高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面的微观动态分析

目的研究高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面的微观形态和微观成分的动态变化。方法 Wistar大鼠随机分为实验组和对照组。实验组大鼠饲喂高脂饲料,以建立高脂血症动物模型。12周建模成功后,将种植体植入对照组和实验组大鼠股骨,在植入后的1、3和5 d分别取材,制作硬组织切片,通过光学显微镜和扫描电镜分析种植体早期骨结合界面的微观形态的动态变化,通过X射线能谱仪分析种植体早期骨结合界面的微观成分的动态变化。结果实验组的成骨细胞少于对照组(P<0.05),Ca/P原子个数百分比显著低于对照组(P<0.05),破骨细胞多于对照组(P<0.05),O元素的原子百分比明显高于对照组(P<0.05);由种植体至骨组织Ti元素的原子百分比逐渐减少,实验组和对照组Ti的渗透量无明显差异。结论高脂血症大鼠种植体早期骨结合界面成骨细胞和Ca、P沉积减少,破骨细胞增多,高脂血症抑制种植体早期骨结合。     

微小RNA-29a-3p调节卷曲蛋白4表达影响高脂血症大鼠种植体骨整合的实验研究

目的 研究microRNA-29a-3p（miR-29a-3p）对高脂环境下大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化和高脂血症大鼠种植体骨整合的影响及其作用位点。方法 1）体外实验：对BMSCs分别进行普通和高脂成骨诱导,通过逆转录实时定量聚合酶链反应和Western blot检测miR-29a-3p及成骨相关因子碱性磷酸酶（ALP）、Runt相关基因2（Runx2）的基因和蛋白质表达;高脂培养的BMSCs分别转染miR-29a-3p模拟物、抑制物及阴性对照（NC）质粒,RT-qPCR检测miR-29a-3p、ALP及Runx2基因表达情况,Western blot检测ALP、Runx2蛋白表达情况。通过靶基因预测软件（Target Scan、MiRNA.org等）预测miR-29a-3p与成骨相关的靶基因为卷曲蛋白4（Fzd4）,双荧光素酶报告检测miR-29a-3p与Fzd4的相互作用关系。2）体内实验：高脂血症大鼠为实验组,普通大鼠为对照组,两组分别植入种植体,检测种植体周围骨组织中miR-29a-3p、ALP、Runx2的表达差异;行种植体-骨组织的硬组织切片,亚甲基蓝-酸性品红染色,进行组织学观察。分别将miR-29a-3p过表达慢病毒载体及空白对照慢病毒载体注射入高脂血症大鼠,种植体植入后3、10 d检测种植体周围骨组织中ALP、Runx2的表达变化以研究miR-29a-3p对高脂血症大鼠成骨的作用。结果 高脂组与普通组相比,ALP、Runx2和miR-29a-3p表达下调,BMSCs成骨分化能力下降。miR-29a-3p模拟物组与抑制物组相比,ALP、Runx2表达升高,BMSCs成骨分化能力增强。体内实验也得到了相似结果。双荧光素酶报告基因分析证实miR29a-3p通过直接结合3’-UTR抑制Fzd4表达。结论 miR-29a-3p对高脂环境下大鼠BMSCs成骨分化起正向调节作用,可直接与Fzd4结合调节成骨分化;miR-29a-3p能够促进高脂血症大鼠种植体周围成骨标志基因的表达,有利于骨整合。     

卷曲蛋白在无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族-卷曲蛋白信号转导通路中的作用

卷曲蛋白(FRZ)最初鉴定于果蝇,因其与无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族(WNT)缠绕在一起而得名,是WNT家族的细胞表面受体,包括三个区域,是G蛋白偶联受体(GPCR)家族中的一员,具有和缺失GPCR的一些基本结构.FRZ信号转导通路分为依赖转录调节因子β-连环蛋白的经典和非经典信号转导通路.FRZ包括FRZ1～10,其调节作用非常广泛,不但在细胞水平上参与调控胚胎发育、干细胞分化和器官形成等过程,而且还在维持组织稳态、再生、塑性和修复中起着重要的作用.FRZ信号转导通路中的激动剂、拮抗剂以及以WNT/FRZ信号转导通路中的共受体,都被假定为潜在的治疗多种癌症、神经退行性变疾病和骨质疏松等重大疾病的靶点.WNT/FRZ相关信号转导通路网非常的复杂,其信号转导通路激活后的结果,潜在机制和相关因子研究都还不够透彻.探究该信号转导通路的特异性,量化其结合反应及系统的定位及其所激活的下游事件是非常重要的,但还需要更多的相关研究来逐步诠释这些问题.