髓样相关蛋白14真核表达载体的构建及其细胞内定位研究

目的:构建小鼠髓样相关蛋白14(MRP14)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到MRP14编码序列。然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果。结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)、酶切和测序鉴定证明构建正确。转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中。结论:成功构建带HA标签的MRP14真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究MRP14作用细胞的信号通路提供了一个重要工具。     

FISH检测TOPⅡ在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 利用荧光原位杂交技术检测拓扑异构酶（topoisomerase Ⅱ,TOPⅡ）在乳腺癌组织中的表达情况及相关临床意义.方法 采用荧光原位杂交技术和免疫组织化学方法,对临床资料完整的264例浸润性乳腺癌标本分别进行TOPⅡ基因及TOPⅡ蛋白检测.结果 264例浸润性乳腺癌标本中,TOPⅡ基因表达的阳性率为34％ （91/264）,且与乳腺癌临床分期、HER-2蛋白表达密切相关（P＜0.05）,而与患者年龄、淋巴结转移、肿瘤大小及ER、PR、TOPⅡ蛋白表达（P＞0.05）无关.结论 拓扑异构酶Ⅱ可能与乳腺癌的发生发展密切相关,在乳腺癌的治疗和预后中可能起重要作用.     

磁共振DWI动态监测新型血管阻断剂对兔VX2种植性肝癌的疗效

目的 评价DWI动态监测新型血管阻断剂M410治疗兔VX2种植性肝癌的效果。方法 建立28只兔VX2种植性肝癌模型,随机等分为2组,分别静脉注射M410（实验组）和生理盐水（对照组）。两组于给药前、给药后4 h、1天、4天、7天、14天分别行MR平扫及DWI检查,并于各时间点取肿瘤组织行HE染色和CD34免疫组化检查,观察肿瘤体积、肿瘤整体及实质平均ADC值及病理变化。结果 实验组肿瘤体积较对照组增长缓慢,给药后4~14天各时间点两组肿瘤体积差异均有统计学意义（P均<0.05）。肿瘤整体及实质平均ADC值：给药后1天实验组低于对照组,4天实验组高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。ADC值改变与肿瘤组织病理学结果相符。结论 DWI可动态反映新型血管阻断剂M410治疗兔VX2种植性肝癌后肿瘤分子水平的变化,通过测量肿瘤ADC值可早期监测M410的疗效。     

乳腺癌VEGF-C的表达与淋巴结转移及预后的关系

目的对乳腺癌中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达与淋巴结转移及预后的关系展开研究分析。方法随机选取我院接收救治的50例乳腺癌患者,采用免疫组化法检测50例患者乳腺癌中VEGF-C的表达情况,研究乳腺癌VEGF-C的表达与淋巴结转移及预后的关系。结果 50例乳腺癌患者中,淋巴结节转移组,VEGF-C阳性23例,阳性率92.0%;未见淋巴结节转移组,VEGF-C阳性10例,阳性率40.0%;淋巴结节转移组VEGF-C阳性表达率高于未见淋巴结节转移组;不同年龄、肿瘤直径以及病理分型的乳腺癌,VEGF-C阳性表达率差异无统计学意义(P均>0.05);不同临床分期乳腺癌中,I~II期乳腺癌VEGF-C阳性表达率(58.1%)低于III~IV期VEGF-C阳性表达率(84.2%),数据差异有统计学意义(P<0.05)。结论早期检测乳腺癌中VEGF-C表达情况,能够为临床早期判定乳腺癌是否转移提供一项可测参考指标,对临床治疗、预后评估可起到一定参考价值。     

胎盘部位滋养细胞肿瘤的临床病理诊断及一例误诊误治分析

随着我国生育政策的推进,医疗卫生部门及各级医院对于孕产妇及胎儿健康的关注程度随之加强。当前,婚检、唐氏筛查、大排畸等各种孕检、产检虽已基本普及,但仍有部分较为少见的围生期疾病初期症状不明显,且无较多临床影像学资料参考,导致误诊、漏诊,延误病情,如胎盘部位滋养细胞肿瘤（PSTT）。该疾病鲜少有文献资料研究,且临床表现无特殊性,为增进妇产科、肿瘤科临床相关医学从业者对此疾病的认知,提高诊治效率、准确度,本文报告了1例误诊、误治PSTT患者情况,分析讨论了PSTT的发病机制、临床特点、影像学表现、实验室检查和病理诊断标准、鉴别诊断要点、治疗和预后以及误诊原因,以期增加临床医生对该病的了解,提高警惕,防止误诊、误疗。     

动态增强MRI定量监测血管阻断剂治疗兔VX2种植性肝癌的效果

目的 评价采用动态增强MRI(DCE-MRI)定量监测血管阻断剂治疗兔VX2种植性肝癌的效果。方法 成功建立28只兔VX2种植性肝癌模型,以数字法随机等分为2组,分别给予血管阻断剂M410(治疗组)和生理盐水(对照组)。给药前(基线时间点baseline)、给药后4 h、1天、4天、7天、14天分别行MR平扫及DCE-MRI,并于每个时间点取肿瘤组织行病理检查(HE及CD34免疫组化染色),观察两组肿瘤体积、对比剂容积转移常量(K^trans)、各时间点肿瘤K^trans变化率(ΔK^trans)及病理结果的变化。结果 治疗组肿瘤较对照组生长缓慢,给药后第4天、7天、14天,两组肿瘤体积差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组K^trans值于给药4 h后降低,至4天达最低,随后逐渐恢复,于14天时接近处理前水平。给药后4 h、1天、4天治疗组的K^trans值较对照组明显降低(P<0.05),余各时间点K^trans值两组差异均无统计学意义(P>0.05)。两组各时间点ΔK^trans%变化趋势与K^trans值变化趋势相同。DCE-MRI血管功能参数值改变与肿瘤组织HE及CD 34染色结果相符。结论 DCE-MRI可动态定量评价血管阻断剂治疗兔VX2种植性肝癌后肿瘤组织的变化,是肿瘤血管靶向治疗后监测和评价疗效的理想的影像学手段。     

脂多糖对S100A8和S100A9在Hepa 1-6细胞内定位的影响

目的观察S100钙结合蛋白A8（S100A8）和S100钙结合蛋白A9（S100A9）在细胞内定位及脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激对其细胞内定位的影响。方法将带有血凝素（HA）标签的S100A8或S100A9真核表达载体瞬时转染至小鼠Hepa1-6肝癌细胞,通过细胞免疫荧光方法观察S100A8、S100A9的胞内表达、定位及LPS对其定位的影响。结果静息状态下,S100A8、S100A9在细胞浆和细胞核都有分布;LPS刺激细胞2h后,S100A8移位入核,而S100A9在细胞内分布无明显变化。结论LPS刺激后S100A8、S100A9在细胞内的差异分布,提示两者在炎症反应中的作用不同,S100A8可能参与LPS诱导的基因表达调控。     

CD30在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达

目的探讨CD30在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)中的表达及其意义。方法免疫组织化学检测CD30在30例NKTCL中的表达,同时分析CD30的表达与NKTCL临床病例特征之间的关系。结果 NKTCL CD30的表达率为30.0%(9/30);患者5年总体生存率与CD30的表达有显著关系(P=0.032);CD30表达与患者的肿瘤分级有关(P=0.035);Cox回归分析显示,CD30在统计学上可以作为独立预后指标(P=0.003)。结论 CD30的表达与NKTCL患者5年总体生存率有关,而且也许可以作为一个独立的预后指标。     

髓样相关蛋白8真核表达载体的构建及其细胞内定位

目的:构建小鼠髓样相关蛋白8(MRP8)的真核表达栽体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况.方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应扩增得到MRP8编码序列,并将其克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后将重组质粒瞬时转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察结果.结果:重组质粒经聚合酶链反应、酶切和测序鉴定证明构建正确,并且该质粒能够在NIH3T3细胞的胞浆、胞核中广泛表达,表达产物主要定位在细胞核中.结论:成功构建带有HA标签的MRP8真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究MRP8作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具.     

脂多糖对S100A8和S100A9在Hepa 1-6细胞内定位的影响

目的观察S100钙结合蛋白A8（S100A8）和S100钙结合蛋白A9（S100A9）在细胞内定位及脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激对其细胞内定位的影响。方法将带有血凝素（HA）标签的S100A8或S100A9真核表达载体瞬时转染至小鼠Hepa1-6肝癌细胞,通过细胞免疫荧光方法观察S100A8、S100A9的胞内表达、定位及LPS对其定位的影响。结果静息状态下,S100A8、S100A9在细胞浆和细胞核都有分布;LPS刺激细胞2h后,S100A8移位入核,而S100A9在细胞内分布无明显变化。结论LPS刺激后S100A8、S100A9在细胞内的差异分布,提示两者在炎症反应中的作用不同,S100A8可能参与LPS诱导的基因表达调控。