siRNA干扰MDR1逆转口腔舌癌耐药性表型的实验研究

目的：探讨MDR1siRNA对人舌癌耐药细胞株TCA8113多药耐药性的影响。方法：以人舌癌耐药细胞株TCA8113/DDP为靶细胞,将针对MDR1基因合成,并已鉴定和测序后的siRNA分子利用脂质体介导转染TCA8113/DDP细胞,采用G418筛选克隆细胞,RT-PCR检测MDR1基因mRNA表达,免疫组织化学法测定P-糖蛋白（P-gp）表达;MTT比色法检测TCA8113/DDP细胞对顺铂（DDP）、卡铂（CBP）、平阳霉素（PYM）的敏感性。结果：经转染成功的阳性克隆细胞TCA8113/DDP的MDR1mRNA和P-gp的表达均被抑制。TCA8113人舌癌耐药细胞顺铂（DDP）、卡铂（CBP）、平阳霉素（PYM）的IC50分别降至3.43μmol/L,1.72μmol/L和1.05μmol/L（P〈0.01）。结论：稳定转染含编码MDR1siRNA的质粒载体能特异性地阻抑人舌癌多药耐药细胞TCA8113细胞MDR1基因的表达,逆转其对抗癌药物的耐受性。     

siRNA抑制人Tca8113/CDDP细胞多药耐药相关蛋白表达的研究

目的:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人舌癌耐药细胞多药耐药相关蛋白(muhidrugresistance associated protein,MRP)的表达,观察其对培养细胞耐药性的干扰情况。方法:设计针对MRP基因的siRNA,转染人舌癌多药耐药细胞Tca8113/CDDP,用RT-PCR分析MRP mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测MRP蛋白表达量;MTT法检测MRP siRNA的细胞毒作用。结果:Tca8113/CDDP细胞转染MRP siRNA后,MRPmRNA表达较对照组明显降低,降低率为61.3%;转染36 h后MRP siRNA组的MRP蛋白表达阳性率较对照组明显减低;MRP siRNA组中顺铂对Tca8113/CDDP细胞生长的抑制作用明显强于对照组,且抑制作用随时间的延长而增强。结论:MRP siRNA可以明显抑制口腔癌耐药细胞的多药耐药。     

突变型Nbs1基因转染对头颈癌化疗敏感性的影响

目的:探讨突变型Nbs1基因转染对头颈癌细胞化疗敏感性的影响。方法:用突变型Nbs1腺病毒载体转染头颈癌细胞株JHU006,同时给予顺铂处理,24 h后,用MTT法测定癌细胞生长曲线,中性彗星法检测癌细胞DNA双链断裂程度。结果:JHU006细胞株在转染突变型Nbs1基因加顺铂治疗后,细胞生长处于停滞状态,至第6天大部分细胞死亡;中性彗星实验显示,该组癌细胞平均尾力矩值明显增高。结论:突变型Nbs1基因转染可显著抑制头颈癌细胞生长,并阻断了DNA双链断裂损伤的修复,因而增加了头颈癌细胞的化疗敏感性。     

抑制MRN复合体功能增强头颈癌放疗敏感性研究

目的：测定突变型Nbs1基因转染头颈癌细胞后对放射敏感性的影响。方法：用突变型Nbs1腺病毒载体转染头颈癌细胞株JHU006,同时给予Co^60γ射线照射2Gy,于24h后,分别用MTT法测定细胞生长曲线,以及中性彗星法检测癌细胞DNA双链断裂程度。结果：JHU006细胞株在转染突变型Nbs1基因后,再配合放射治疗,癌细胞生长处于停滞状态。中性彗星实验显示,该组癌细胞平均尾力矩值明显增大。结论：突变型Nbs1基因转染可以抑制头颈癌细胞DNA双链断裂损伤的修复功能,因而显著增加了癌细胞放疗敏感性。     

口腔癌多药耐药的研究现状

化疗是口腔癌临床治疗的常用方法之一,在口腔癌治疗中发挥了重要的作用。但部分病例化疗后出现疗效不佳现象,表现为机体对化疗药物出现了耐药现象。研究发现多数肿瘤细胞存在内源性和外源性的耐药,这是造成化疗失败的主要原因。相关研究表明口腔癌多药耐药与相关蛋白表达、酶类介导、基因突变等众多因素相关,目前研究热点是针对耐药相关因素进行多药耐药的逆转。     

突变型Nbs1基因转染对头颈癌放疗敏感性影响的实验研究

目的探讨突变型Nbs1基因转染对头颈癌细胞放射敏感性的影响。方法用突变型Nbs1腺病毒载体转染头颈癌细胞株JHU006,同时给予2 Gy Co^60γ射线照射,24h后用MTF法测定细胞生长曲线,以及中性彗星法检测癌细胞DNA双链断裂程度。结果JHU006细胞株转染突变型Nbs1基因并配合放射治疗后,癌细胞处于生长停滞状态：中性彗星实验显示,该组癌细胞平均尾力矩值明显增大。结论突变型Nbs1基因转染可以抑制头颈部DNA双链断裂癌细胞的损伤修复功能．因而显著增加了癌细胞放疗敏感性。     

Rad50在放射后大鼠涎腺中的表达

目的:检测Rad50在放射后大鼠涎腺组织中的表达水平。方法:选用60只Wistar大白鼠,随机分成6组,每组10只。分为对照组(未照射)、3 Gy组、6 Gy组、9 Gy组、12 Gy组、15 Gy组。放射组大白鼠用60Co一次性照射后2 h内处死,立即取出其腮腺、下颌下腺组织备用。用电镜观察放射后各组涎腺组织超微结构的变化,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Rad50基因表达水平的变化,用免疫组织化学法观察其蛋白表达水平的变化。结果:各放射组涎腺组织中Rad50的表达均高于对照组(P<0.05),但不同放射剂量的各放射组之间Rad50的表达无明显差异(P>0.05)。透射电镜下可见大鼠腮腺、下颌下腺细胞超微结构随着放射剂量的增加,发生较明显改变。结论:放射可引起涎腺组织Rad50表达水平增高,但其表达水平并未随放射剂量的增加而增高,提示Rad50在涎腺放射损伤修复中的表达水平有限,这可能是涎腺放射敏感性机制之一。     

荨麻根的化学成分研究

目的 研究荨麻根的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、大孔树脂吸附色谱等方法对荨麻根的化学成分进行分离;采用IR、NMR等方法对其进行结构鉴定.结果 从荨麻根醇提取物中分离鉴定了8个化合物:β-谷甾醇(Ⅰ)、胡萝卜苷(Ⅱ)、棕榈酸(Ⅲ)、豆甾醇(Ⅳ)、α-菠甾醇(Ⅴ)、KNO3(Ⅵ)、胆甾-5,22-二烯-3β-醇(Ⅶ)、...     

海木的化学成分研究

目的 对产自广西桂林市永福县的海木的化学成分进行研究.方法 海木树皮用95％乙醇回流提取,提取液经减压浓缩得到浸膏,浸膏石油醚部分应用硅胶柱色谱方法分离得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;浸膏三氯甲烷部分应用硅胶柱色谱和sephadex LH-20分离得到化合物V、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ,浸膏正丁醇部分应用硅胶柱色谱方法分离得到化合物Ⅹ...