血培养瓶增菌法快速鉴定和快速药物敏感性试验可行性分析

目的探讨用血培养瓶增菌法培养脑脊液样本,将报阳样本直接离心富集细菌后,采用激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行快速鉴定和快速药物敏感性试验的可行性。方法收集2018年12月—2019年7月华山医院脑脊液样本1 446例,随机抽取345例采用血培养瓶增菌法培养,1 101例采用常规浓缩集菌培养法培养,比较2组样本阳性率。分别采用快速法(BD凝胶分离血清管富集细菌)和常规法(转种过夜孵育获取纯细菌)对血培养瓶增菌法阳性样本进行质谱鉴定和体外药物敏感性试验,分析菌种鉴定符合率和体外药物敏感性试验结果一致率。结果与常规浓缩集菌培养比较,血培养瓶增菌后样本阳性率明显增高(χ²=60.889,P=0.000)。48例血培养瓶增菌法阳性样本中,快速法与常规法菌种鉴定符合率为89.80%,2种鉴定方法差异无统计学意义(χ²=0.116,P=0.990)。快速法与常规法体外药物敏感性试验结果比较,革兰阴性菌除微量肉汤稀释法的替加环素外,其他方法和抗菌药物的一致率均为100%;革兰阳性菌除纸片扩散法的红霉素、微量肉汤稀释法的红霉素和庆大霉素、仪器法的克林霉素和庆大霉素一致率略差外,其他抗菌药物一致率均为100%。隐球菌快速药物敏感性分类一致率及标准一致率为100%。以纯细菌微量肉汤稀释法为标准,快速微量肉汤稀释法和快速仪器法的标准一致率分别为98.56%和97.83%。结论用血培养瓶增菌法进行脑脊液培养,可在不延长报阳时间的情况下提高脑脊液样本培养阳性率和难培养菌的检出率,采用BD凝胶离心直接取菌的快速鉴定和药物敏感性试验方法快速、准确,可大大缩短临床报告时间,及时为临床用药提供实验室依据。     

抗原血清学识别重组表达克隆技术的优化

背景:抗原血清学识别重组表达克隆技术的应用有许多报道,但存在假阳性较高、稳定性欠佳等诸多问题。目的:优化抗原血清学识别重组表达克隆技术,建立灵敏且稳定的技术体系。方法:利用抗原血清学识别重组表达克隆技术,比较血清的处理方法、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同的封闭条件及培养基厚度对显色结果的影响,观察噬菌斑显色深浅、背景处理及假阳性的产生。结果与结论:直接法预处理血清、异丙基-β-D硫代半乳糖苷浸泡硝酸纤维素膜并干燥结合脱脂奶粉进行封闭,显色效果最佳。此外选择适当的培养基厚度可有效消除边缘效应。提示血清预处理、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同封闭条件及培养基厚度等因素,在利用抗原血清学识别的重组表达克隆技术进行抗原筛选中起关键作用。     

前白蛋白、视黄醇结合蛋白水平与学龄前儿童营养状况的相关性研究

目的 探讨前白蛋白(prealbumin,PA)、视黄醇结合蛋白(retinol-binding protein,RBP)水平与学龄前儿童营养状况的相关性.方法 选取普洱市幼儿园188名3~6岁学龄前儿童为研究对象,以WHO/NCHS标准为参照,按照身高别体重的不同分为三组,即营养不良组、营养中下组及营养正常组,分别为40名、50名、98名.抽取三组清晨空腹静脉血,应用免疫透射比浊法测定PA、RBP水平并进行比较分析.结果 营养不良组体重、胸围、血清PA、RBP水平明显低于营养中下组及营养正常组,差异具有统计学意义(P<0.05);营养中下组体重、胸围、血清PA、RBP水平明显低于营养正常组,差异具有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关系数分析,血清PA、RBP水平均与营养不良呈负相关(P<0.05);在判断营养不良时,PA的灵敏度、特异性分别为79.02%、75.44%,RBP的灵敏度、特异性分别为100.00%、96.85%;不同性别儿童血清PA、RBP水平相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清PA、RBP水平与学龄前儿童营养状况具有一定相关性,对于营养状况的评估具有重要价值,临床应根据学龄前儿童的血清PA、RBP水平评估其营养状况进行适量营养补充.     

抗原血清学识别重组表达克隆技术的优化*

背景：抗原血清学识别重组表达克隆技术的应用有许多报道,但存在假阳性较高、稳定性欠佳等诸多问题。 目的：优化抗原血清学识别重组表达克隆技术,建立灵敏且稳定的技术体系。 方法：利用抗原血清学识别重组表达克隆技术,比较血清的处理方法、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同的封闭条件及培养基厚度对显色结果的影响,观察噬菌斑显色深浅、背景处理及假阳性的产生。 结果与结论：直接法预处理血清、异丙基-β-D硫代半乳糖苷浸泡硝酸纤维素膜并干燥结合脱脂奶粉进行封闭,显色效果最佳。此外选择适当的培养基厚度可有效消除边缘效应。提示血清预处理、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同封闭条件及培养基厚度等因素,在利用抗原血清学识别的重组表达克隆技术进行抗原筛选中起关键作用。关键词：抗原血清学识别的重组表达克隆技术;抗原;cDNA文库;噬菌体 缩略语注释：SEREX：serological identification of antigens by recombinant expression cloning,抗原血清学识别重组表达克隆技术 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.18.025     

抗CCP抗体、抗MCV抗体和类风湿因子在早期类风湿关节炎中的诊断价值

目的探讨抗CCP抗体、抗MCV抗体和类风湿因子在早期类风湿关节炎中的诊断价值。方法选择于2016年1月至2017年1月期间在我院就诊的早期类风湿关节炎(RA)患者及其他骨关节病患者各40例,并选择40名同期在我院体检的健康人作为研究对象。其中风湿关节炎患者设为RA组,其他骨关节病患者为疾病对照组,健康人为正常对照组。采用免疫透射比浊法、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫散射比浊法分别测定三组的抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体及IgM型类风湿因子(IgM-RF)水平,比较抗CCP抗体、抗MCV抗体、IgM-RF单独检测及三个指标联合检测对早期类风湿性关节炎的诊断价值。结果①RA组的抗CCP抗体、抗MCV抗体、IgM-RF水平均明显高于疾病对照组与正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);疾病对照组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。②RA组的抗CCP抗体、抗MCV抗体、IgM-RF及联合检测的阳性率均明显高于疾病对照组与正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);疾病对照组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。③联合检测的灵敏度及阴性预测值均明显高于抗CCP抗体、抗MCV抗体、IgM-RF单独检测,差异具有统计学意义;抗CCP抗体与抗MCV抗体的特异性及阳性预测值均明显高于IgM-RF及联合检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论早期RA患者的血清中存在抗CCP抗体、抗MCV抗体、IgM-RF的高表达,且其灵敏度及特异性均较高,临床上可联合检测抗CCP抗体、抗MCV抗体及IgM-RF,以提高RA的早期诊断率。     

广西北部湾近江牡蛎降糖作用的研究

目的 研究广西北部湾近江牡蛎(Crassostrea rivularis)降血糖作用.方法 采用牛胰蛋白酶酶解方法制备牡蛎活性肽,经超滤分离,得到分子量小于5 000 Da的牡蛎活性肽,采用氨基酸分析仪测定氨基酸组成,用苯酚-硫酸法测定糖原含量;用四氧嘧啶制作小鼠糖尿病模型,共设6个组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物组及牡蛎酶解活性肽高、中、低剂量实验组,实验周期为14 d,实验结束时,各组小鼠经眼球取血后处死,取出肝脏和肾脏称重并计算脏器指数,采用酶法、分光光度法测定小鼠血糖(FBG).结果 牡蛎酶解活性肽氨基酸总量为44.30%,糖原26.12%;低﹑中、高剂量组小鼠的血糖水平均显著低于糖尿病模型对照组(P<0.01).结论 牡蛎酶解活性肽营养丰富,具有良好的降糖效果.     

2018—2020年某院铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的 分析某医院临床分离铜绿假单胞菌的分布情况及对常用抗菌药物的耐药特征,为院感防控提供依据,并为临床合理使用抗菌药物提供参考.方法 回顾分析2018—2020年普洱市人民医院分离的铜绿假单胞菌菌株,按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准,采用微生物分析仪对细菌进行菌种鉴定和药敏试验;采用WHONET 5.6软件...