大气压常温等离子体对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

目的:探究大气压常温等离子体(atmospheric room temperature plasma, ARTP)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)成骨分化的影响。方法:原代培养人牙周膜细胞,采用免疫磁珠法从中分选出hPDLSCs,通过成骨和成脂诱导培养检测其分化潜能;利用不同时长ARTP处理hPDLSCs,行成骨诱导培养,测定细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性,茜素红染色(alizarin red staining, ARS)及半定量分析法观察细胞矿化结节形成状况,RT-qPCR测定细胞成骨相关基因的表达状况,测定细胞内活性氧粒子(reactive oxygen species, ROS)含量变化。结果:采用免疫磁珠法分选出的hPDLSCs呈长梭形、多角形,表现出良好的成骨和成脂分化潜能;ARTP处理时长1 min可提高hPDLSCs的ALP活性,增加细胞内矿化结节形成量;能够提升hPDLSCs成骨相关基因ALP、COL-I、RUNX2的表达水平;ARTP提高了hPDL...     

高原负荷运动下肌酸激酶的变化

目的 了解高原地区不同运动负荷下肌酸激酶(CK)的变化,探讨高原地区所适应的运动强度. 方法随机抽取移居拉萨(海拔3658m)满两年的健康汉族人和世居拉萨健康藏族人各120名.汉族和藏族各分为4组,共8组,每组30人,按照课题设计的Bruce运动方案(8min运动强度为3、4两个级别,10min运动强度为3、4两个级别),进行平板运动实验.运动前后5min各抽血一次,用抗凝管存取血液、离心、分离血浆.用ELISA法检测. 结果各个运动级别和不同的运动时间所检测的结果相比较均为P＞0. 05.讨论 用统计学处理的结果显示P＞0.05,直接观察各组数据运动前后数据也无大的变化,运动前略高于运动后.     

四环素调控的介导bFGF重组腺相关病毒的构建及体外实验

目的:制备携带碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor ,bFGF)的病毒载体,能被四环素调控表达。方法:构建重组质粒pAAV-S3-bFGF,生产重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF,并感染小鼠颅骨前成骨细胞MC3T3-E1,实时定量PCR检测强力霉素(doxycycline,Dox)调控下rAAV2-tet-off-bFGF对MC3T3-E1中成骨相关因子的影响。结果:生产出高滴度及纯度的重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF,能被Dox调控,感染 MC3T3-E1后能促进胞内成骨相关因子的表达升高。结论:这种重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF能在Dox调控下有效传递外源基因,为骨组织工程中的种子细胞提供基因传递载体。     

Sonic hedgehog诱导人脐带间充质干细胞分化过程中成骨相关miRNA表达差异的筛选

目的:检测并分析人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)成骨分化过程中的成骨特征性miRNA表达谱,探讨其可能的靶基因和临床意义.方法:对Shh诱导hUCMSCs成骨分化过程中表达的miRNA进行高通量测序分析,检测其表达量的变化,并验证成骨相关miRNA的表达差异.结果:通过miRNA高通量测序和RT-qPCR验证,预测...     

医患沟通教育在口腔修复教学中的应用与效果评价

目的:探讨医患沟通教育在口腔修复学教学中的应用效果.方法:将口腔修复科实习的五年制口腔医学本科生随机分为2组:实验教学组(n=25)采用医患沟通教育融合常规教学模式;传统教学组(n=25)采用常规教学模式.利用医患沟通行为量表测评,教学效果调查问卷比较两种教学模式的效果.结果:实验教学组医患沟通能力优于传统教学组(P<...     

人脐带间充质干细胞分离培养及鉴定的相关研究

目的：原代培养并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs)，对hUCMSCs的生物学性状、表面抗原、多向分化潜能等进行研究，并初步检测其内源性Hedgehog(Hh)信号通路主要因子的RNA水平。方法：取足月健康剖宫产胎儿脐带，提取hUCMSCs，贴壁培养。绘制生长曲线，检测细胞周期。进行体外成骨、成脂及成软骨诱导。流式细胞仪检测细胞表面标志物。Real-time PCR检测原代细胞内源性Hh信号通路主要因子的mRNA水平。结果：脐带剪碎经胶原酶消化后24 h细胞即可贴壁，7 d可生长达培养皿底面积85%融合。 P3代hUCMSCs的生长曲线呈上升趋势，传代后第3 d进入倍数生长期。并具有成骨分化、成脂分化及成软骨分化的能力。流式细胞仪检测99.04％的细胞高表达整合素分子CD29，98.80％的细胞高表达粘附分子CD44，85.09％的细胞高表达内皮糖蛋白分子CD105，只有0.19％的细胞表达造血干细胞标记物CD45，0.58%的细胞表达血管内皮分子CD34。脐带来源的间充质干细胞内能检测到Hh信号通路中主要因子的内源性表达，其中Shh水平相对较高。结论：原代培养的hUCMSCs为进一步探索Hh信号通路在颅颌骨缺损修复中的作用机制提供可靠的细胞来源。