肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体表达载体的构建

【目的】构建一种携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（TRAIL）基因的重组腺相关病毒载体。【方法】首先构建携带可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（sTRAIL）基因的穿梭质粒pAAV—sTRAIL．将穿梭质粒共转染入HEK293细胞中．采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-8TRAIL。以噬斑分析法筛选单克隆重组腺相关病毒；PCR法鉴定阳性重组腺相关病毒；氯化铯密度梯度离心法纯化病毒；紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度，噬斑分析法测定病毒感染滴度；Westem blot检测rAAV—sTRAIL在293细胞中的表达情况。【结果】成功构建了重组腺相关病毒载体rAAV—sTRAIL，制备的病毒纯度好、滴度高，且在293转导细胞中能有效表达目的基因sTRAIL。【结论】构建的重组腺相关病毒载体rAAV-8TRAIL．为研究TRAIL抗肿瘤细胞效应及临床应用提供先进的载体系统。     

结肠镜在结直肠癌防治中的作用

目的通过对结肠息肉及结肠癌疾病的分析,强调结肠镜在结肠癌的早期诊治及早期预防中的意义。方法回顾性对我院多年来617例结肠镜检查中所发现的结肠息肉及结肠癌病例进行分析。结果共检出息肉134例（占21.7%）、结肠癌35例（占5.67%）,结肠息肉及结肠癌均好发于直、乙状结肠。结论结肠镜检查能提高结肠息肉的早期干预治疗,强调结肠镜在结肠癌早期诊治的作用（有助于提高结直肠癌的防治）。     

miR-30c对前列腺癌的功能调控作用

目的研究mi R-30c在前列腺癌中的功能调控作用,获得其调控前列腺癌侵袭及转移的可靠证据,进而揭示其在前列腺癌中可能的调控机制。方法从mi RNA芯片检测结果中获得前列腺癌相关的差异表达的mi R-30c分子,进一步通过mi R-30c过表达质粒转染前列腺癌细胞,运用Transwell检测细胞侵袭变化,划痕实验检测细胞转移变化。结果 LNCa P/DU145转染质粒后,mi R-30c的表达水平显著高于阴性对照组(LNCa P:倍数=3.87,P<0.001;Du145:倍数=4.32,P<0.001)。Transwell侵袭实验表明,mi R-30c转染组的LNCa P/DU145细胞侵袭的数量显著低于对照组(LNCa P:67 vs.120个/视野,P<0.001;DU145:130 vs.220个/视野,P<0.001)。划痕实验结果发现mi R-30c转染后,LNCa P/DU145细胞实验组转移的数量显著低于对照组(LNCa P:241 vs.520个/视野,P<0.001;DU145:490 vs.660个/视野,P<0.001)。结论 mi R-30c可抑制前列腺癌细胞的侵袭及转移,这说明mi R-30c在前列腺中确实起着抑癌的作用,其可能通过KRAS-MAPK信号通路抑制前列腺癌的侵袭及转移。     

肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体表达载体的构建

[目的]构建一种携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)基因的重组腺相关病毒载体。[方法]首先构建携带可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(sTRAIL)基因的穿梭质粒pAAV-sTRAIL,将穿梭质粒共转染入HEK293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL。以噬斑分析法筛选单克隆重组腺相关病毒:PCR法鉴定阳性重组腺相关病毒;氯化铯密度梯度离心法纯化病毒;紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度,噬斑分析法测定病毒感染滴度;Western blot检测rAAV-sTRAIL在293细胞中的表达情况。[结果]成功构建了重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL,制备的病毒纯度好、滴度高,且在293转导细胞中能有效表达目的基因sTRAIL。[结论]构建的重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL,为研究TRAIL抗肿瘤细胞效应及临床应用提供先进的载体系统。     

苦参与茯苓对肝纤维化的作用及机制的研究

目的研究苦参、茯苓两种中药抗肝纤维化的作用及其机制。方法以生理盐水作为对照,将苦参和茯苓两种中药用于大鼠肝纤维化模型和大鼠肝星状细胞（HSC）。观察肝组织形态变化;检测血透明质酸酶、Ⅳ型胶原含量;MTT法检测HSC细胞增殖抑制率;免疫组化法检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、转化生长因子（TGF）β1、血小板衍生生长因子（PDGF）的表达。结果与对照组比较,中药处理组的HSC细胞增殖抑制率升高（P〈0.05）;血清透明质酸、Ⅳ型胶原含量减少（P〈0.05）;肝组织TIMP-1、TGFβ1及PDGF的表达均减少（P〈0.05）。结论两种中药均能减缓大鼠肝纤维化的发生,其机制可能与这些中药能下调TGFβ1及PDGF表达、抑制HSC增殖活化、促进细胞外基质降解、减少肝纤维结缔组织沉积有关。     

脑室外引流并用尿激酶灌洗治疗高血压脑-脑室出血

目的:观察脑室外引流并用尿激酶灌洗治疗高血压脑出血破入脑室的疗效。方法:分析30例高血压脑出血破入脑室的病人的资料。无中线脑室系统积血及梗阻的单侧脑室出血(Ⅰ型)18例;有中线脑室系统积血伴脑脊液循环梗阻的单侧脑室铸型出血(Ⅱ型)8例,全脑室系统铸型出血(Ⅲ型)4例。入院后均经侧脑室额角插入内径3mm的硅胶引流管,用尿激酶灌洗、引流4～14天,平均8.2天。结果:30例病人9例死亡,死亡率为30％。术后并发症有肺部感染、应激性溃疡、水盐糖代谢紊乱、肾功能不全、顽固性颅内高压、脑梗塞等。死亡多因并发症引起。21例术后随访6个月以上,生活能力(activity daily living, ADL):Ⅰ15例、Ⅱ3例、Ⅲ2例、Ⅳ1例。结论:脑室外引流并用尿激酶灌洗术,方法简易,损伤小。是高血压脑-脑室出血一种重要的治疗方法,死亡率低,恢复良好。     

成人麻疹20例临床分析

目的：探讨成人麻疹新的临床特点。方法：通过对20例成人麻疹患者的临床资料进行分析。结果：成人麻疹近年有增多趋势，由于流行特征的改变，容易误诊，造成流行。结论：加强麻疹疫苗的接种。     

14例小肠间质瘤的影像学诊断分析

目的探讨小肠间质瘤（small intestine stromal tumors,SISTs）影像学诊断价值。方法回顾性分析14例经手术病理证实的小肠间质瘤的消化道钡餐、多层螺旋CT及小肠镜资料。结果术前9例行消化道气钡双对比造影检查,4例检出病变,均未提示间质瘤可能。14例行CT检查,全部检出肿瘤,定性诊断准确8例;2例行小肠镜检查,未能检出病变。病理结果为SISTs,其中良性间质瘤2例,潜在恶性3例,恶性9例。结论SISTs缺乏特征性临床表现。小肠镜检查成功率低,且应用不普及。消化道气钡双对比造影诊断率低,CT检查具有特征性,多种检查互相配合、结合临床表现有助于做出明确诊断。     

苦参与茯苓对肝纤维化的作用及机制的研究

目的研究苦参、茯苓两种中药抗肝纤维化的作用及其机制。方法以生理盐水作为对照,将苦参和茯苓两种中药用于大鼠肝纤维化模型和大鼠肝星状细胞(HSC)。观察肝组织形态变化;检测血透明质酸酶、Ⅳ型胶原含量;MTT法检测HSC细胞增殖抑制率;免疫组化法检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、转化生长因子(TGF)β1、血小板衍生生长因子(PDGF)的表达。结果与对照组比较,中药处理组的HSC细胞增殖抑制率升高(P0.05);血清透明质酸、Ⅳ型胶原含量减少(P0.05);肝组织TIMP-1、TGFβ1及PDGF的表达均减少(P0.05)。结论两种中药均能减缓大鼠肝纤维化的发生,其机制可能与这些中药能下调TGFβ1及PDGF表达、抑制HSC增殖活化、促进细胞外基质降解、减少肝纤维结缔组织沉积有关。