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1.
幽门螺杆菌cagA、oipA、iceA1基因的检测及其意义 总被引:9,自引:0,他引:9
〔目的〕检测分离自胃炎、胃溃疡患者的幽门螺杆菌 (Hp)cagA、oipA、iceA1基因 ,了解这些基因与消化性疾病的关系。〔方法〕取 163份临床胃活检标本 ,用布氏平板分离培养Hp ,分离培养出来的细菌 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增cagA、oipA、iceA1基因片段 ,用卡方检验进行统计学分析。〔结果〕163份标本中检出Hp 5 8株 ,检出率为 3 5 .6%。ca gA基因的阳性率为 75 .9%(4 4 5 8) ,其中胃炎 66.7%(2 8 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;oipA基因的阳性率为 46.6%(2 7 5 8) ,其中胃炎 2 6.2 %(11 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;iceA1基因的阳性率为 3 1.0 %(18 5 8) ,其中胃炎 2 1.4%(9 42 ) ,胃溃疡 3 3 .3 %(9 16)。卡方检验分析表明胃溃疡患者HpcagA、oipA、iceA1阳性率均显著高于胃炎患者。〔结论〕HpcagA、oipA、iceA1毒力基因在胃溃疡患者的检出显著高于胃炎患者。 相似文献
2.
幽门螺杆菌耐药性测定及其机制的初步探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
用7种抗生素对44株临床分离的幽门螺杆菌(H.p)进行耐药性研究,并对其中19株H.p进行质粒检测,发现H.p对氨苄青霉素及痢特灵敏感,对庆大,氟哌酸等5种抗生不同程度耐药现象,质粒检出率为31.6%,质粒与本试验所用抗菌素耐药性无关,研究还发现亚抑菌浓度抗生素可引起H.p发生球形变,本文对H.p的球形变现象及其与耐药性关系进行探讨。 相似文献
3.
目的:分片段克隆表达幽门螺杆菌oipA基因,确定抗原性最强的重组蛋白肽段.方法:从Hp国际标准株NCTC11637中获取oipA全长基因,克隆至pGEM-T载体并鉴定正确,以重组pGEM-T/oipA为模板PCR扩增6个不同大小的oipA基因片段,与表达载体pET-42a连接,转化大肠杆菌BL-21,重组子经PCR、酶切、测序鉴定.IPTG诱导重组蛋白肽段的表达,经Western Breeze 化学发光法鉴定融合蛋白;优化诱导时间和IPTG浓度,诱导重组蛋白大量表达;Ni-NTA His*Bind树脂亲和纯化表达产物;羊抗Hp多克隆抗体,Western blot法检测纯化蛋白的抗原性,间接ELISA法筛选抗原性最强的重组肽段.结果:6条oipA基因片段在大肠杆菌中都得到了表达,表达的蛋白肽段均可被抗Hp多克隆抗体识别,具有抗原性,其中反应性最强的是最小的蛋白肽段.结论:oipA基因片段可在原核系统中表达,所获取的最小的肽段抗原性最强,可望制备检测血清相应抗体的试剂盒. 相似文献
4.
目的 评价通过检测血清CagA抗体鉴定幽门螺杆菌高毒株感染的可行性.方法 采集福州地区临床门诊行胃镜检查的胃活检标本,行病理检查和幽门螺杆菌(Hp)培养;采集病人血清,PCR法检测分离所得的Hp cagA基因;EIA法测定血清CagA抗体,分析cagA基因的检出与消化性疾病的关系,比较CagA基因与CagA抗体的检测结果,评价应用CagA抗体检测Hp高毒株感染的可行性.结果 分离获得80株Hp,其中54株检出cagA基因,阳性率67.50%.各病理类型胃病患者cagA基因阳性率:浅表性胃炎77.42%,萎缩性胃炎62.86%,胃溃疡58.33%,胃癌50.00%,各组间差别无统计学意义(P>0.05);CagA抗体阳性率55.00%,敏感度74.07%,特异度84.62%,约登指数58.69%,调整一致性77.68%.结论 检测血清CagA抗体用于诊断高毒力Hp感染存在局限性. 相似文献
5.
幽门螺杆菌检测法比较及药敏试验 总被引:51,自引:0,他引:51
对272例慢性胃病患者,采用血清抗幽门螺杆菌(Hp)抗体法检验并与胃镜活检组织Hp快速尿素酶试验同步比较,结果Hp检出率相似。对其中132例Hp培养阳性者进行药敏试验,结果羟氨苄青霉素最敏感,而灭滴灵不如链霉素和庆大霉素敏感。 相似文献
6.
目的比较研究幽门螺杆菌(Hp)的不同检查方法及药敏情况。方法对272例慢性胃病患者做胃镜检查,取活组织做Hp快速尿素酶试验、胃粘膜Hp培养,Hp培养阳性者132例做药敏试验,同时检测血清抗Hp抗体。结果胃粘膜Hp快速尿素酶试验阳性率以十二指肠球部溃疡者最高(84.62%),胃癌最低(64.71%),血清抗Hp抗体检测阳性率与之相似。药物敏感试验结果,羟氨苄青霉素为高敏药物,甲硝唑敏感性差。结论血清抗Hp抗体检测可代替胃粘膜Hp快速尿素酶试验,用于大规模流行病学调查,也可作为感染Hp的初筛试验。 相似文献
7.
目的:研究球形幽门螺杆菌生物学性状和蛋白产物发生的改变。方法:通过延长培养时间和亚抑菌浓度抗生素--灭滴灵的作用,分别获得两类球形幽门螺杆菌(Hp)。结果:两种不利于Hp生长的环境在引起Hp发生球变的同时,每毫升菌落形成单位(CFU/ml)减少,尿素酶活性降低。结论:球形Hp尿素酶活性低下,且在常规培养基上不能生长。抗生素的作用比延期培养更快使Hp发生球形变异。聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质条带分析发现抗生素诱变的球形Hp与正常形态Hp基本相似,与延期培养的Hp明显不同。 相似文献
8.
通过采用延长培养时间和亚抑菌浓度抗生素作用,使幽门杆菌(Hp)发生球形变异,电镜下观察球形Hp结构,并对球形Hp进行尿素酶活性测定和Hep-2细胞粘附试验,电镜下计算粘附率,粘附指数,侵袭率,侵袭指数。结果表明球形Hp具有完整的细胞壁,它不是L型细菌,尿素酶活性降低或消失,细胞粘附能力减弱,侵袭力与正常Hp无差异,以上两种方法诱变产生的球形Hp对细胞的粘附能力无差异。 相似文献
9.
目的 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)可塑区—JHP940、JHP947、JHP949基因与胃、十二指肠疾病的关系;鉴定JHP947基因是否表达蛋白。方法 从胃粘膜活检组织中分离培养Hp,PCR扩增分离菌株的JHP940、JHP947J、HP949基因,分析基因检出与临床疾病的关系;以Biodesign软件确定并合成3个JHP947肽段,KLH交联免疫家兔获得多克隆抗体,免疫印迹方法鉴定JHP947基因是否表达相应蛋白。结果 分离获得108株Hp,目的基因在胃炎、溃疡、胃癌标本中的检出率分别为:JHP940 30.6%、22.6%、40.0%,JHP947 3.2%、32.2%、33.3%,JHP949 0、3.2%、13.3%,经χ^2检验,JHP940在胃炎、溃疡、胃癌各组中的检出率差异均无统计学意义(P〉0.05);JHP947在胃癌、溃疡组中的检出率显著高于胃炎组(χ^2=12.04,P〈0.002 27;χ^2=8.64,P〈0.004 17),而在胃癌、溃疡组中的检出率差异无统计学意义(P〉0.012 5);JHP949在胃癌组中的检出率显著高于胃炎组(χ^2=8.48,P〈0.004 17),而在其他组间差异无统计学意义(χ^2=1.69~2.02,P〉0.012 5)。JHP947和JHP949的检出率呈正相关(χ^2=6.034,P〈0.05),JHP947和JHP940的检出率无显著相关性(χ^2=2.939,P〉0.05)。HpJ99和临床分离株的JHP947基因均表达相应蛋白。结论 JHP947与胃癌和消化性溃疡的发生密切相关,JHP947和JHP949的检出率呈正相关。JHP947基因表达相应蛋白。 相似文献
10.
幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因克隆、表达及抗原性检测 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 克隆幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因,确定CagA蛋白与相应抗体亲和力最强的肽段。方法 根据幽门螺杆菌cagA全基因序列以DNAMAN软件设计5对引物,采用PCR方法扩增出5条门螺杆菌cagA基因片段。将PCR扩增产物插入原核表达载体pGEX-3X并转化至大脉杆菌Top10中,形成5种重组质粒。经PCR、双酶切和测序鉴定后,以异丙硫半乳糖苷(IPTG)诱导其表达CagA蛋白肽段。包涵体经8mol/L尿素初步纯化后,运用ELISA方法检测其抗原性并确定相应抗体亲和力量强的CagA蛋白肽段。结果 5条cagA基因片段在大肠杆菌中都得到了表达,表达的蛋白均具有强弱不等的抗原性,其中66kD的蛋白肽段与抗CagA抗体亲和力最强。结论 66kD的蛋白肽段与抗CagA抗体亲和力最强。 相似文献