肾上腺素对小鼠巨噬细胞中促炎／抗炎介质比值的影响

目的：研究肾上腺素对脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7中促炎介质［肿瘤坏死因子（TNF-α）、一氧化氮（NO）、环加氧酶-2（COX-2）］和抗炎介质［血红素氧化酶-1（HO-1）、白介素10（IL-10）］表达及NF-κB活化的影响。 方法： 以10 μg/L的LPS刺激体外培养的RAW264.7细胞作为炎症模型，加入不同浓度的肾上腺素（1、5、10、50 μmol/L）孵育24 h后，收集培养上清并提取细胞总蛋白，酶联免疫法测定上清中TNF-α、IL-10浓度，Griess法检测上清NO含量(以NO2-/NO3-表示)，免疫印迹法检测细胞总蛋白中COX-2、HO-1、IκB-α的含量。 结果： 10 μg/L的LPS明显诱导TNF-α、NO(NO2-/NO3-)、COX-2、IL-10及HO-1的产生；LPS+肾上腺素组与LPS单独作用组相比促炎介质TNF-α、NO(NO2-/NO3-)、COX-2的表达量显著下降，而抗炎介质IL-10、HO-1的表达却明显增强；肾上腺素与LPS共同作用组中IκB-α的含量与单独LPS作用组相比无明显差异。 结论： 肾上腺素下调LPS诱导的巨噬细胞中促炎介质的表达同时促进抗炎介质的表达，这种效应并不通过影响NF-κB的活化来实现。     

积雪草苷对脂多糖诱导急性肺损伤的白细胞介素-10和血红素氧合酶-1影响研究

目的观察积雪草苷对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）白细胞介素-10（IL-10）、血红素氧合酶（HO-1）影响。方法40只Balb／c小鼠随机分为空白组，模型组，积雪草苷5，15，45mg·kg。5组，每组8只。脂多糖（2．5mg·kg^-1）气管滴注造急性肺损伤模型，24h后处死小鼠，免疫印迹法检测肺组织HO—1蛋白表达，ELISA法检测血浆IL-10表达。结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性增加脂多糖所致急性肺损伤模型肺组织HO-1蛋白和IL-10表达。结论积雪草苷对LPS诱导急性肺损伤保护效应可能与促进HO-1表达和IL-10含量有关。     

羟基积雪草苷与积雪草苷对LPS诱导大鼠发热模型的影响

目的观察积雪草苷和羟基积雪草苷的解热作用,并比较两者在解热作用上的差异。方法将80只SD大鼠随机分为空白组、模型组(LPS 100μg/kg)、溶酶对照组(羧甲基纤维素钠)、积雪草苷5,15,45 mg/kg、羟基积雪草苷10,20,40mg/kg、对乙酰氨基酚50 mg/kg组。腹腔注射LPS(100μg/kg)建立SD大鼠发热模型,绘制各组平均体温变化曲线,比较测量体温与基础体温差值ΔT。结果羟基积雪草苷(10,20,40 mg/kg)与积雪草苷(5,15,45 mg/kg)对LPS诱导的SD大鼠发热模型体温有显著的降温作用(P<0.05)。结论羟基积雪草苷和积雪草苷对LPS诱导的SD大鼠发热模型的体温均有降温作用,积雪草苷在某些时间点(如LPS注射5 h后)降温效应优于羟基积雪草苷。     

Dual Effect of 3, 4- Dihydroxyacetophenone on LPS-induced Apoptosis in RAW264.7 Cells by Modulating the Production of TNF-α

3, 4 dihydroxyacetophenone ( DHAP) is anactive component isolated from leaves of Tuma odongqing ( Ilex Pubescens Hook. Et Arn. Varglaber Chang), a Chinese traditional herb. It is in itially used to promote blood circulation and re move blood stasis[1, 2]. Previous experimental andclinical data proved that it could regulate the bal ance between TXA2 and PGI2, cause vesodilationand inhibit platelet aggregation[3]. It has showed agood curative effect in the…     

川芎嗪对脂多糖诱导巨噬细胞环氧化酶-2表达和心肌细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪对脂多糖(LPS)诱导RAW264．7小鼠巨噬细胞环氧化酶-2(COX-2)基因表达和活性的影响,进一步研究川芎嗪对脂多糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法采用RT—PCR和免疫印迹检测巨噬细胞COX-2基因表达,酶联免疫分析其活性,并应用荧光显微镜技术对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测,荧光分光光度计测定细胞内钙离子浓度。结果10～mol／L,10^-5mol／L和10^-4mol／L川芎嗪可显著减少LPS刺激的巨噬细胞COX-2 mRNA和蛋白的表达(P<0．05,P<0．01),但不同浓度川芎嗪对COX-2活性无明显作用;10^-5mol／L川芎嗪可显著降低心肌细胞内钙浓度,拮抗LPS诱导的乳鼠心肌细胞凋亡(P<0．05)。结论川芎嗪具有抑制LPS诱导巨噬细胞COX-2表达和乳鼠心肌细胞凋亡的药理学效应。     

黄连现代中医临证研究

黄连在现代中医临证中广泛应用于消化系统、呼吸系统、心脑血管、肿瘤以及妇科、儿科、五官、皮肤等疾病中,执繁就简,把黄连现代中医临证应用分为清上、清中以及清下3种,同时,对于黄连现代研究将基础医学、基础药理学的研究进展同临床紧紧结合起来,用生物信息学、分子生物学、免疫学和蛋白组学的研究技术,从整体、细胞和分子水平来探讨,找到更为准确的黄连及其系列方剂的作用靶点,从而使黄连中医临证研究形成一个开放性包容中西医现代中药研究新的体系。     

人宫颈癌组织环加氧酶2mRNA剪接异构体的表达

背景：宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展与环加氧酶2密切相关.目的：探讨人宫颈癌组织中是否存在环加氧酶2选择性剪接异构体的表达及其可能意义.设计：非随机对照实验.单位：重庆医科大学生物化学与分子药理学重点实验室,重庆医科大学附属第一医院妇产科.对象：选择13例重庆医科大学附属第一医院妇产科2002-03/2002-04宫颈癌住院患者的癌组织及正常组织.方法：设计一对全新引物,并采用反转录聚合酶链反应技术,从宫颈癌组织中分离环加氧酶2 mRNA,然后对电泳条带进行克隆、测序和分析.主要观察指标：①观察癌组织与正常组织反转录聚合酶链反应琼脂糖电泳结果.②分析癌组织与正常组织电泳条带测序结果.结果：①正常宫颈组织未发现环加氧酶2目的条带（252 bp）,而宫颈癌组织则出现两条条带,除环加氧酶2目的条带外,还有一新的电泳带（534 bp）,经克隆和测序证实,该新条带除目的条带的环加氧酶2 DNA的第7、8外显子序列外,还包含第7、8外显子间的内含子序列,即保留的内含子（282 bp）.②根据阅读框推测,在保留的内含子第48～50碱基出现终止密码.结论：发现宫颈癌组织中存在环加氧酶2基因的选择性剪接异构体（Genbank accession number：BU493602）,其所编码蛋白可能较已报道的环加氧酶2酶蛋白小.     

积雪草苷对Aβ25～35诱导PC12细胞凋亡的影响

目的:探讨积雪草苷对Aβ25～35诱导PC12细胞凋亡的影响。方法:Aβ25～35 20μmol.L-1刺激PC12细胞,同时分别给予积雪草苷160,80,40,20μg.mL-1,CCK-8法检测细胞活力,Annexin-V/FITC双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态,Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果:与模型组比较,积雪草苷剂量依赖性地提高Aβ25～35诱导的PC12细胞存活率,增加Bcl-2的表达,降低PC12细胞的凋亡率,差异有统计学显著性(P<0.05)。结论:积雪草苷对Aβ25～35诱导的PC12细胞凋亡有保护效应,可能与增加Bcl-2表达有关。     

蛋白激酶Cα介导人神经胶质瘤细胞株多药耐药机制的研究

目的 探讨蛋白激酶Ca(protein kinase Cα,PKCα)在人神经胶质瘤细胞株SHG-44发生多药耐药过程中的作用和机制.方法 应用阿霉素浓度递增和间歇诱导法建立SHG-44/ADM耐药株,采用PKCα激活剂PMA和抑制剂Staurosporine分别干预SHG-44/WT和SHG-44/ADM细胞株,免疫印迹法检测PKCα和MDR-1的表达量,激酶分析PKCα活性,荧光分光光度计检测细胞内阿霉素浓度.结果 PKCα激活剂PMA增强细胞PKCα活性,同时增加MDR-1表达和活性;PKCα抑制剂Staurosporine抑制细胞PKCα活性,减少MDR-1表达和活性.结论 PKCα通过MDR-1参与神经胶质瘤细胞的多药耐药.     

PKCα/COX-2介导人神经胶质瘤细胞中MDR-1活性的实验研究

恶性胶质瘤除手术、基因治疗[1]外化疗是治疗环节中至关重要的一环,而多药耐药是胶质瘤化疗失败的重要原因[2-3]研究表明,蛋白激酶C(PKC)和环加氧酶-2(COX-2)均参与了肿瘤的发生、发展过程,并且可以相互影响[4],而MDR-1是目前公认的与肿瘤耐药密切相关的因素之一[5],本实验拟从细胞分子和信号水平探讨神经胶质瘤多药耐药的机制.