HO-1修饰的大鼠骨髓间充质干细胞在体外对淋巴细胞的影响北大核心CSCD

目的：探讨血红素加氧酶1（HO-1）修饰的大鼠骨髓间充质干细胞（BM MSCs）在体外对淋巴细胞的免疫调节作用。方法体外分离培养和鉴定BM MSCs ,用载有HO-1基因的重组腺病毒载体进行感染,形成HO-1/BM MSCs,与大鼠脾淋巴细胞共培养。 MTT法检测淋巴细胞的增殖活性,碘化丙啶染色流式细胞术分析细胞周期的分布情况,ELISA法检测细胞因子含量,流式细胞仪分析T淋巴细胞CD25、CD71的表达。结果 HO-1/BM MSCs参与共培养的淋巴细胞的增殖活性和细胞周期进程均被抑制、促炎因子（ IL-2、TNF-α和IFN-γ）的分泌量降低、抗炎因子（ IL-10）的分泌量升高、T淋巴细胞CD25和CD71的表达降低,与BM MSCs组相比差异有统计学意义。结论 HO-1/BM MSCs较BM MSCs能够更好地发挥对淋巴细胞的免疫调节作用。     

骨髓间充质干细胞在体外肠上皮环境下免疫调节的作用机制

目的观察异基因骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外肠上皮细胞环境中产生免疫调节的机制。方法挑选培养状态良好的结肠癌细胞系CaCo-2,提取Wistar大鼠骨髓MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分4组,实验组为脾淋巴细胞、骨髓MSCs、CaCo-2共培养+刀豆蛋白A(ConA),对照组为脾淋巴细胞、CaCo-2共培养+ConA,增殖组为脾淋巴细胞+ConA,空白组为单纯脾淋巴细胞。分别于培养0、24、48 h后,MTT检测T细胞活性,ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β(TGF-β)水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率。结果在单层肠上皮共培养环境下,与对照组比较,实验组T细胞活性显著降低(P<0.05),TNF-α也有显著降低(P<0.05),IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);Foxp3+调节性T细胞表达率升高;T细胞活性随着时间延长有逐渐降低趋势(P<0.05)。结论在体外单层肠上皮细胞环境中,骨髓MSCs可以通过直接抑制T细胞活化产生TNF-α抑制免疫应答,并可间接通过自分泌及诱导调节性T细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受。     

骨髓间充质干细胞体外诱导免疫调节机制的探讨

目的:观察骨髓间充质干细胞(BM MSCs)对体外活化T细胞的免疫调节作用。方法:提取Wistar大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分3组,3个时间点:分别为0、24、48 h脾淋巴细胞/BM MSCs+刀豆蛋白A(ConA)(实验组),脾淋巴细胞+ConA(对照组),单纯淋巴细胞组(空白组)。MTT检测T淋巴细胞活性,ELISA检测细胞因子TNF-α、IL-10及TGF-β水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率。结果:(1)与对照组相比,实验组24、48 h在2个时间点T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05);(2)与对照组相比,实验组TNF-α在2个时间点有显著降低(P<0.05),实验组IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);(3)实验组Foxp3+T调节细胞表达率高于对照组;(4)随着时间延长,空白组及对照组T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05),实验组T淋巴细胞活性随时间延长差异无统计学意义。结论:BM MSCs可以抑制T淋巴细胞活化,并通过减少炎症因子TNF-α的释放抑制免疫应答。另外,BM MSCs可通过自分泌及诱导T调节细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受。     

表达microRNA-203 tough decoy的慢病毒载体构建及应用

【摘要】目的 建立表达microRNA（miRNA）tough decoy（TuD）的慢病毒载体构建方法,并检测其对细胞内 miRNA表达水平及细胞表型的影响。方法 在慢病毒表达质粒pSIH1-H1-copGFP中通过两步克隆,首先构建 miRNA TuD通用骨架质粒,进一步构建特异性针对大鼠miR-203的TuD表达载体。在293T细胞中包装成慢病毒后,感染大鼠骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）,同时用pSIH1-H1-copGFP空质粒包装慢病毒,感染BM-MSCs作为对照。定量RT-PCR检测细胞中miR-203的水平变化,并用CCK-8法和Annexin V-PI双标记法分别检测BMMSCs 的活性和凋亡。结果 成功构建了基于pSIH1-H1-copGFP质粒的miR-203 TuD表达载体,并对其序列进行了验证。用表达miR-203 TuD的重组慢病毒感染BM-MSCs后第3、6、9天检测细胞内源性miR-203表达水平降低,同时细胞活性增高,凋亡比例降低,与对照组相比差异有统计学意义。结论 两步克隆法构建miRNA TuD表达载体是一种简便高效的方法,其表达产物能够有效抑制细胞内源性miRNA水平,同时影响细胞表型。     

天津市HIV阳性MSM生活状况及社会支持情况定性访谈分析

目的了解男男性行为者(MSM)感染HIV后生活状况变化及社会支持获得情况,为进一步制定更有效和针对性的社会支持策略提拱依据。方法通过天津市疾病预防控制中心与社会组织自主招募HIV阳性MSM,采用半结构化访谈提纲对其进行个人深入访谈,收集资料并进行总结分析。结果共招募26名HIV阳性MSM,年龄中位数为30岁,受访者自述感染HIV后存在恐艾心理、自杀倾向、压抑情绪、结婚生子压力、社交范围减小及更换工作现象的分别占46.3%、7.7%、34.6%、38.5%、26.9%和15.4%。获得家庭支持、朋友支持、病友支持、工作单位支持、社会组织支持及医疗机构支持的比例分别为53.8%、38.5%、46.2%、7.7%、34.6%和3.8%。受访者获得1种社会支持及2种以上社会支持的分别占38.5%和50.0%。结论HIV感染对MSM生活影响广泛,社会支持可减轻其生活负担及心理压力,但天津市HIV阳性MSM人群整体社会支持利用度不充分,需加强工作单位及医疗机构的支持,为其建立一个全面系统的社会支持体系。     

中西医结合治疗37例缺铁性贫血伴Hp阳性患者临床观察

目的：观察中西医结合治疗缺铁性贫血（IDA）伴幽门螺杆菌（Hp）阳性患者的疗效。方法：将37例IDA伴Hp阳性患者随机分为治疗组21例和对照组16例。对照纽给予常规西药治疗,治疗组给予香砂六君子汤加味、右旋糖酐铁片治疗。治疗前后分别检测患者血红蛋白（Hb）、血清铁（SI）、血清铁蛋白（SF）、总铁结合力（TIBC）及尿素酶依赖性试验（16C呼气试验）。结果：治疗组患者经中西医结合治疗后均得到治愈,Hp均转阴,治疗时间短;对照组患者未能全部治愈,Hp未能完全转阴,治疗时间长。2组Hb、SI、SF、TIBC治疗前后比较,差异均有显著性意义（P〈0．05）;2组治疗后各项指标比较,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：中西医结合治疗IDA伴Hp阳性患者疗效确切,效果优于单纯西药治疗。     

小肠移植与肠道微生态变化

随着全胃肠外营养(TPN)的应用,肠衰竭患者的生命得以继续维持.但持续的TPN会导致严重的并发症如中心静脉通道感染、静脉通道血栓形成、TPN相关性终末期肝病等[1].目前对于小肠功能衰竭合并TPN并发症的患者,小肠移植已成为公认的唯一能够挽救生命的治疗手段.但小肠移植术后高发的感染限制了其在临床的广泛应用,目前感染仍是移植失败和患者死亡的主要原因[2].小肠移植术后并发感染远高于其他器官移植,这是由于肠道与外界相通,肠腔内又含有大量微生物所致.现在普遍认为小肠移植术后肠道微生态变化与感染的发生密切相关,下面对小肠移植术后肠道微生态变化做一综述.     

我国爱婴医院行动的回顾与展望

我国自1992年加入国际爱婴医院行动,已走过30年,经历了早期探索、早期创建、全面创建及复核创新阶段,拥有爱婴医院7000多所.爱婴医院创建行动对我国妇幼卫生工作起到积极推动作用,促进了保健与临床工作的结合,推动了妇幼卫生资源的合理利用,通过提升卫生保健服务质量保障我国妇女和儿童健康.随着时代发展与人民生活水平的提高,...