体外培养中IFN-γ、L-Arg 及L-NNA对NO合成的影响及NO抗旋毛虫的作用

目的　探讨体外培养中IFN γ、L Arg及L NNA对NO合成的影响及NO抗旋毛虫的作用。 方法　分离、纯化长爪沙鼠腹腔巨噬细胞 ,置RPMI16 4 0培养液中培养。设IFN γ组、L Arg组、L NNA组和对照组 ,每个实验组又分 5个不同的浓度组。分别向含有巨噬细胞的培养瓶中加入不同浓度的IFN γ、L Arg及L NNA进行体外培养。培养 2 4h后 ,用硝酸还原酶法分别测定培养液中的NO含量。将旋毛虫幼虫分别加入上述培养体系中进行体外培养 ,观察旋毛虫幼虫的活动及损伤。结果　①体外培养中 ,激活的巨噬细胞能产生NO ,IFN γ和L Arg能促进NO的合成 ,L NNA则能抑制NO的合成 ,这种促进或抑制NO合成的作用均具有剂量依赖性 ,剂量越高作用越明显。②加入旋毛虫幼虫后 ,在IFN γ和L Arg培养体系中 ,随着NO浓度的升高及作用时间的延长 ,对虫体的抑制及杀伤作用越来越明显 ,导致其活动度减弱 ,虫体破裂 ,最终死亡 ;在L NNA培养体系中 ,L NNA浓度越高 ,对虫体的影响越小。结论　①体外培养中 ,通过激活的巨噬细胞 ,IFN γ和L Arg能促进NO的合成 ,给予L NNA则能抑制NO的合成。②NO对旋毛虫幼虫有抑制及杀伤作用     

家蝇幼虫抗菌蛋白的抗菌特性及其组成

目的观察不同诱导源诱导家蝇幼虫产生抗菌蛋白的抗菌特性及其蛋白组分.方法取5种诱导源诱导后提取抗菌蛋白,用不同细菌进行抑菌实验,观察5种诱导源诱导组抗菌蛋白的抗菌特性;5种诱导源诱导组抗菌蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察抗菌蛋白的组分变化.结果各诱导组产生的抗菌蛋白均能抗多种G＋菌、G-菌和耐药菌株,但对不同细菌的抗菌活性有所差别.各诱导组抗菌蛋白中有2条电泳带与对照组完全相同,但含量高于对照组;各诱导组与对照组比较均出现不同的新的蛋白带.结论家蝇幼虫诱导后产生的抗菌蛋白抗菌谱广;不同诱导源可诱导家蝇幼虫产生相同蛋白及不同的新蛋白.     

家蝇幼虫抗菌蛋白在体外诱导JEC凋亡的探讨

目的:探讨家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞(JEC)的抑制作用.方法:流式细胞仪测定家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC细胞周期及凋亡的影响;HE染色法观察细胞凋亡,并计算AI.结果:家蝇幼虫抗菌蛋白作用后的JEC AI/PI升高,家蝇幼虫抗菌蛋白高浓度组JEC PI及Apoptosis%明显升高;各浓度组JEC AI均明显高于对照组(P＜0.01).结论:家蝇幼虫抗菌蛋白可能通过诱导细胞凋亡来抑制JEC生长.     

家蝇胚胎细胞抗菌蛋白对人髓样白血病细胞K 562选择性杀伤作用的研究

目的：利用脂多糖刺激家蝇胚胎细胞产生并提取抗菌蛋白,对比研究家蝇胚胎细胞抗菌蛋白和高三尖杉酯碱（HHT）对人髓样白血病细胞K562和正常人体细胞的抑制杀伤作用。方法采用含20mg/L脂多糖的无血清M3培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞16h,提取上清液中的抗菌蛋白,将抗菌蛋白配制为40、80、160、320和640μg/mL5个浓度组,采用MTT法测定各浓度抗菌蛋白对K562和人脐静脉血管内皮细胞的抑制作用。将处于对数生长期的K562细胞和人脐静脉血管内皮细胞配制成相同浓度的HHT组、家蝇胚胎细胞抗菌蛋白组,两种细胞均采用自身设置对照组。采用流式细胞术测定K562细胞和人脐静脉血管内皮细胞3组药物的有效杀伤率。结果MTT法检测显示,5种浓度抗菌蛋白对K562细胞均具有明显抑制作用,各浓度抗菌蛋白对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用。对照组、HHT组及家蝇胚胎细胞抗菌蛋白组对K562细胞的有效杀伤率分别为（28．16±2．14）％、（81．41±1．95）％和（82．90±3．03）％;对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为（41．13±2．51）％、（82．20±2．57）％和（36．68±1．86）％。结论家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的白血病化疗药物相比,优点在于能有效杀伤白血病细胞又不损伤正常人体细胞。     

不同诱导源诱导家蝇幼虫抗菌蛋白效果的比较

目的比较5种诱导源所诱导产生家蝇幼虫抗菌蛋白的抗菌活性,观察不同诱导源对家蝇幼虫抗菌蛋白产生的诱导效果.方法用金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、大肠埃希菌脂多糖、紫外线及热诱导家蝇幼虫,在诱导后不同时间提取抗菌蛋白进行抑菌实验,观察不同诱导源诱导后抗菌蛋白产生的高峰时间,并比较各诱导组高峰时间产生抗菌蛋白的抗菌活性.结果各诱导组诱导家蝇幼虫产生抗菌蛋白达最大活性时间为诱导后36～48 h（热诱导后家蝇幼虫很快化蛹,未观察抗菌蛋白产生高峰时间）;金黄色葡萄球菌诱导后的抗菌蛋白抗菌活性最佳,热诱导后的抗菌蛋白抗菌活性也较未诱导组好.结论各诱导源诱导后抗菌蛋白产生的高峰时间不同;细菌诱导的抗菌蛋白抑菌效果最好,热诱导也是一种较理想的诱导方法.     

家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC和A375肿瘤细胞的抑制作用

目的 研究家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC和A375肿瘤细胞的抑制作用. 方法 在体外培养的JEC和A375肿瘤细胞中分别加入0.02%、0.1%、0.5%、2.5%和12.5%浓度的抗菌蛋白,用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡,计算细胞凋亡指数;HE及AO染色法观察凋亡细胞形态.对照组采用不含抗菌蛋白的等量培养基. 结果 JEC细胞的凋亡指数/增殖指数(AI/PI)随浓度的增加而递增,2.5%抗菌蛋白组和12.5%抗菌蛋白组PI及凋亡率明显升高, G0/G1期下降.对A375细胞,12.5%抗菌蛋白组的G2/M期、S期、G0/G1期、G2/M期、AI/PI及PI与对照组的差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论 家蝇幼虫抗菌蛋白可能通过诱导细胞凋亡来抑制JEC细胞生长;其对A375细胞的抑制可能是通过细胞周期阻滞以及诱导细胞凋亡而发挥作用.     

大肠埃希菌感染后家蝇幼虫血清中3种酶活性的变化

目的探讨大肠埃希菌感染对家蝇3龄幼虫血清中3种酶活性的影响。方法（1）用比色法分别测定感染后不同时间家蝇3龄幼虫血清中酸性磷酸酶（ACP）及过氧化氢酶（CAT）活性的变化。（2）用聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定感染后不同时间家蝇3龄幼虫血清中二酚氧化酶（DPO）活性的变化。结果（1）大肠埃希菌感染后各时间组血清中ACP及CAT活性显著高于对照组（P〈0．01）。其中ACP及CAT活性分别在感染8和16h达高峰，其值分别为（107．9±3．5）u／100ml和（174．6±4．7）u／ml，然后逐渐下降。（2）家蝇幼虫体内存在DPO，且感染后4hDPO活性上升，16h达高峰，其值为98805．39，之后下降。结论大肠埃希菌感染后家蝇3龄幼虫血清中ACP、CAT及DPO活性均增强，提示这3种酶在防御微生物感染过程中发挥了重要作用。     

人卵巢粘液性囊腺癌细胞系的系列研究Ⅱ—OMC685生物学特性的研究

目的对自行建立的一株人卵巢粘液性囊腺癌细胞系（OMC685）进行生物学特性的研究。方法测定细胞生长曲线、分裂指数、植物血凝素（PHA）试验、进行染色体分析、异种动物移植、组化染色、激素分析及污染检查。结果细胞生长旺盛，PHA凝集试验阳性，染色体为亚三倍体、有畸变，异种动物移植阳性，组化染色酸性粘液阳性，雌二醇及黄体酮检查阳性，无污染。结论OMC685与国外同类细胞系比较，差异很大，是一株独特的人卵巢癌细胞系。     

OMC685的几种病毒感染观察(研究简报)

病毒必须依赖敏感的活细胞才能复制.对细胞的种类,病毒常常有一定、甚至是十分严格的选择性.体外的病毒感染细胞试验,不但是研究病毒致病机理的重要途径,也是分离和鉴定病毒的常用的方法.肿瘤细胞系的建议,为研究病毒提供了非常有用的实验材料.我们用万启惠等建立的卵巢粘液性囊腺癌细胞系细胞OMC685[1],分别感染脊髓灰质炎病毒(来自中国医学科学院医学生物学研究所,昆明)、麻疹病毒、腺病毒(2种病毒均来源于上海市防疫站)、单纯疱疹病毒(来源于北京病毒研究所)、流感病毒(来源于北京流行病学微生物学研究所)和狂犬病毒外,都能观察到病毒在细胞内增殖的情况.     

人卵巢粘液性囊腺癌细胞系的系列研究：：Ⅰ—OMC细胞系的建立及形 …

建立一株人卵巢癌细胞系并进行形态观察。方法：用卵巢癌患者手术切除的组织块进行贴壁培养，胰酶消化，传代培养，液氮冷冻保存和复苏，光镜和电镜观察形态。结果；于１９８５年建立了国内第一株人卵巢粘液性囊腺癌细胞系，命名为ＯＭＣ６８５，细胞已传对９１代，冻存８年多的细胞复苏后仍生长良好，性质稳定。