双表达外源性4-1BBL/IL-15的K562细胞活化外周血淋巴细胞的研究

为肿瘤过继免疫治疗开发体外激活T细胞、NK细胞的高效途径,研究双表达外源性4-1BBL和IL-15的K562细胞刺激外周血淋巴细胞活化的能力。采用分子克隆技术,分别将4-1BBL和IL-15基因插入双表达载体pVITRO-2,命名为pV4-1BBL-IL-15。经测序鉴定后,利用脂质体介导的转染及潮霉素筛选,获得稳定双表达4-1BBL、IL-15分子的K562细胞(K562/4-1BBL/IL-15)。经流式细胞仪(FACS)分选后,K562/4-1BBL/IL15细胞和K562细胞分别用丝裂霉素C处理,与外周血淋巴细胞孵育24 h,FACS检测淋巴细胞表面活化性受体CD69的表达。对NK细胞不仅同时检测活化性受体NKG2D的表达,还用乳酸脱氢酶释放法观察NK细胞受不同刺激细胞作用后,细胞毒活性的变化。结果显示受K562/4-1BBL/IL15细胞刺激后,T细胞CD69的表达无明显变化。γδT细胞CD69表达增长5倍。NK细胞CD69表达增长6倍,而NKG2D的表达增加1.5倍;NK细胞受K562/4-1BBL/IL15细胞作用72 h后,细胞毒活性明显提高。提示双表达4-1BBL/IL-15的K562细胞能够高效激活γδT细胞及NK细胞,有望用于肿瘤的过继免疫治疗。     

长春市农村老年人卫生服务需求研究

目的了解长春市农村老年人的卫生服务需求现状及影响因素,为相关措施的改善提供依据。方法采用整群抽样的方法,对长春市双阳区奢岭镇的老年人进行入户问卷调查。用SPSS11.5统计软件进行分析处理。结果老年人群慢性病患病率为68.6%。就医中存在的最大困难是医疗费用问题,希望得到的卫生服务项目为定期体检,健康教育和医生出诊。结论农村老年人主要因经济困难影响就医行为。农村基层卫生网点设备差,医务人员技术水平低,应重视农村老年人的医疗保健,促进老年人身心健康。     

TNFα-在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机理研究

目的研究TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机制。方法建立小鼠叶酸诱导肾病模型，运用抗TNF-α多克隆抗体及对照抗体干预治疗，检测小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平，肾小管上皮细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白的表达水平。结果在CD1小鼠叶酸诱导肾病模型中，尿素氮水平显著升高，肾小管上皮细胞坏死和凋亡增加，小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平显著升高，肾皮质组织中Bcl-xL表达水平显著下降，运用抗TNF-α多克隆抗体干预治疗可保持Bcl—xL在肾组织中的表达水平，减少肾小管上皮细胞凋亡，有效减轻小鼠肾功能损害。结论TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病发病机制中具有重要作用，阻断TNF-α是治疗急性肾衰的一种潜在有效手段。     

PBL健康教育模式对老年糖尿病患者跌倒效能的影响

目的：探讨PBL教育模式对老年2型糖尿病患者跌倒效能的影响。方法随机选择本院会员管理的老年2型糖尿病患者154例作为PBL教育组,采用PBL健康教育模式干预,再随机选择普通建档的老年2型糖尿病患者128例为对照组,进行常规健康教育干预。采用修订版跌倒效能量表进行跌倒效能评估,随访半年后再次评分。结果干预前两组间各条目评分比较差异无统计学意义（P＞0.05）。干预后随访,对照组各条目评分与干预前比较差异无统计学意义（P＞0.05）,PBL教育组沐浴、上床与下床、简单的购物、乘坐公共交通工具、过马路、做轻体力园艺或晾晒衣服、上下楼梯等7个条目的评分较干预前明显升高,且显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论采用PBL教育模式可提高老年2型糖尿病患者的跌倒效能。     

CT灌注成像在蛛网膜下腔出血后脑微循环改变中的临床应用研究

目的用CT灌注成像(CTperfusion,CTP)来探讨蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑微循环的改变及其与临床表现、脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)的关系。方法收集85例SAH患者和35例正常人作为前瞻性研究对象。对每例研究对象进行CTP检查,并记录其CTP相关参数-脑血流量(cerebral blood flow,CBF)、脑血容量(cerebral blood volume,CBV)及平均通过时间(meantransittime,MTT)。将研究对象分为正常组和SAH组,CVS组和非CVS(non-cerebral vasospasm,nCVS)组,症状型CVS组(symptomatic cerebral vasospasm group,sCVS)和无症状型CVS(asymptomatic cerebral vasospasm group,asCVS)组,Hunt-HessⅠ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅴ级组,比较各组之间CTP参数的差异。结果SAH组的CBF值低于正常组,MTT值较正常组延长(P<0.05)。CVS组、sCVS组和Hunt-Hes...     

尿激酶对肺纤维化干预作用及对MMP-9和TIMP-1的影响

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)对肺纤维化的干预作用和对MMP-9/TIMP-1的影响.方法:SD雄性大鼠45只,随机分成3组:干预组(博莱霉素 尿激酶)、模型组(博莱霉素 生理盐水)和对照组.所有大鼠第28天处死.经HE、Masson胶原染色评价肺组织肺泡炎和肺纤维化程度.酶联免疫吸附法( ELISA)检测肺泡灌洗液中MMP-9、TIMP-1含量.结果:(1)肺泡炎程度评价:模型组为(1.7±0.6)分,干预组为(0.9±0.7)分,对照组为(0.2±0.4)分,模型组与干预组、对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)肺纤维化程度评价:模型组为(2.0±0.8)分,干预组为(1.1±0.7)分,组间差异有统计学意义(P＜0.01).(3)TIMP-1含量:模型组(1 240.8±90.3) pg/ml,对照组(1 078.3±31.6)pg/ml,干预组 (1 163.6±69.6) pg/ml,模型组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);模型组与干预组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:尿激酶能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过抑制TIMP-1途径起作用.     

金匮肾气丸新用

金匮肾气丸,是我国东汉时期著名医学家张仲景为肾阳不足之虚劳症而设,至今仍广泛应用于临床各科,但目前应用于精神科还罕有报道.尿潴留是精神科药物治疗中常见的副作用,一旦出现,只好采用减药,局部按摩或给予适量的新斯的明注射,但疗效均不明显.2000年以来,笔者采用金匮肾气丸治疗本症36例,获得满意疗效.     

TNFα-在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机理研究

目的研究TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病中的致病作用及其机制。方法建立小鼠叶酸诱导肾病模型,运用抗TNF-α多克隆抗体及对照抗体干预治疗,检测小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平,肾小管上皮细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白的表达水平。结果在CD1小鼠叶酸诱导肾病模型中,尿素氮水平显著升高,肾小管上皮细胞坏死和凋亡增加,小鼠血清以及肾组织中TNF-α水平显著升高,肾皮质组织中Bcl-xL表达水平显著下降,运用抗TNF-α多克隆抗体干预治疗可保持Bcl-xL在肾组织中的表达水平,减少肾小管上皮细胞凋亡,有效减轻小鼠肾功能损害。结论TNF-α在小鼠叶酸诱导肾病发病机制中具有重要作用,阻断TNF-α是治疗急性肾衰的一种潜在有效手段。     

肺纤维化大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL基因的表达

目的:检测大鼠肺纤维化时肺组织细胞凋亡及Fas/FasL 基因的表达,探讨细胞凋亡在肺纤维化过程中的作用.方法:通过博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,同时设立正常对照组,采用TUNEL法、RT-PCR 和Western Blot法检测肺组织细胞凋亡、Fas/FasL mRNA以及蛋白的表达.结果:肺纤维化模型复制成功;模型组肺组织细胞凋亡率、Fas/FasL mRNA和蛋白表达均显著高于对照组.结论:细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的上调在博来霉素致大鼠肺纤维化发生、发展的过程中起了重要作用.     

一种优化的PCR方法--降落PCR扩增目的基因

目的尝试用一种新的PCR方法--降落PCR扩增目的基因.方法在构建人CD137-hIgG1Fc-pCDNA3融合蛋白真核表达载体以及在检测HBV多聚酶YMDD变异的过程中运用降落PCR扩增目的基因.结果扩增出的特异性条带与目的基因大小一致.结论降落PCR省却了常规PCR中摸索最适退火温度的过程,对一些Tm值相近的PCR反应可应用一套温度程序扩增,是一种行之有效的PCR方法.