原发性肝癌对化疗药物敏感性的研究

目的 研究化疗药物对原发性肝癌细胞的敏感性。方法 应用ＭＴＴ法及流式细胞仪,选择１７种化疗药物对２０例经手术切除的原发性肝癌标本进行化疗药物２性的检测。结果 对原发性肝癌细胞平均抑制率大于５０％的化疗药物为异环磷酰胺、氟脲嘧啶、ＶＭ－２６（威猛）、ＴＡＡ（泰素）、环磷酰胺及ＤＤＰ（顺铂）。结论 根据联合化疗的原则,对于原发性肝癌患者选用的化疗方案为：以氟脲嘧啶为主、配合顺铂等其他一种或二种敏感的化     

Cyclin D1和NF-κB在5-Fu诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达

目的　探讨周期蛋白基因D1(CyclinD1)和核转录因子-κB(NF -κB)在5 氟脲嘧啶(5 - Fu)诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达及其对细胞周期的影响。方法　体外培养人肝癌细胞株SMMC- 772 1,应用流式细胞术检测5 Fu对SMMC -772 1细胞周期和凋亡的影响;免疫印迹分析cyclinD1表达差异;用TransAM核转录因子活性检测试剂盒检测NF κB活性;细胞免疫组织化学检测NF κBp65入核情况。结果　5 Fu可诱导SMMC -772 1细胞凋亡,5 0、10 0、2 0 0 μg/ml 5 Fu分别作用2 4h后,其诱导细胞凋亡率分别为13 .2 % ,2 1.7%和3 5 .9% ,与对照组相比有显著性差异(P <0 .0 5 )。随着5- Fu浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数增加,CyclinD1蛋白的表达逐渐增强,NF -κBp65被激活并入核。结论　5 -Fu可诱导肝癌SMMC 772 1细胞凋亡;NF- κB在5 - Fu诱导肝癌细胞凋亡同时被激活;其下调基因CyclinD1过度表达可能是促进细胞增殖、对抗细胞凋亡的重要因素之一。     

雷公藤内酯醇下调P53基因甲基化抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖

目的:研究雷公藤内酯醇(triptolide,TP)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响以及对P53基因的去甲基化作用。方法:MTT法检测TP对SMMC-7721细胞增殖的影响,甲基特异性PCR检测TP对SMMC-7721细胞P53基因甲基化的影响,RT-PCR检测SMMC-7721细胞甲基转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3bmRNA的表达,Western blotting检测SMMC-7721细胞中P53蛋白的表达。结果:TP剂量依赖性抑制SMMC-7721细胞的增殖(P<0.05),40 ng/ml时的抑制率达(73.5±3.02)%,其半数抑制浓度(IC50)约为20 ng/ml。TP显著抑制SMMC-7721细胞中DNMT1、DNMT3a、DNMT3bmRNA的表达(P<0.05,P<0.01);TP作用后P53基因的高甲基化被逆转,并呈剂量依赖性;TP可显著增强SMMC-7721细胞中P53蛋白的表达。结论:TP可通过抑制甲基转移酶使P53基因去甲基化,促进P53蛋白的表达,从而抑制SMMC-7721细胞的增殖。     

肝移植治疗终末期自身免疫性肝病的预后分析

目的  探讨肝移植治疗终末期自身免疫性肝病(AILD)的预后情况。方法  回顾性分析1996年5月至2013年4月在第二军医大学附属长征医院实施原位肝移植术的48例终末期AILD受者的临床资料。计算受者的术后累积生存率,分析死亡病例的死因,了解术后排斥反应、病毒性肝炎新发感染及AILD复发情况。结果  48例AILD受者中,存活38例,AILD受者术后5年累积生存率为76%。10例死亡受者的死亡原因包括多器官功能衰竭、移植肝衰竭、脓毒症、肺部感染、出血、肝动脉栓塞、肾衰竭。48例AILD受者中,肝移植术后发生急性排斥反应者9例(19%),有3例分别在术后1~2年内新发乙型肝炎病毒感染,有2例原发性胆汁性肝硬化受者于术后2年出现原发病复发,经积极治疗均长期生存。结论  终末期AILD肝移植受者多数可获得长期生存,应重视肝移植术后早期免疫抑制方案的制定,预防感染及排斥反应和术后新发病毒性肝炎,及时发现原发病复发等问题。     

济南市城镇居民器官捐献认知态度调查

目的 了解济南市城镇居民对捐献器官的认知态度现状。方法 采取问卷调查的方式对济南地区400名城镇居民进行调查。结果 46%的被调查者有器官捐献意向;年轻高学历群体的认知水平明显高于其他群体;仅15.3%的受访者能做到比较了解或了解相关政策,而通过公益活动的方式可使这个比例达到32.6%,通过新闻报道、公益广告和亲朋好友介绍途径,达到比较了解水平的比例分别为9.6%、7.2%和19.6%,故而社会公益活动是器官捐献是最有效的宣传方式。结论 城镇居民器官捐献意愿和认知程度有待进一步提高。     

小鼠肝脏持续低灌注模型的建立及其对热缺血再灌注损伤的耐受性

目的 建立一种稳定的小鼠肝脏持续低灌注模型,并在此基础上研究肝脏持续低灌注对小鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响.方法 选用6～8周龄C57BL/6小鼠建模,将门静脉缩窄至1 mL注射器针头直径,门静脉缩窄后3d、7d、14d和21 d行肝功能及肝脏组织病理学检测;选用稳定的模型小鼠行70％缺血再灌注手术,再灌注3h、24 h、48 h后行肝功能及肝脏组织病理学检测.对照组采用正常C57BL/6小鼠行缺血再灌注手术.结果 小鼠门静脉缩窄术后,丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)均有不同程度的升高,在7d时达到高峰[ALT:(60.8±6.2)U/L vs (25.5±2.8) U/L,P＜0.001;AST:(74.9±6.1)U/L vs (39.1±3.2) U/L,P＜0.001),同时H-E染色显示7d时肝细胞损伤最重,并且有较多炎细胞浸润;在21 d时,ALT基本恢复正常水平(P＞0.05),而AST仍高于正常水平(P=0.03).低灌注处理7d的小鼠进行缺血再灌注手术后,肝酶和组织病理学检查显示肝细胞损伤较对照组显著加重,肝酶在再灌注3h达到高峰[ALT:(8 217.0±1 111.8) U/L vs(5 597.4±1 015.3) U/L,P=0.004;AST:(8 548.2±1 155.4)U/L vs(5 765.4±956.9)U/L,P=0.003];再灌注48 h时,对照组小鼠ALT和AST均恢复正常,而经过低灌注处理的小鼠肝酶仍高于对照组[ALT:(608.8±442.9)U/L vs (47.4±20.1)U/L,P=0.008;AST:(861.8±442.8)U/L vs (70.8±68.3)U/L,P=0.008).结论 成功建立了稳定的小鼠肝脏持续低灌注模型,经持续低灌注处理后的肝脏对热缺血再灌注损伤的耐受能力显著降低,这在一定程度上能够模拟临床上心死亡器官捐献供肝的状况.     

肝癌患者肝移植术前外周血AFP mRNA的表达与肿瘤复发及患者生存的关系

目的:探讨原发性肝细胞肝癌患者在肝移植术前外周血AFP mRNA的表达及其与术后肿瘤复发、患者预后的关系.方法:以2003年2月～2004年2月收入天津市第一中心医院的31例肝细胞肝癌行原位肝移植患者为研究对象,采用实时定量RT-PCR检测患者术前外周血AFP mRNA表达水平,均采用尸体供肝经典原位肝移植.以SPSS 12.0软件分析AFP mRNA的表达与患者术后肿瘤复发及生存的相关性.结果:31例患者中有10例AFP mRNA表达阳性,表达量为57～10 400 copy/μg,中位数为360 copy/μg.患者Child-pugh分级,肿瘤的大小、个数,病理Edmond分级与术前AFP mRNA的表达水平无关.肿瘤TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的患者AFP mRNA的阳性表达率显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P=0.001);脉管浸润的患者AFP mRNA的表达水平显著高于无脉管浸润者(P=0.029).肝移植术前AFP mRNA阴性组的无瘤生存及总体生存显著高于AFP mRNA阳性组.结论:术前AFP mRNA表达的水平是肿瘤复发的危险因素,是术前可能存在肝外微转移的指标,可作为预后的判断因子.     

海水浸泡伤大鼠胃黏膜和血浆中神经激肽A和降钙素基因相关肽的动态变化

目的： 观察腹腔海水浸泡伤后大鼠胃黏膜和血浆中神经激肽A（NKA）和降钙素基因相关肽（CGRP）水平的动态变化，以探讨感觉神经肽在急性胃黏膜病变中的作用。方法：32只SD大鼠随机分成正常对照组和腹腔浸泡伤组，后者又分为1 h、2 h、3 h 3组，取大鼠胃黏膜和血浆，采用酶标法和放免法测定胃黏膜和血浆中NKA和CGRP水平。结果：随着浸泡时间的延长，腹腔浸泡伤组大鼠胃黏膜NKA和CGRP水平进行性低于正常大鼠（P<0.05），而血浆NKA和CGRP水平进行性高于正常大鼠。结论：海水浸泡伤是一损伤性因素，可引起胃黏膜中NKA和CGRP水平降低、血浆中NKA和CGRP水平升高，提示NKA和CGRP等感觉神经肽在急性胃黏膜病变发生发展过程中可能有重要作用。