miR-375调控PDGFC基因表达抑制肝癌血管生成

  目的  miR-375已被证明能够抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进肝癌细胞凋亡,本研究旨在探索miR-375对肝癌新生血管生成的影响及其分子机制。  方法  利用血管生成相关的功能实验探索miR-375对肝癌新生血管生成的影响;使用生物信息学方法预测miR-375潜在的与血管生成相关的功能靶基因;在肝癌细胞系中过表达和下调表达miR-375,验证miR-375对靶基因的调控作用,并利用双荧光素酶报告实验明确其分子机制;靶基因功能挽救实验明确miR-375通过调控靶基因的表达发挥抑制肝癌新生血管生成的作用。  结果  miR-375能够抑制肝癌新生血管生成;血小板源性生长因子C（PDGFC）是miR-375的潜在功能靶基因;miR-375能够直接作用于PDGFC基因mRNA 3'-非编码端（3'-UTR）而抑制PDGFC基因表达;miR-375能够通过抑制PDGFC基因表达抑制肝癌新生血管生成。  结论  miR-375能够调控PDGFC基因表达抑制肝癌新生血管生成。      

过表达Beclin1可促进黑色素瘤A375细胞的自噬并抑制其上皮间质转化

目的 探讨Beclin1的过表达对黑色素瘤A375细胞自噬及EMT过程的影响。方法 采用脂质体转染法将人恶性黑色素瘤细胞A375分为3组,分别为空白组(只转染试剂,无质粒)、NC组(转染空质粒)、转染组(转染携带Beclin1质粒),3组细胞分别接种于3组裸鼠皮下,观察成瘤后21 d各组移植瘤的生长情况。采用RT-PCR和Western blotting分别检测各组肿瘤组织中Beclin1、LC3Ⅱ、Vimentin、N-cadherin和E-cadheirn mRNA及蛋白表达水平。结果 3组接种A375细胞的裸鼠成瘤率100%,转染组肿瘤生长速度低于空白组和NC组,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,空白组与NC组比较,各基因mRNA的表达无明显差异(P>0.05);相对于空白组与NC组,转染组Beclin1、LC3Ⅱ和E-cadherin的mRNA表达均升高,Vimentin和N-cadherin的mRNA表达均降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。Western blotting结果显示,空白组与NC组比较,各基因蛋白的表达无明显差...     

胸段食管鳞癌术后复发模式及术后放疗靶区的研究北大核心

目的:研究胸段食管鳞癌术后复发模式,为术后放疗靶区勾画提供参考。方法:回顾分析我院2012年7月至2017年5月收治术后复发的81例胸段食管鳞癌患者的临床资料,参照AJCC第八版食管癌分期,将第1-8M站定义为上中纵隔淋巴结区,8Lo、9、15站定义为下纵隔淋巴结区,16-20站定义为上腹部淋巴结区。标记患者的复发部位,并分析局部复发、区域复发和远处转移的模式。结果:中位复发时间为12个月(2~103个月)。6例(7.4%)患者发生单纯局部复发,64例(79.0%)患者发生区域复发,11例(13.6%)患者发生远处转移。区域淋巴结复发中最高危的复发区域为上中纵隔淋巴引流区,此区域包含了82.8%的复发淋巴结,其次为上腹部淋巴结引流区(13.6%)。11例患者发生上腹部淋巴结复发,其中10(90.9%)例为胸下段,7例(63.6%)患者术后分期≥Ⅲ_(b)期。结论:胸段食管鳞癌术后复发模式以区域淋巴结复发为主,上中纵隔淋巴引流区为最高危复发区域,术后放疗靶区应重点包含。对于术后分期较晚的胸下段食管鳞癌,上腹部淋巴结引流区可能需要涵盖在放疗靶区内。吻合口、瘤床和下纵隔复发风险低,可不必常规涵盖在放疗靶区内。     

过表达INPP4B对人急性髓系白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响及其潜在机制

目的：探讨二型磷脂酰肌醇4磷酸酶（inositol polyphosphate 4-phosphatase type Ⅱ,INPP4B）对人急性髓系白血病THP-1细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法：将携带INPP4B的重组质粒载体pEAK-Flag/INPP4B转染人THP-1细胞系（Flag-INPP4B组）,同时设立未处理组为对照（Mock组）。采用qRT-PCR和Western blot分别检测实验组和对照组细胞INPP4B mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8实验检测细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2（Bcl-2-associated X/B-cell lymphoma-2,Bax/Bcl-2）以及磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide-3 kinase,PI3K）下游信号分子蛋白激酶B（protein kinase B,PKB/AKT）和血清糖皮质激素调节激酶-3（serum and glucocorticoid regulated kinase-3,SGK3）蛋白的磷酸化水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞内PI（3,4）P2和PI（3）P的水平。结果：INPP4B重组质粒载体转染THP-1细胞后,INPP4B的mRNA和蛋白水平均明显上升（mRNA：t=9.724,P=0.000;蛋白：t=19.520,P=0.000）,提示在THP-1细胞中成功过表达INPP4B。与Mock组相比,Flag-INPP4B组细胞体外增殖能力明显增强（F=31.870,P=0.000）。同时,过表达INPP4B可明显降低细胞凋亡率（t=6.999,P=0.002）;使促凋亡蛋白Bax的表达水平下降（t=24.710,P=0.000）、抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平增加（t=6.398,P=0.003）。此外,过表达INPP4B可增强THP-1细胞SGK3蛋白的磷酸化水平（t=10.470,P=0.000）,而对AKT蛋白的磷酸化水平无明显影响（t=0.285,P=0.790）。最后,过表达INPP4B还可明显降低THP-1细胞中PI（3,4）P2的水平（t=4.515,P=0.011）,同时明显升高PI（3）P的水平（t=5.681,P=0.005）。结论：本研究结果表明过表达INPP4B可促进人急性髓系白血病THP-1细胞的体外增殖并抵抗凋亡,其机制可能与INPP4B介导激活PI3K/SGK3信号通路有关,这提示INPP4B可作为急性髓系白血病治疗的一个潜在靶点。     

噻托溴铵治疗中重度支气管哮喘30例临床观察

目的:探讨噻托溴铵在中重度支气管哮喘治疗中的意义。方法:将60例中重度支气管哮喘患者随机分为观察组和对照组,两组患者均依据2009 GINA规范治疗3个月,其中观察组每天增加吸入一次噻托溴铵18μg。比较两组患者治疗前后性别、年龄、病程、哮喘控制测试(ACT)评分、血清免疫球蛋白E(IgE)、嗜酸细胞计数(EOS)、吸入支气管扩张剂后一秒钟用力呼气量(FEV1)、用力呼气中期流速(FEF25%~75%)值、用力呼气峰速(PEF)及每周急救药使用次数等指标变化并进行统计学分析。结果:①两组间患者性别、年龄、病程、治疗前各指标差异无统计学意义(P0.05)。②治疗后两组各指标与治疗前比较,差异有统计学意义(P0.01)。③治疗后,观察组的ACT评分、FEV1、PEF、FEF及每周急救药使用喷数与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。治疗后观察组EOS、IgE与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:噻托溴铵治疗中重度支气管哮喘有效,且以扩张气道、改善症状和肺功能为主,其是否有非特异性抗炎作用还需进一步研究论证。     

强化他汀类药物治疗对急性冠脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗后炎症-凝血网络的影响

目的通过观察不同剂量阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗后炎性因子及凝血系统的影响,深入探讨阿托伐他汀在ACS二级预防中的作用。方法入选2015年1月至2017年1月于北京市海淀医院行PCI治疗的ACS患者380例,随机分为常规治疗组120例(阿托伐他汀术前20 mg/d,术后10 mg/d)、中剂量组120例(阿托伐他汀术前40 mg/d,后20 mg/d)及高剂量组140例(阿托伐他汀术前80 mg/d,术后40 mg/d),另外入选同期50例行冠状动脉造影术正常者作对照组,观察治疗前、治疗后1个月和3个月患者血脂浓度、血清炎症因子如阿托伐他汀超敏C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及凝血指标组织因子(tissue factor,TF)、组织因子途径抑制物(tissuefactor pathway inhibitor,TFPI)浓度。临床随访6个月记录并比较不良反应发生率及主要不良心血管事件(ma-jor adverse cardiovascular events,MACE)发生率。结果治疗前3组ACS患者炎症因子hs-CRP、TNF-α、IL-6及凝血因子TF浓度均高于正常对照组,而TPIF浓度明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);治疗1个月后,高剂量组炎症因子及TF较治疗前均明显降低,凝血因子TFPI浓度较治疗前升高,中剂量组仅hs-CRP浓度降低,差异有统计学意义(P均0.05);治疗3个月后,中、高剂量组炎症因子水平及TF浓度均明显降低,TFPI浓度则显著升高,差异有统计学意义(P0.05和P0.01)。治疗1个月、3个月后3组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P0.05);而高剂量组MACE发生率均明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论强化他汀治疗能够显著降低血浆炎症因子浓度,升高凝血因子TFPI浓度,降低MACE发生率,且不增加不良反应发生。     

调动护士积极性实践优质护理服务

为适应新时代护理发展的要求,顺应现代护理服务的发展,各级医院纷纷推进开展了优质护理。要达到优质护理服务水准,调动护士的积极性是必要条件。只有广大护士积极全身心投入到护理工作中,才能为病人提供优质护理服务。     

正常椎间盘纤维环的MR扩散张量成像及病理对照研究

目的:评价扩散张量成像显示正常椎间盘纤维环的能力.方法:对15例健康志愿者的L3～S1椎间盘和1例新鲜尸体椎间盘离体标本分别行DTI扫描,图像在工作站后处理成纤维环示踪图(FT图)和DCavg图、FA图.观察FT图上纤维环的形态和完整性并与病理相对照,测量正常纤维环和髓核的DCavg值和FA值.结果:所有被检椎间盘均可得到椎间盘纤维环的DCavg图,FA图和FT图.正常纤维环在DCavg图和FA图上呈一DCavg值和FA值连续均匀的环形,FT图示纤维环呈连续完整的环形结构,其纤维板层走行与病理观察一致.正常纤维环的DCavg值比髓核低,而FA值则较髓核高.结论:扩散张量成像能够无创地显示椎间盘纤维环的形态,评价其完整性,为在活体内显示纤维环是否断裂提供了一种新的影像学诊断方法.     

MIG(CXCL9)表达载体构建及体外活性鉴定

目的构建MIG（CXCL9）真核表达载体,为利用MIG研究肿瘤基因治疗奠定基础。方法从pBLAST-MIG上切下含MIG全长的cDNA序列,定向插入pORF-mcs真核表达质粒,构建pORF-MIG重组质粒;然后经酶切分析和测序鉴定后,通过脂质体介导转染COS-7细胞;再进一步用免疫印迹法鉴定重组质粒的表达活性,用趋化试验鉴定生物学活性。结果pORF-MIG重组质粒经酶切分析和测序证实含有MIG的全长cDNA序列,转染COS-7细胞后高效表达MIG蛋白,对活化的淋巴细胞有趋化作用。结论成功构建了MIG（CXCL9）真核表达质粒,为进一步利用pORF-MIG研究恶性肿瘤基因治疗奠定基础。     

PET/CT对NSCLC临床分期的作用及其对NSCLC精确放疗的影响

目的探讨PET/CT对非小细胞肺癌临床分期及靶区勾画的影响。方法选取2012年3月至2013年3月成都军区总医院收治的非小细胞肺癌患者100例作为研究对象,分别采用PET/CT和普通CT对患者进行检查并对其靶区进行勾画,确定其临床分期及各项计划参数,并比较两种方法对非小细胞肺癌患者精确放疗计划的影响。结果与CT检查结果比较,PET/CT组1a、1b、2a、2b期人数稍少于CT组,3a、3b期的人数稍多于CT组,但各个病期百分比比较差异无统计学意义(P>0.05),将CT检查结果作为标准比较,PET/CT检查后临床分期改变者10例,达10%,均为分期升高。PET/CT检测NSCLC的灵敏度为93.7%,准确度为93.0%。PET/CT检查所测得的VGTV、V20、MLD三项指标均显著低于单纯CT(t=7.385、2.304、36.472,P<0.05),Ds比较差异无统计学意义(t=0.730,P>0.05)。结论 PET/CT较CT对非小细胞肺癌的检测更为准确,其对于靶区的勾画更为准确,可减少放疗对正常肺组织损伤,较好的起到保护作用,同时避免放射性肺炎的发生。