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目的:通过shRNA降低Livin基因的表达,研究口腔癌细胞Cal27对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)敏感性的改变,并探索其可能的机制,为口腔癌化疗耐受的靶向治疗提供新的治疗思路。方法:设计针对Livin基因的shRNA序列,构建慢病毒shRNA表达载体,包装慢病毒颗粒并感染Cal27细胞,获得稳定沉默Livin基因的细胞株,使用20、40、60μmmol/L的5-FU处理Livin沉默细胞和对照细胞24 h,通过流式细胞术测定细胞凋亡率,MTT法检测细胞活力。结果:成功构建了针对Livin的shRNA质粒,并将其包装为慢病毒;降低Livin的表达水平后,Cal27细胞对5-FU的敏感性上升,凋亡率提高,细胞活力下降,Caspase 3表达量增高(均P<0.05)。结论:通过慢病毒介导的shRNA降低了Cal27细胞Livin基因的表达,增加了Cal27对5-FU的敏感性,其机制与Livin对Caspase 3的抑制效果有关,这为口腔癌化疗耐受问题提供了新的治疗靶点。 相似文献
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