外源性p53对不同LET辐射诱导人黑色素瘤细胞系A375死亡途径的影响

目的 观察外源性P53蛋白对不同传能线密度(LET)射线辐照诱导肿瘤细胞凋亡和坏死的影响,并探讨其可能的机制。方法 人黑色素瘤细胞系A375(wild-type p53)经携带人野生型p53基因的腺病毒载体(AdCMV-p53)感染后分别给予X射线和碳离子束照射,采用克隆形成法测定细胞辐射敏感性,Hoechst 33258和吖啶橙-溴化乙锭双染荧光显微镜下观察细胞凋亡和坏死。结果1高LET辐照时,A375细胞和转导人野生型p53基因的A375细胞(A375/p53)的辐射敏感性没有明显差异;2虽然辐射诱导细胞凋亡比例的增加依赖于LET升高,但是无论高LET或低LET,外源性P53蛋白均可有效诱导细胞凋亡。3高LET辐照时,A375细胞的坏死细胞明显高于A375/p53细胞。结论 尽管高LET辐射对A375和A375/p53细胞的存活无明显影响,但是对细胞凋亡的诱导却部分依赖于P53蛋白的功能,P53蛋白可能在调节细胞死亡类型中发挥重要作用。这对临床应用高LET辐射联合p53基因治疗恶性黑色素瘤有一定参考意义。     

发疹型药疹的实验室诊断研究进展

发疹型药疹与感染性发疹性疾病在皮损形态上颇为相似,极易混淆,使二者鉴别诊断非常困难.在临床上如果把药疹患者误诊为感染性发疹性疾病继续用药会使药疹加重,甚至危及患者生命;反之,把感染性发疹性疾病误诊为药疹停药,会延误病情,并且会造成患者再患病时选择药物的困难.因此,需要实验室的诊断方法来确诊.可用于发疹型药疹的试验诊断的方法可分为两大类:一是体内试验:包括斑贴试验、皮内试验和激发试验;二是体外试验:包括血清特异抗体检测、特异性淋巴细胞转化试验、巨噬细胞游动抑制试验、特异性淋巴细胞毒性试验及相关细胞因子检测.     

高度浓缩生长因子对MC3T3-E1成骨细胞生物学性能的影响

目的：观察高度浓缩生长因子（concentrated growth factor,CGF）对成骨细胞生物学性能的影响。方法：将MC3T3-E1细胞在CGF环境下进行培养,并设立空白对照组。扫描电镜观察成骨细胞在CGF表面的附着;培养1、4、7 d后,检测细胞增殖情况以及碱性磷酸酶（ALP）活性;茜素红染色观察矿化结节和成骨相关基因Runx2的表达。CGF浸出液培养细胞24 h后,以鬼笔环肽染色观察细胞骨架的形态变化。采用 SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果：CCK-8比色显示,培养1、4、7 d,在相同时间点,实验组与对照组相比,CGF细胞增殖活性显著增强（P< 0.05）。ALP活性检测显示,培养1 d后,实验组与对照组无显著差异（P>0.05）;培养4、7 d后,实验组与对照组相比,ALP活性具有显著差异（P<0.05)。茜素红染色显示,CGF组钙化结节数量增多且面积较大。鬼笔环肽染色和DAPI染色可见,CGF组中细胞数量增多,细胞铺展面增大,肌动蛋白形态更为清晰。CGF可促进Runx2 mRNA表达（P<0.05）。结论：CGF可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化以及Runx2的表达。     

松油烯4醇的抑菌性及促进MC3T3-E1细胞成骨分化作用

背景：有研究发现,松油烯4醇对于种植体周围炎相关致病菌表现出明显的抑菌活性,当应用于钛种植体表面时能有效减少表面生物膜形成,降低种植体周围炎的发生,但是有关其生物安全性的研究不多。目的：分析松油烯4醇对金黄色葡萄球菌、变异链球菌的抗菌效果,以及其对MC3T3-E1细胞生长与成骨分化的影响。方法：将松油烯4醇以不同体积分数溶于二甲基亚砜中,检测松油烯4醇溶液对金黄色葡萄球菌和变异链球菌的最低抑菌浓度及最低杀菌浓度,并采用抑菌圈实验检测1/2最低抑菌浓度、最低抑菌浓度及最低杀菌浓度松油烯4醇的抗菌效果。以不同浓度(0%,0.3%,0.2%,0.1%,均为体积分数)松油烯4醇的培养基或钙化诱导液处理MC3T3-E1细胞,采用CCK-8实验检测细胞的增殖活性,罗丹明-鬼笔环肽染色观察细胞骨架,碱性磷酸酶活性实验检测细胞分化能力,茜素红染色观察矿化结节形成,RT-PCR检测Runx2、骨钙素m RNA的表达。结果与结论：(1)松油烯4醇溶液对变异链球菌的最低抑菌浓度为0.1%、最低杀菌浓度为0.4%,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.03%、最低杀菌浓度为0.125%;随着浓度的增加,松油烯4...     

二甲双胍对转化生长因子β1诱导黑素瘤1205Lu细胞上皮-间质转化及侵袭的影响

目的 探讨二甲双胍在转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导下,对黑素瘤1205Lu细胞上皮-间质转化(EMT)过程及侵袭的影响.方法 体外培养1205Lu细胞,分3组处理:空白对照组、TGF-β1(5 ng/ml)组、TGF-β1(5 ng/ml)+二甲双胍(1 mmol/L)组.处理48 h后,显微镜下观察各组细胞形态变化并采集照片.Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量RT-PCR技术分别测定细胞内N-钙黏蛋白及基质金属蛋白酶9(MMP-9)在蛋白质和mRNA水平上的表达,通过单因素方差分析及LSD-t法对结果进行统计学分析.结果 与空白对照组相比,TGF-β 1诱导1205Lu细胞向成纤维细胞样形态转变(同上皮-间质转化样改变),联合二甲双胍可逆转上述形态改变.3组穿膜细胞数为空白对照组194.1±8.295、TGF-β1组412.2±13.427、TGF-β1+二甲双胍组175.3±8.693.N钙黏蛋白水平3组分别为0.603±0.029、1.963±0.016、0.207±0.009,mRNA水平3组分别为1.000±0.000、6.678±0.043、1.035±0.015.MMP-9蛋白水平3组分别为0.575±0.009、1.243±0.027、0.629±0.008,mRNA水平3组分别为1.000±0.000、5.351±0.604、0.930±0.130.结果经方差分析显示,3组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 二甲双胍可显著抑制TGF-p1诱导的黑素瘤1205Lu细胞EMT样形态改变、细胞侵袭及N钙黏蛋白、MMP-9在蛋白和mRNA水平上的表达.     

香菇多糖抗小鼠MRSA皮肤感染的作用

目的 本研究主要探讨香菇多糖是否具有抗小鼠耐甲氧西林金黄色葡萄球菌皮肤感染的作用.方法 将小鼠随机分为对照组和香菇多糖处理组,每组10只,皮下注射5×107CFU/30μl耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,建立小鼠皮肤感染模型.对照组腹腔注射100μl PBS,实验组腹腔注射100μl香菇多糖(100mg/kg).观察小鼠皮肤...     

髋臼假体位置对人工股骨头应力分布的影响

目的探讨髋臼假体不同放置位置对髋关节置换术后人工股骨头压应力的生物力学影响。方法对8具尸体16侧髋关节标本按照全髋关节置换术髋臼的处理原则，制作16种人工髋臼放置的位置，共分成两组：髋臼向内侧位移组，从解剖位置起间隔2mm，递增至14mm，共8髋；靛臼向上方位移组，从解剖位置起间隔2mm，递增至14mm，共8髋。应用电阻应变片在生物力学试验机上测定各标本在轴向1000N载荷下人工股骨头的应变数据，记录人工股骨头所承受的压应力值。结果（1）髋臼向内侧位移组：髋臼假体位置每向内位移2mm，人工股骨头承受的压应力就增加，位移越多，股骨头承受的压应力增加就越明显，位移超过6mm后，压应力呈明显快速增加趋势；（2）髋臼向上方位移组：髋臼假体位置每向上位移2mm，除上移6mm应力值小于上移4mm外，人工股骨头承受的压应力总体趋势是增加，且上移超过8mm后，人工股骨头压应力值开始明显增加；（3）在相同位移情况下，向内位移时人工股骨头压应力明显大于向上位移。结论髋臼中心无论是向内或向上位移，股骨头承受的压应力均增加，且位移幅度越大，压应力增加越明显；向上位移6mm时，人工股骨头承受的应力值均小于前后位移点，未排除此位点是一应力缓冲点的可能。     

一氧化氮对人肝癌细胞SMMC-7721辐射敏感性的增强效应

目的:观察一氧化氮对肿瘤细胞SMMC-7721辐射敏感性的作用效果。方法:实验于2005-06/09在兰州大学生命科学学院和中科院近代物理研究辐射医学实验室进行。处于对数生长期的肝癌细胞SMMC-7721,在用X射线照射前4h,换入含有0.1mmol/L硝普钠(一氧化氮的前体)的培养液,与对照组(不加硝普钠)一起,在200cGy/min的剂量率下,分别照射0,1,2,4,6,8Gy,换为正常培养液培养。用集落形成法计算细胞的存活率,用吖啶橙/溴乙啶双染法检测细胞的死亡情况,用流式细胞仪检测细胞周期。结果:①存活曲线细胞存活率随照射剂量增加而减少,硝普钠组细胞的克隆形成率低于对照组(2Gy时,P<0.01)。②细胞死亡百分率(坏死细胞与凋亡细胞总数/总细胞数):与照射剂量呈正相关,硝普钠组高于对照组(P<0.05)。对照组从(9.95±3.53)%(0Gy)逐渐升至(58.74±3.46)%(6Gy),而硝普钠组则从(18.53±12.02)%(0Gy)迅速升至(61.57±9.53)%(2Gy)。③细胞周期检测结果:对照组细胞经过X射线照射后,出现了G2/M期阻滞[从0Gy时(12.50±5.76)%逐渐增加到8Gy(40.36±2.74)%],而硝普钠组细胞在低剂量时主要表现为G0/G1期阻滞[0Gy:(16.06±7.19)%;2Gy:(17.93±0.92)%],而G2/M期阻滞仅在高剂量时明显[8Gy时为(50.10±3.93)%,P<0.05]。结论:经硝普钠产生的一氧化氮,通过与X射线协同作用,减少了肝癌细胞SMMC-7721的细胞存活率,促进细胞死亡,阻止细胞被阻滞至G2/M期,是一种有效的辐射增敏剂。     

丹参酮对女性迟发性痤疮患者血清性激素水平的影响及疗效观察

目的探讨丹参酮对女性迟发性痤疮患者血清性激素水平的影响及临床疗效。方法选择门诊女性迟发性痤疮患者115例,随机分为：治疗组（A组）60例,口服丹参酮胶囊4粒,4次/d;对照组（B组）55例,口服多西环素片0.1 g,2次/d,4周后减为0.1 g,1次/d。8周为一疗程,疗程结束后进行疗效评价。并对治疗组（A组）患者,于治疗前后分别采用电化学发光免疫分析法检测其卵泡期血清六项性激素水平,另选40例相应年龄段的健康女性作健康对照组（C组）。结果A组痊愈率为36.7%,有效率为78.4%;B组痊愈率为14.5%,有效率为45.4%,A组痊愈率及有效率均高于B组,差异有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）。A组女性迟发性痤疮患者治疗前血清睾酮水平较C组明显升高（P〈0.05）,而治疗后血清睾酮水平与C组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论女性迟发性痤疮发病的主要原因与雄激素分泌增多有关。丹参酮具有抗雄激素作用,对女性迟发性痤疮的疗效确切,且无耐药性及明显不良反应。     

建中行建汤治疗冠心病108例

2000～2006年，笔者应用自拟建中行建汤治疗冠心病108例，现报告如下。