EV71-CA16肠道病毒荧光定量RT-PCR诊断试剂盒的研制

目的研制一种能同时检测EV71,CA16肠道病毒的二联实时荧光定量PCR检测试剂盒,主要用于EV71,CA16肠道病毒的快速检测和流行病学监测。方法设计特异度的EV71型、CA16型基因的引物和探针,优化实时荧光定量PCR检测体系,并研究产品的灵敏度、精密度、稳定性和检测线性范围;同时对2014年5月份收集的26份样品进行检测。结果试验得到了阳性重组质粒,线性范围在5*102 copies/μl～105 copies/μl,该范围内检测结果良好;优化后肠道病毒CA16上下游引物和探针浓度分别为0.48,0.24μmol/L,EV71上下游引物和探针浓度分别为0．40,0.20 μmol/L。敏感度达到500 copies/μl,重复性变异系数CV≤5％;该荧光定量PCR检测试剂盒稳定性强,在-20℃下可以保存一年,对EV71,CA16肠道病毒具有良好的特异度。用该方法检测20份临床阳性样品和6份阴性样品,阳性检出率为100％(20/20),阴性检出率为100％(6/6)。结论试验建立的EV71,CA16肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于EV71,CA16肠道病毒的临床诊断。     

职业健康监护中四氯乙烯呼出气GC-ECD监测方法的研究

用玻璃采气管采集四氯乙烯职业接触人员班前终末呼出气,直接进样,经毛细管色谱柱分离,GC-ECD检测呼出气中四氯乙烯浓度。结果显示,GC-ECD测定呼出气中四氯乙烯最低检出浓度为3.0×10-2mg/m3,其测定范围3.0×10-2~40.8 mg/m3(直接进样),线性关系良好r=0.9998。本方法能够满足美国ACGIH制定的生物接触指数(BEIs)的检测要求;采用直接进样,不需富集,对我国扩展该化学毒物的职业健康监护具有一定意义。     

禽流感病毒H7N9型 实时荧光定量RT-PCR检测方法的研究

目的 建立一种快速准确诊断禽流感病毒H7N9型的实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法 参照国家生物技术信息中心(NCBI)公布的H7N9基因HA序列,设计特异性引物及TaqMan探针; 构建阳性重组质粒,验证其最低检测拷贝数、重复性及特异度。结果 试验构建的阳性重组质粒,线性关系在6×10² copies/μl～6×10⁸ copies/μl范围内检测结果良好; 用该方法测得最低拷贝数为600 copies/μl,特异度和重复性(CV<1%)良好,无交叉反应; 用该荧光定量RT-PCR检测方法检测8份阳性样品和8份阴性样品,准确率为100%(16/16)。结论 实验建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于禽流感病毒H7N9型的快速检测。     

针刀配合膏药贴敷治疗膝骨关节炎的临床观察

目的:观察针刀配合膏药贴敷治疗膝骨关节炎(KOA)的临床疗效.方法:将符合纳入标准的60例KOA患者按照随机数字表随机分为两组,针刀组30例采用针刀配合通络骨质宁膏治疗,针灸组30例采用针灸配合通络骨质宁膏治疗.比较两组患者治疗前后VAS评分,Lylsholm和WOMAC膝关节评分的变化情况.结果:治疗3周后,VAS评...     

利用纳米颗粒偶联双特异性抗体提高其功能及稳定性的研究

目的用PLGA纳米颗粒提高CD16-MUC1双特异性抗体的抗肿瘤功能及稳定性。方法利用原核生物表达的方法制备CD16-MUC1双特异性抗体,并利用可降解材料PLGA纳米颗粒偶联,然后利用NK细胞对癌细胞的杀伤实验来检测其功能。结果成功表达具有生物学活性的CD16-MUC1双特异性抗体,并经PLGA纳米颗粒偶联得到稳定性和功能均更优的双特异性抗体。结论经纳米颗粒偶联后的CD16-MUC1可提高其抗肿瘤功能及稳定性。