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1.
目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)自身增强子I(enhancerI,ENHI)对HBV DNA疫苗免疫应答的影响。方法 采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原(HBsAg)和HBsA-ENHI基因片段,重组到载体VR1012中,构建两种HBV DNA疫苗,转染CADS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB/c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果 转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHI的HBV DNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高,两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异;免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHI可使HBV DNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加,对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB/C小鼠引起的免疫应答无明显影响。 相似文献
2.
增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究乙型肝炎病毒(HBV)自身增强子Ⅰ(enhancerⅠ,ENHⅠ)对HBVDNA疫苗免疫应答的影响。方法采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原(HBsAg)和HBsAg-ENHⅠ基因片段,重组到载体VR1012中,构建两种HBVDNA疫苗,转染COS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB/c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHⅠ的HBVDNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高,两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异;免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHⅠ可使HBVDNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加,对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB/c小鼠引起的免疫应答无明显影响。 相似文献
3.
4.
我科2006-6/2007-12应用中心静脉导管胸腔留置治疗胸腔积液24例,护理体会如下。 相似文献
5.
经尿道电切前列腺术(TURP)作为一种微创手术已广泛应用于临床,以其创伤小,术后恢复快很快为广大患者接受。2003年12月至2004年12月我院对30例患前列腺增生症的老年病人成功地施行了TURP,全部病例采用连续硬膜外麻醉,取得良好效果,现报道如下。1一般资料2003年12月至2004年12月我院泌尿外科共进行经尿道电切前列腺术30例,ASAⅠ级~Ⅱ级,年龄60岁~81岁,平均年龄70.5岁。既往有高血压病10例,冠心病6例,慢性支气管炎4例,糖尿病3例,均为择期手术,术前做肝功能、心功能、凝血酶原时间、血常规检查。2方法术前30 min肌肉注射苯巴比妥钠注射液4 … 相似文献
6.
7.
HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 在原核表达系统中对HIVp2 4抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性。方法 利用PCR技术从HIV-1全基因质粒 (B2N)中扩增p2 4抗原基因 ,并克隆入T载体中。通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上 ,用此连接产物转化大肠埃希菌BL2 1,经IPTG诱导 ,表达p2 4抗原。利用固定化金属离子 (Ni2 )配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白。并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、WesternBlot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测。结果 PCR产物约为 6 90bp ,与预期p2 4抗原全基因片段大小一致。重组质粒T-p2 4和pRSET-p2 4经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,其插入的外源基因片段均为 6 90bp。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS PAGE电泳 ,均可见一条约 2 4× 10 3的外源基因表达带 ,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA试验 ,证明基因工程表达的p2 4抗原具有较高的特异性及活性。结论 成功构建了HIVp2 4表达载体pRSET-p2 4 ,并在原核细胞中高效表达 ,其表达产物具有良好的特异性及活性 相似文献
8.
抗HIV—1 gp41多肽单克隆抗体的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
抗HIV-1gp41多肽单克隆抗体的研究范涛貌盼勇洪世雯梁勇冯传前何红霞(解放军302医院病毒研究室,北京100039)爱滋病(AIDS)是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所致一种严重传染性疾病,目前对其感染还没有安全、有效的治疗方法和疫苗。1984年... 相似文献
9.
合成肽抗原抗人免疫缺陷病毒1/2型抗体酶联试剂盒… 总被引:1,自引:0,他引:1
根据人免疫缺陷病毒的基因结构和氨基酸序列,采用因相法合成了HIV-1gp41、bp120、p24和HIV-2gp36的4条多肽,混合包被酶标板做为固相抗原,采用间接酶联免疫吸附试验,建立了检测抗-HIV-1/2IgG抗体的酶联诊断试剂盒。检测卫生部药品和生物制品检定所提供的41份质控参比血清,其特异性、敏感性均为100%,变异系数小于10%。检测186份其它病种病人血清均为阴性,与华怡、巴斯德、金 相似文献
10.
用RACE技术对一株肠道病毒3''端进行扩增和序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 应用3′RACE技术对一株本室分离肠道病毒基因组3′末端进行扩增,并对其核苷酸序列进行比较分析。方法 提取病毒总RNA,以锚定oligdT(17)引物进行逆转录,用特异引物及锚定引物进行3′RACE扩增,将PCR产物进行克隆、测序和序列分析。结果 获得了该病毒的3′端核苷酸序列,同源性分析结果显示该肠道病毒的核苷酸序列与肠道病毒76、89、90、91型的同源性最高为90%左右,而与其他型别的肠道病毒的同源性均小于80%;推导的氨基酸同源性与肠道病毒76、89、90、91型均在90%以上。结论 用RACE技术对肠道病毒3′端进行扩增及序列分析,证明该病毒属新型肠道病毒类,为进一步研究该病毒的分子生物学特性奠定了基础。 相似文献