淫羊藿次苷对犬颌骨间充质干细胞增殖与成骨分化的影响

目的 研究淫羊藿次苷Ⅱ（Icarisid Ⅱ,ICSII）对体外培养的比格犬颌骨间充质干细胞（alveolar bone-derived stem cells, AMSCs）增殖与成骨分化的影响。方法 取比格犬颌骨骨片,体外分离培养出dAMSCs,传代至第4代,做多向分化鉴定。以10^-5、10^-6、10^-7、10^-8、10^-9 mol/L浓度的ICSII刺激dAMSCs后,取1、3、5、7 d的细胞,分别用CCK-8及碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测dAMSCs的增殖及ALP活性;用10^-6 mol/L的ICSII处理dAMSCs后14 d,作ALP染色,21 d时作茜素红染色,以判断ICSII对细胞分化及矿化能力的影响。在成骨诱导及10^-6 mol/L的ICSII药物诱导第4、8天后,用蛋白免疫印迹试验分析成骨相关蛋白OSX、Runx-2及OCN的表达量;在诱导第6天时,利用RT-PCR分析成骨相关基因OSX、bFGF、Runx-2及OCN的表达情况。采用SPSS 22.0软件包进行统计分析。结果 原代培养的dAMSCs贴壁生长,呈梭形,具备多向分化能力;ICSII在不同浓度下均可促进dAMSCs的增殖,其ALP活性亦有提高,且在实验浓度时可观察到钙结节形成。各成骨相关基因在ICSII诱导后表达量有不同程度增加,均高于完全培养基组。随着时间延长,加药组Runx-2蛋白表达量有所下降, OCN蛋白表达量逐渐增多,与对照组差距加大;OSX的蛋白表达量虽高于对照组,但无统计学差异。结论 ICSII可促进dAMSCs的增殖及成骨分化。     

淫羊藿素对 SD 大鼠骨髓基质细胞增殖与成骨分化的影响

目的：研究淫羊藿素（ICT）对体外培养 SD 大鼠骨髓基质细胞（rBMSCs）增殖与成骨分化的影响。方法：体外分离培养 rBMSCs,传代至第4代作多向分化鉴定。分别以10－9、10－8、10－7、10－6、10－5 mol／L ICT 刺激 rBMSCs 后3、6、9 d,分别用 cck-8及碱性磷酸酶 ALP 试剂盒检测 rBMSCs 的增殖及 ALP 活性;10－9 mol／L ICT 处理 rBMSCs 后21 d 作茜素红（AR）染色以判断钙结节的形成。结果：原代培养的 rBMSCs 贴壁生长、呈梭形,能多向分化;ICT 明显抑制了 rBMSCs 的增殖;但增高其 ALP 活性、钙结节形成。结论：ICT 以剂量依赖方式抑制 rBMSCs 的增殖但促进其分化和矿化。     

个别正常成人上前牙美学区唇、腭侧骨板厚度测量分析

目的:测量分析国人个别正常成人上前牙美学区唇、腭侧骨板厚度,为口腔种植手术,尤其是即刻种植的术前分析、方案制定提供数据支持,并为构建数据库奠定基础。方法:应用KaVo 3D eXam CBCT机对符合纳入标准的60例受试者进行锥形束CT(CBCT)扫描,所得Dicom格式三维重建数据导入InVivo 5软件,测量垂直于牙体长轴L3、L6、L9、L12水平处相应唇、腭侧骨板厚度,所得数据应用SPSS 18.0软件包进行95%参考值范围、频率、配对样本t检验、独立样本t检验、方差分析及多重比较。结果 :在各牙位各参考线水平,唇侧骨板厚度均较腭侧薄(P<0.05),唇侧骨板较多出现小于1 mm及骨板缺如的情况(40.6%~93.1%),腭侧骨板厚度普遍大于2 mm(L6及以上水平:60%~100%);左右同名牙、同牙位唇腭侧、性别、年龄段、同参考线不同牙位、同牙位不同参考线间骨板厚度存在差异。结论:上前牙区种植时常存在骨量不足情况,以侧切牙处尤为明显;唇侧骨板厚度较腭侧更薄,且常存在凹陷。种植手术时应在CBCT指导下,适当偏腭侧植入,必要时应用自体骨移植以及骨替代材料、骨劈开、骨增量技术,保证唇侧骨壁的完整性及足够的骨板厚度。     

富血小板纤维蛋白治疗Ⅱ度根分叉病变的效果评价

目的: 观察富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin, PRF）联合Bio-oss治疗Ⅱ度根分叉病变的临床效果。方法: 选取临床Ⅱ度根分叉病变的下颌第一磨牙患者30 例,经过牙周基础治疗后,随机分为实验组和对照组（各15例）。实验组采用引导牙周组织再生术,术中PRF联合Bio-oss植入骨缺损区并覆盖PRF 膜;对照组仅采用单纯牙周翻瓣术。术后6个月回访,通过临床牙周指数检查及锥形束CT（CBCT）检查评价临床疗效。采用SPSS2.0软件包进行统计学分析。结果: 2组患者术后牙周探诊深度（probing depth,PD）、临床附着丧失（clinical attachment loss,CAL）、根分叉水平探入深度（horizontal probing depth,HPD）均较术前显著改善（P<0.05）,且2组间差异具有统计学意义（P<0.05）;实验组术后根分叉区骨增量与对照组之间有显著差异（P<0.05）。结论: PRF联合Bio-oss明显促进牙周Ⅱ度根分叉病变区成骨,改善牙周状况,临床效果显著。     

烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21对实验性结肠炎的影响

目的：通过建立葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium, DSS）诱导的鼠结肠炎模型,探讨alpha7烟碱型乙酰胆碱受体（alpha7 nicotinic acetylcholine receptor, α7nAChR）激动剂GTS-21是否可改善模型鼠结肠炎症及其可能机制。方法：8 -10 周龄 SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照（CON）组、DSS模型组、GTS-21治疗组,共3组（每组8只）。DSS模型组采用自由饮用含3.5％DSS水造模,治疗组自由饮用3.5%DSS水,同时给予GTS-21（10mg/kg/d,ip）,共7天,对照组予生理盐水,每天予各组鼠DAI评分。第8天处死小鼠,观察结肠黏膜组织大体改变并测其长度、湿重,HE染色后行肠组织学炎症（HI）评分;细胞因子芯片筛选变化的细胞因子;ELISA法进一步检测芯片筛选出的变化明显的细胞因子。结果：1. DSS组鼠结肠长度变短（8.22 ± 0.37 cm vs 11.65 ±0.30 cm, n=8, P<0.001）,DAI评分较正常组增高(1.509±0.1014 vs 0, n=8, P<0.001),HI评分升高（20.5 ± 3.9 vs 0.9 ± 0.4, n=8, P<0.001）,表明造模成功;2. 给予烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21的DSS模型鼠, DAI评分下降（0.25 ±0.10 vs 1.51 ±0.10, n=8, P<0.001）;结肠长度较DSS组改善（9.42 ± 0.32 cm vs 8.22 ± 0.37 cm, n=8, P<0.05）;HI评分减低（7.5 ± 2.0 vs 20.5 ± 3.9, n=8, P<0.01）,提示GTS-21能改善DSS诱导的鼠结肠炎症;3.细胞因子芯片筛选实验结果表明,DSS组γ干扰素诱导单核细胞因子（monokine induced by IFN-γ, CXCL9/Mig）升高最明显,此外肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）,白细胞介素1β（interleukin 1β, IL-1β）,γ-干扰素（interferon γ, IFN-γ）也明显升高;4. 进一步ELISA检测芯片变化最明显的CXCL9/Mig,发现DSS组鼠血清CXCL9/Mig明显升高（P<0.05）,给予GTS-21后,血清CXCL9/Mig降低（P<0.05）。结论：GTS-21能减轻实验结肠炎鼠肠道炎症,该作用可能与减低趋化因子CXCL9/Mig水平,进而减少炎症细胞的肠道聚集有关。 [关键词] DSS诱导结肠炎;alpha7烟碱型乙酰胆碱受体;GTS-21;CXCL9/Mig     

烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21对鼠实验性结肠炎的影响

目的：通过建立葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的鼠结肠炎模型,探讨alpha7烟碱型乙酰胆碱受体(alpha7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR)激动剂GTS-21改善模型鼠结肠炎症的效果及可能机制。方法：8～10 周龄 SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照(CON)组、DSS模型组、GTS-21治疗组(每组8只)。DSS模型组采用自由饮用含3.5％DSS水造模,治疗组自由饮用3.5%DSS水,同时给予GTS-21［10 mg/(kg·d),腹腔注射］,共7 d,对照组予生理盐水,每天予各组鼠疾病活动性评分(DAI评分)。第8天处死小鼠,观察结肠黏膜组织大体改变并测其长度、湿重,HE染色后行肠组织学炎症(HI)评分;细胞因子芯片筛选变化的细胞因子;ELISA法进一步检测芯片筛选出的变化明显的细胞因子。结果：①DSS组鼠结肠长度变短［(8.22± 0.37)cm vs.(11.65±0.30)cm,n=8,P＜0.001］,DAI评分较正常组增高［(1.51±0.10)分 vs.0分,n=8,P＜0.001］,HI评分升高［(20.5± 3.9)分 vs.(0.9± 0.4)分,n=8,P＜0.001］,表明造模成功;②给予烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21的DSS模型鼠,DAI评分下降［(0.25±0.10)分 vs.(1.51±0.10)分,n=8,P＜0.001］;结肠长度较DSS组改善［(9.42± 0.32)cm vs.(8.22± 0.37)cm,n=8,P＜0.05］;HI评分减低［(7.5± 2.0)分 vs(20.5± 3.9)分,n=8,P＜0.01］,提示GTS-21能改善DSS诱导的鼠结肠炎症;③细胞因子芯片筛选实验结果表明,DSS组γ干扰素诱导单核细胞因子(monokine induced by IFN-γ,CXCL9/Mig)升高最明显,此外肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、γ-干扰素(interferon γ,IFN-γ)也明显升高;④进一步ELISA检测芯片变化最明显的CXCL9/Mig,发现DSS组鼠血清CXCL9/Mig明显升高(P＜0.05),给予GTS-21后,血清CXCL9/Mig降低(P＜0.05)。结论：GTS-21能减轻实验结肠炎鼠肠道炎症,该作用可能与减低趋化因子CXCL9/Mig水平,进而减少炎症细胞的肠道聚集有关。     

牙支持式数字化导板在牙种植中的临床应用效果

目的 :评估使用牙支持式数字化外科导板引导进行上颌、下颌、前牙、后牙区种植的精准度。方法 :术前经过锥形束CT(CBCT)获得缺牙区颌骨数据信息,扫描上下颌石膏模型获得颌骨数字化模型。采用种植设计软件完成导板的设计,通过快速成型技术完成种植手术导板的制作。在导板引导下完成种植手术。术后拍摄CBCT,将该CBCT数据导入种植设计软件,与术前种植设计数据进行整合后测量种植体位置与术后实际位置的差异。结果:上颌、下颌、前牙、后牙区1～2颗牙缺失患者共29例,植入种植体共45枚。与种植体术前设计植入位置比较,种植体实际植入位置颈部的平均差距为(0.235±0.208)mm;尖端的平均差距(0.55±0.183) mm,深度的平均差距为(0.59±0.070) mm,角度平均差距为(2.48±0.378)°。其中,前牙的植入误差大于后牙。长度超过10 mm的种植体的位置偏差显著高于长度小于10 mm的植体。即刻种植与延期种植无显著差异。结论:牙支持式数字化外科导板引导下的种植具备良好的精准度,特别适合应用于即刻种植。同时在增加种植体的长度时应特别注意控制导板的精准度。     

PCPA对于外周血CD4~+T细胞Th1/Th2分化失衡影响的初步研究

目的研究PCPA暴露对于外周血CD4+T细胞向Th1/Th2分化的影响及其分子机制。方法分离并培养人外周血CD4+T细胞。采用MTT、流式细胞术、QRT-PCR和酶联免疫吸附试验法(ELISA)对PCPA组和对照组细胞中Th1、Th2亚型的代表细胞因子IFN-γ、IL-4进行检测。结果 PHA刺激48 h后,ELISA检测细胞培养上清显示,PCPA组上清中IFN-γ分泌水平明显高于对照组(P<0.05),而IL-4分泌量较对照组略有增加;RT-PCR检测显示,PCPA组IFN-γ基因表达高于对照组1.69倍,IL-4基因表达没有显著改变;流式细胞技术对胞内因子检测显示,PCPA组IFN-γ+T细胞比例(46.1%)明显高于对照组(32.6%),2组间有统计学意义(P<0.05),而IL-4+T细胞比例与对照组无显著变化(48.1%和46.5%)。PCPA组的IFN-γ+T细胞与IL-4+T细胞比值是对照组的1.53倍。结论 PCPA暴露(40μmol/L)导致CD4+T细胞LSD1的H3K4(2m)脱甲基化酶活性被抑制,引起Th1/Th2分化平衡向Th1方向的"漂移"。