血清炎症因子在OLETF鼠2型糖尿病发病过程中的动态变化

目的探讨自发性T2DM大鼠模型OLETF鼠发病过程中炎症因子与IR的关系。方法 20只雄性OLETF鼠(OLETF组)和10只雄性LETO鼠(LETO组)在8、32和40周龄被分批处死。检测血糖和血浆胰岛素水平。免疫散射比浊法检测各组血清高敏C反应蛋白(hsC-RP),ELISA检测血清TNF-α、IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平,并计算ISI。结果 8周龄时,OLETF组血清hsC-RP和MCP-1均高于LETO组;随周龄增加,OLETF组血清hsC-RP、TNF-α、IL-6、MCP-1水平逐渐升高,且40周龄时,均高于LETO组,仅ISI低于LETO组(P0.01)。32周龄和40周龄时,ISI与hsC-RP、IL-6呈负相关(P0.01),血清各炎症因子之间互为正相关(P0.05)。结论 OLETF鼠血清炎症因子在糖尿病发生前即升高,并随病情进展持续升高,与IR密切相关,参与T2DM的发生发展。     

糖基化终产物对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性及SAA3基因表达的影响

目的探讨糖基化终产物（AGE）对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性及SAA3基因表达的影响。方法以2-DG摄入法观察葡萄糖的摄取率,用RT-PCR检测脂肪因子SAA3mRNA的表达。结果AGE显著减少3T3-L1脂肪细胞在胰岛素刺激下的葡萄糖摄取,呈剂量和时间依赖效应;AGE显著增加脂肪细胞SAA3mRNA的表达;呈剂量依赖方式。结论AGE能降低3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的摄取,增加3T3-L1脂肪细胞对淀粉样蛋白的表达。     

双嘧达莫负荷超声造影在诊断冠心病中的应用价值

目的 探讨双嘧达莫负荷超声造影(DIPSEC)在诊断冠心病(CAD)中的应用价值。方法 选取178例行DIPSEC及冠状动脉造影(CAG)的患者,以冠状动脉狭窄≥50%为诊断CAD标准,CAG的结果为对照标准,应用四格表分别计算DIPSEC判断前降支合并病变、右冠状动脉合并病变及回旋支合并病变的准确度,以及与CAG对照的一致性。结果 冠状动脉狭窄≥50%为CAD诊断标准时,以CAG结果为对照标准,DIPSEC诊断上述3支冠状动脉合并病变的准确度分别为92.6%、80.9%、82.0%,以及样本整体病变的准确度为87.1%;上述3支冠状动脉合并病变一致性检验Kappa值分别为0.840、0.626、0.646,样本整体病变的一致性检验Kappa值为0.630。结论 DIPSEC在诊断冠心病中与冠状动脉造影的结果一致性较好,能早期诊断及指导治疗冠心病,且DIPSEC对前降支合并病变的准确度高于其他两支合并病变。     

糖尿病酮症酸中毒合并全身炎症反应综合征患者血清TNF-α、IL-10动态临床研究

目的:探讨糖尿病酮症酸中毒合并全身炎症反应综合征(SIRS)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)含量的动态变化及其临床意义。方法:42例糖尿病酮症酸中毒患者为SIRS组18例和non-SIRS组24例。分别于发病24h内及3、7、14天晨起空腹抽取静脉血,采用放射免疫法(RIA)测定血清TNF-α、IL-10水平,并观察2组患者的多器官功能障碍综合征(MODS)发生率及死亡率。结果:non-SIRS组发病24h及3、7、14天不同时间血清TNF-α比较,差异有显著性意义(F=2.852,P=0.039);SIRS组不同时间血清TNF-α比较,差异有显著性意义(F=3.341,P=0.022);各时间点SIRS组血清TNF-α水平均明显高于non-SIRS组(P=0.000)。non-SIRS组发病24h及3、7、14天不同时间血清IL-10比较,差异有显著性意义(F=13.379,P=0.000);SIRS组不同时间血清IL-10比较,差异也有显著性意义(F=23.273,P=0.000);2组在3天时IL-10达到高峰,以后随着时间而逐渐下降,发病24h及3、7、14天时SIRS组血清IL-10均明显高于non-SIRS组(P<0.05)。SIRS组患者的死亡率高达11.11%(2/18),而non-SIRS组患者死亡率仅4.2%(1/24),2组比较,差异有显著性意义(Z=-5.695,P<0.01);SIRS组患者中有61.11%(11/18)出现MODS,non-SIRS组中有20.83%(5/24)出现MODS,差异有显著性意义(Z=-2.628,P<0.01)。结论:TNF-α及IL-10参与了糖尿病酮症酸中毒的发生、发展病理生理过程,具有预测价值。     

人胰岛新生相关蛋白基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

目的 在毕赤酵母中分泌表达具有生物学活性的重组人胰岛新生相关蛋白(rhINGAP),用于INGAP的生理功能研究和动物试验.方法 通过PCR扩增INGAP基因,插入到重组质粒α/pUC18的α因子信号序列的Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点处,再将融合基因αINGAP重组到表达质粒pPIC9K的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ之间,Sal Ⅰ酶切线性化重组质粒INGAP/pPIC9K,电穿孔转化毕赤酵母,营养缺陷型培养基MD和G418筛选含高拷贝表达盒的酵母转化子,PCR鉴定是否含有目的 基因INGAP,甲醇诱导rhINGAP的表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的 蛋白,用ELISA定量测定生物学活性.结果 成功构建了重组表达质粒INGAP/pPIC9K,筛选得到3个阳性转化子,表达产物具有良好的抗原活性.结论 实现了rhINGAP在毕赤酵母中的高效分泌性表达.     

血红素加氧酶1在高糖和晚期糖基化终末产物诱导的THP-1细胞氧化应激中的作用

目的 探讨血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)在高糖和晚期糖基化终末产物(AGE)诱导的人单核细胞氧化应激中的作用.方法 根据是否加用15 mmoL/L葡萄糖(高糖)+100μg/ml AGE或HO-1抑制剂锌原卟啉(zinc protoporphyrin,ZnPP),将人单核细胞白m病细胞株THP-1细胞分为正常糖组(5 mmoL/L)、高糖+AGE组、高糖+AGE+ZnPP组、正常糖+ZnPP组,孵育24 h后收集细胞及培养液上清,榆测各组细胞的活性氧簇(ROS)、培养液上清丙二醛和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及HO-1 mRNA和蛋白的表达.结果 高糖+AGE组和正常糖+ZnPP组的ROS、丙二醛和TNF-α水平均显著高于正常糖组(均P<0.05).高糖+AGE+ZnPP组的ROS、TNF-α水平显著高于高糖+AGE组(均P<0.05).高糖+AGE+ZnPP组的HO-1 mRNA和蛋白表达水平显著低于高糖+AGE组(0.39+0.02±0.89 vs 0.09±0.384±0.00 vs 0.81±0.02,均P<0.05).结论 ZnPP通过抑制HO-1表达加重高糖和AGE导致的单核细胞氧化应激,HO-1可能在糖尿病氧化应激中起重要作用.     

医学统计学课程网络教学模式的构建与思考

利用计算机网络开发教学资源,采用随机分组方式组织进行三轮医学统计学课程网络教学和传统教学对照试验,针对试验结果进行反馈调查分析,探讨医学统计学课程网络教学模式的适宜性和有效性,激发学生网络自主探究式学习的积极性和学习热情,提高教学质量和教学水平。     

试论个性化职业指导

个性是影响人的事业成败的关键因素。每个人的个性都千差万别，不同职业对人的个性心理特征的要求也不同。根据大学生的个性需求实际情况，突出个性化职业指导内容和方法，进行有针对性的指导，促进学生潜能和特长的充分发展，可以提高职业指导的效果。     

广东汉族人纤溶酶原激活剂抑制物-1基因4G/5G多态性与2型糖尿病肾病的相关性

目的 探讨纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)基因4G/5G多态性与广东汉族人2型糖尿病肾病(DN)发病的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析,对147例病史7年以上的2型糖尿病患者[其中DN患者77例,糖尿病非肾病(DNN)患者70例]和26名健康人进行了PAI-1基因4G/5G多态性分析。结果 DNN组PAI-1基因的4G/4G基因型、基因频率显著高于DN组(χ²=13.008,P<0.01);与5G/5G基因型相比,DNN组PAI-1基因4G/4G型对DN组的比数比为1.447,95%的可信区间0.533~3.934(P<0.05),差异有显著性。而DN与DNN组PAI-1基因4G等位基因频率无显著差异(χ²=1.22,P>0.05);结论 PAI-1基因4G/4G基因型与广东汉族人2型DN的发病有关联,4G/4G基因型广东汉族2型糖尿病人易发生DN。     

人胰岛新生相关蛋白基因毕赤酵母表达载体的构建

目的 构建分泌表达具有生物学活性的重组人胰岛新生相关蛋白(rhINGAP)载体毕赤酵母.方法 通过PCR扩增INGAP基因,插入到重组质粒α/pUC18的α因子信号序列处,再将融合基因αINGAP重组到表达质粒pPIC9K,Sal Ⅰ酶切线性化重组质粒αINGAP/pPIC9K.电穿孔转化毕赤酵母,营养缺陷型培养基MD和G418筛选含高拷贝表达盒的酵母转化子,PCR鉴定是否含有目的 基因INGAP,甲醇诱导rhINGAP的表达,Western blotting鉴定目的 蛋白,ELISA法定量测定其含量.结果 重组表达质粒αINGAP/pPIC9K经酶切获得758bp片段,符合α因子与INGAP片段融合的长度,筛选得到3个阳性转化子,培养上清含有与抗INGAP抗体反应的蛋白.结论 成功构建了分泌INGAP蛋白的毕赤酵母菌株.