B联合表位均成功地展示于M13噬菌体PⅢ蛋白表面.Western blot、ELISA和淋巴细胞增殖试验结果 均显示,HpaA116是优势抗原表位,HpaA37和HpaA79为有效抗原表位,HpaA10和HpaA143为无效抗原表位.结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌HpaA的T/B联合表位肽噬菌体展示系统.HpaA37和HpaA79,尤其是HpaA116是HpaA有效T/B联合抗原表位.     

开胸后心室除极和复极异常

健康两性家兔21只和豚鼠 5只,乌拉坦麻醉。室温在18-27℃。银质电极经胸骨左缘第4肋间隙穿刺轻触心包壁层记录左室表面心电图(LSECG),并同开胸心包全整和去心包后的记录结果进行比较,部分动物LSECG与Ⅱ导联ECG同步记录和在开胸后进行心外膜复温和心内膜降温的处理。结果如下:1.闭胸状态记录的LSECG,均见直立P波;QRS呈qRs、qR和Rs型;     

丹参注射液对大鼠酒精性肝损伤血清ALT、AST的影响

目的:通过观察丹参注射液对大鼠酒精性肝损伤血清ALT(丙氨酸氨基转移酶)、AST(天门冬氨酸基转移酶)值的变化,验证其对大鼠酒精性肝损伤的防治作用,并探讨其对防治酒精性肝损伤的机理,为临床用药提供依据.方法:SD大鼠30只,雌雄不拘,分为对照组、模型组(每日2次白酒灌胃,剂量按8～12g/kg/d)和治疗组(每日2次白酒灌胃2周后同时腹腔注射丹参注射液,剂量按10m1/kg/d).10周左右剖杀大鼠,经摘眼球取血,立即离心分离血清,按血清检查要求保存待检;全自动生化分析仪检测血清肝功能酶ALT、AST的变化.所有数据均采用方差分析,q检验进行分析处理.结果:模型组与对照组ALT、AST值显著性差异;治疗组与模型组比较具有显著性差异,与对照组比较无显著性差异.结论:丹参注射液可以通过降低血清ALT、AST的含量从而有效地防治大鼠的酒精性肝损伤.     

幽门螺杆菌黏附素A有效T和B联合抗原表位噬菌体展示和抗原性测定

Objective To analyze and determine the efficient T- and B-combined (T/B) antigenic epitopes in Helicobacter pylori adhesin A. Methods Recombinant HpaA (rHpaA) was expressed for immunizing rabbit to generate antiserum. T- and B-cell epitopes in HpaA molecule were predicted by using bioinformatic technique. The segments to encode T/B combined epitope peptides were amplified by PCR and the phage display systems of T/B combined epitopes were subsequently constructed. PEG/NaCl precipitation method was applied to extract the recombinant phage PⅢ (rPⅢ) that displayed T/B combined epitopes. By using either commercial IgG against whole-cell of Helicobacter pylori or rHpaA antiserum as the primary antibody, the T/B combined epitopes displayed in rP Ⅲ s were screened and identified by Western blot and ELISA. MTT was applied to determine the proliferation of rHpaA-immunized mouse splenocytes after stimulation of the different recombinant rPⅢ proteins. Results In the HpaA molecule there were five T/B combined epitopes: HpaA10, HpaA37, HpaA79, HpaA116 and HpaA143. All the T/B combined epitopes were successfully displayed on the surface of PⅢ protein of phage M13. The results of Western blot, ELISA and MTT confirmed that HpaA116 was the predominant antigenic epitope, both HpaA37 and HpaA79 were the efficient antigenic epitopes. However, HpaA10 and HpaA143 were identified as ineffective antigenic epitopes. Conclusion The phage display systems of T/B combined epitope peptides of H. pylori adhesin A have been successfully generated in this study. HpaA37 and HpaA79, especially HpaA116 are the efficient T/B combined antigenic epitopes in HpaA of H. pylori.     

神经肽Y在小鼠胃发育中的表达及变化

目的: 观察神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)在小鼠胚胎胃内的表达, 分布及发育规律, 探讨胃组织形态的变化、功能与NPY的关系.方法: 采用HE染色法和免疫组化SABC法, 免疫组化图像分析系统对切片进行定量测定, 研究小鼠胚胎13D(embryonic days, E13D)至出生前(E21D)胃NPY的表达情况.结果: 首先于胚胎14 d的肌间处及黏膜上皮出现NPY免疫反应物阳性表达, 随发育相继出现在黏膜下层, 固有层及黏膜肌层内, 在鼠胎胃发育的E14D-E18D, 免疫物反应阳性由弱到强, E18D到高峰. NPY在胃壁的总数密度E15D时明显增加, E15D组与E14D组间有差异(2.26±4.19 vs 1.05±3.91, P<0.05); 总面密度E18D时明显增加, 与其之前的E14-16D及随后的E19D-21D差异具有显著性(9.00±3.41vs 1.12±1.10, 1.88±4.75, 3.77±5.09, 3.39±3.11, 3.36±4.11, 3.43±3.16, P<0.01); 黏膜阳性表达密度E18D较其他组显著升高(7.35±5.01 vs 2. 45±2.79, 3.41±3.25, 5.89±7.43,3.55±3.78, 4.33±6.52, 3.21±6.25, 2.77±6.13, P<0.05或0.01).结论: E14D-E18D是鼠NPY在胎鼠胃发生发育的一个关键时期; NPY发生发育与胃发育及功能的建立有着密切关系.     

克大克消毒液抗菌作用的研究

为评价以聚烯烃基胍为杀菌成分的消毒液的抗菌活性 ,应用琼脂打孔扩散和试验稀释法 ,测定了该液对 8种常见细菌的抑菌效果和最小杀菌浓度。结果 ,以含 5 0 0mg/L聚烯烃基胍的消毒液对白色念珠菌和枯草杆菌的抑菌活性较强 ,抑菌圈 >16mm ;对大肠杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌及变形杆菌有一定的杀菌作用 ,抑菌圈为 10～ 14mm。测出的该消毒液最低杀菌浓度分别是白色念珠菌为 10 0mg/L ,金黄色葡萄球菌和伤寒杆菌为 2 5 0mg/L ,其它菌为 5 0 0mg/L。结论 ,该消毒液具有广谱的抗菌作用     

AKR/J小鼠的表型特征与疾病模型价值评估

目的 深入分析AKR/J小鼠的与胆固醇代谢相关的表型特征及其内在联系,探讨其作为人类疾病模型的价值.方法 AKR/J小鼠为实验组,BABL/C小鼠为对照组,取两组小鼠毛发镜下观察;取两组小鼠的肾上腺、卵巢、睾丸,冷冻切片后进行油红O染色;检测并比较两组小鼠肾上腺相关激素(皮质素、醛固酮、ACTH)水平;检测并比较血常规、血糖、血脂(甘油三酯,总胆固醇)、血电解质及血压.结果 AKR/J小鼠内部毛发结构排列紊乱,肾上腺脂类含量明显少于对照鼠,皮质素、醛固酮、总胆固醇浓度比对照小鼠有显著性降低(P＜0.01);血液Na+、Cl-、Mg2浓度及平均血红蛋白含量低于对照鼠,Ca2+浓度高于对照鼠(p＜0.05),其他各项指标均无显著性差别.结论 AKR/J小鼠是人类毛发结构缺陷、肾上腺皮质机能减退等疾病的天然模型,也是胆结石及动脉粥样硬化的抗性模型.     

局麻条件下在体记录心肌单相动作电位技术

本文介绍保持家免在局麻状态下,用特制的接触电极经胸壁穿刺在心包上记录心外膜心肌单相动作电位的技术,所记录的电位图形不失真而且稳定。动作电位振幅、平均去极化速率、复极10％、20％、50％和90％的时限(n=471)分别为26.77mv、1.6v/s、45.70ms、66.93ms、98.78ms和124.21ms,本技术已用于药物和电解质等因素对心肌电活动影响的研究。