外科植入引导牙周组织再生载药PLGA/CS/nHA复合膜的制备及表征

目的 制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)/壳聚糖(CS)/纳米羟基磷灰石(nHA)多孔性载药膜,用于外科植入牙周引导组织再生,并评价其体外性能.方法 按照PLGA/CS的质量比将实验设为4组:分别为100/0、90/10、80/20、70/30,采用冷冻干燥法制备PLGA/CS/nHA复合膜,并用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为致孔剂.依据孔隙率、吸水率、力学性能、体外降解率筛选出最优质量比的PLGA/CS/nHA复合膜作为药物载体,制备克林霉素缓释膜.采用扫描电子显微镜观察PLGA/CS/nHA复合膜的表面形貌,无水乙醇液体置换法检测复合膜的孔隙率,质量干湿率比考察复合膜的吸水率,电子万能材料实验机测试复合膜的湿态力学性能,质量损失考察膜的降解率,紫外分光光度法考察载药膜的体外药物释放特性.体外实验:在载药膜上接种牙周膜成纤维细胞(PLFs),培养1～7 d,采用CCK-8法测定细胞活性和增殖情况.结果 PLGA/CS质量比为90∶10时制备的PLGA/CS/nHA复合膜最为理想,孔隙率为(28.66±1.35)％,吸水率为(108.65±2.27)％,拉伸强度为(2.36±0.04) MPa,断裂伸长率为(203.64±3.89)％,断裂力为(45.98±2.46)N,30 d时降解率为(17.60±0.86)％,最大每日释放量为150 μg/mL,平稳释放药物并维持有效药物浓度时间＞15 d,载药膜能促进牙周膜成纤维细胞的增殖.结论 本研究制备的载药PLGA/CS/nHA复合膜孔隙率适中,体外降解与组织生长相适应,力学测试结果能够创造和维持牙周引导组织生长特定的空间,在一定时间内能持续稳定释放药物.     

PHMG根管封闭剂的制备及性能测定

目的:制备并筛选出符合ISO 6876:2001标准的聚六亚甲基单胍(PHMG)改性根管封闭剂,测定其物理性能和抑菌性能,以开发具有较强抑菌性能的新型根管封闭剂。方法:以氧化锌丁香油糊剂(ZOE)为对照,按照ISO 6876:2001规定的方法,测定不同PHMG浓度的根管封闭剂的物理性能;采用琼脂扩散法,测定其对粪肠球菌、白色念珠菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌性能;并进行统计学分析。结果:11组不同材料的流动性、固化时间、薄膜厚度和溶解率均符合ISO 6876:2001标准;固化后尺寸变化中以浓度为0.8%~2.0%的材料符合ISO 6876:2001标准。PHMG根管封闭剂的抑菌性显著高于氧化锌丁香油糊剂的抑菌性(P＜0.05)。结论:成功制备出符合新型根管封闭剂要求的PHMG根管封闭剂;PHMG浓度在0.8%~1.4%之间的根管封闭剂性能最佳。     

慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的 人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建

目的 通过慢病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的口腔黏膜上皮细胞（OMECs）,探索构建高效、稳定的永生化OMECs细胞系的方法。方法 提取293T细胞总RNA,应用聚合酶链反应（PCR）法扩 增hTERT基因全长,构建重组慢病毒载体pLVX-puro-hTERT。包装慢病毒颗粒后感染人正常OMECs,经嘌呤霉素抗 性筛选获得阳性克隆,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测hTERT基因mRNA和蛋白的表达水平。结果 成功构建了pLVX-puro-hTERT过表达慢病毒载体并感染到OMECs中;感染细胞与正常OMECs形态相似,呈铺路石 样生长;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,hTERT在感染细胞中高表达,与正常细胞相比差异有统计学 意义（P<0.05）。结论 通过慢病毒法成功建立了过表达hTERT的OMECs稳定细胞系,为构建高效、稳定增殖的人 永生化OMECs细胞系奠定了实验基础。