MOLECULAR CLONING OF hTRT CATALYTIC DOMAIN FROM HeLa CELLS AND ITS EXPRESSION IN E. Coli AND PURIFICATION

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮ　　Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ,ｔｈｅｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎｅｎｚｙｍｅｔｈａｔｅｌｏｎｇａｔｅｓｔｅｌｏｍｅｒｅｓ,ｉｓｂｅｌｉｅｖｅｄｔｏｐｌａｙｍａｉｎｒｏｌｅｉｎｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇｌｉｆｅ ｓｐａｎｏｆｃｅｌｌｓ Ｔｈｉｓｃｏｎｃｅｒｎｓｃｅｌｌｕｌａｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ,ａｇｉｎｇａｎｄｃａｎｃｅｒｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ(1) Ｒｅｃｅｎｔｌｙ ,ｈｕｍａｎｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｒｅ ｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ(ｈＴＲＴ)ｈａｓｂｅｅｎｉｄｅ…     

睾丸肿瘤组织中端粒酶RNA成分的表达及其意义

端粒酶是维持端粒长度的逆转录酶 ,在大多数正常人体细胞中无端粒酶活性 ,而在干细胞、生殖细胞和 90 %的恶性肿瘤细胞中有端粒酶活性。我们应用核酸原位杂交 (ｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ)技术 ,对睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中人端粒酶ＲＮＡ(ｈＴＲ)基因进行检测 ,旨在从分子水平上对男性睾丸肿瘤基因变异表达产物进行检测分析 ,探索简便、敏感、特异性高的实验方法及基因治疗的新靶点。一、材料与方法1 标本来源 :5 6例睾丸肿瘤石蜡包埋切片标本由同济医科大学附属协和医院、同济医院病理科提供 ,均…     

绘人试验的智商及情绪指征在辅读与普通小学儿童间的对比分析

为了解辅读小学与普通小学儿童的绘人试验在智商及情绪指征方面是否有差异.方法 采用随机等比率整群抽样的方法,对同年龄的辅读与普通小学的儿童各50名进行绘人试验的测查.对比分析了两级所得智商及情绪指征出现的情况.结果 辅读小学儿童在绘人试验中智商低于普通小学的儿童,且情绪指征的出现率明显高于正常儿童组,33项中19项有显著性差异.结论 辅读小学的儿童不仅存在智能的缺陷,而且还普遍存在某些情绪问题,提示我们在对辅读小学儿童进行矫治教育时,不可忽略其情绪问题.     

人端粒酶逆转录酶与c-myc和刺激蛋白1在成釉细胞瘤中的表达

目的　研究原癌基因转录因子c-myc和刺激蛋白1(SP1)在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及与端粒酶逆转 录酶(hTERT)的关系。方法　选取54例AB(原发31例,复发19例,恶变4例)存档蜡块,采用原位杂交检测AB中 c-myc mRNA、hTERTmRNA的表达,采用免疫组化SP法,检测AB中SP1蛋白的表达。结果　c-myc mRNA在AB中 阳性率为81·5%(44/54),hTERTmRNA为94·4%(51/54),SP1为83·3%(45/54);伴随AB的复发与恶变,3者表达强 度上升;相关性分析得出hTERT与c-myc之间存在相关性(rs=0·853,P<0·001),hTERT与SP1之间存在相关 性(rs=0·900,P<0·001)。结论　hTERT在AB中明显增加的活性可能与转录因子c-myc和SP1有关,3者在AB中 的表达趋势与AB的临床生物学特性相关。     

端粒酶hTR和hTERT在人成釉细胞瘤中的表达

目的 探讨端粒酶hTR、hTERT基因表达在人成釉细胞瘤(ameloblastoma，AB)和牙源性角化囊肿(odontognic keratocysty，OKC)中的意义，探讨其在AB、OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法 采用mRNA原位杂交方法对口腔颌骨内54例AB、16例OKC及7例口腔正常粘膜，进行了hTR、hTERT mRNA的检测。结果94．4％(51／54)AB有h1、R、hTERTmRNA的表达，81．2％(13／16)、87．5％(14／16)OKC及2／7和1／7正常口腔粘膜分别有hTR、hTERTmRNA表达，3组相比差异有显著性。hTR与hTERT在AB中表达具有相关一致性。端粒酶表达与AB不同组织学类型、病损发生部位、单房与多房无关，在AB外周细胞及星网状多边形细胞中有表达，有角化退变样细胞及颗粒样细胞缺乏表达。结论 hTR、hTERT活化在AB和OKC的发生、发展中起重要作用，有可能成为判断AB预后的可靠指标。     

低分子量肝素钙在血液透析中的应用研究

目的 :了解低分子量肝素钙在血液透析中的抗凝效果。方法 :60例慢性维持性血液透析患者通过自身对照 ,按不同顺序给予低分子量肝素钙 (LMWH)和普通肝素 (UFH)各 4次作为血液透析抗凝剂 ,观察透析器凝血 ,监测凝血时间 ,凝血酶原时间,部分凝血活酶时间变化 ,穿剌点压迫时间 ,低分子量肝素钙临床副作用。结果 :低分子量肝素钙 (LMWH)与普通肝素 (UFH)相比 ,前者明显减少透析器管路凝血、穿剌部位压迫时间缩短。CT、APTT峰值明显降低 ,且PT与PLT变化不明显。结论 :低分子量肝素钙是一种安全、有效的抗凝剂 ,尤其是有出血倾向的病人。其疗效优于普通肝素。     

人成釉细胞瘤中蛋白激酶C-α表达与端粒酶活性的关系

目的:研究蛋白激酶C-α(PKCα)在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及与端粒酶逆转录酶(hTERT)的关系,探讨其临床生物学意义。方法:用原位杂交和免疫组化SP法分别检测了AB中hTERT mRNA及PKCα蛋白的表达。同时选取牙源性角化囊肿(OKC)16例,正常口腔黏膜7例做对比研究。结果:hTERT mRNA在AB中阳性率为94.4%(51/54),OKC中为87.5%(14/16)及1/7正常口腔黏膜有hTERT mRNA表达,组间差异有显著性(P<0.001)。伴随AB的复发与恶变hTERT的表达逐渐增高。PKCα在AB中阳性表达为85.1%(46/54),OKC中为56.2%(9/16),4/7正常口腔黏膜有PKCα阳性,组间差异有显著性(P<0.01),伴随AB的复发与恶变PKCα阳性表达也随之增高(P<0.05)。hTERT阳性表达与PKCα阳性表达之间经Kendall相关分析rk=1.000,P=0.005呈高度正相关。结论:hTERT与AB的发生发展及临床生物学行为相关,端粒酶活性的释放激活与PKCα的高表达可能正相关。     

无肾脏病冠心病不稳定型心绞痛患者血清胱抑素C水平与高密度脂蛋白胆固醇及脂蛋白水平的相关性

目的探讨无肾脏病冠心病不稳定型心绞痛患者血清胱抑素C(Cys C)水平与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及脂蛋白(a)[Lp(a)]水平的相关性。方法选取2018年1月至2020年1月医院收治的41例无肾脏病冠心病不稳定型心绞痛患者作为试验组,另选取同期于医院进行体检的41名健康志愿者作为对照组。两组均采用免疫比浊法检测血清Cys C水平,采用全自动生化分析仪检测血清HDL-C水平,同时采用乳胶增强免疫透射比浊法检测血清Lp(a)水平,分析血清Cys C水平与HDL-C及Lp(a)水平的相关性。结果试验组血清Cys C及Lp(a)水平均高于对照组,HDL-C水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,血清Cys C水平与HDL-C水平成负相关(r=-0.576,P=0.000),血清Cys C水平与Lp(a)水平成正相关(r=0.722,P=0.000)。结论无肾脏病冠心病不稳定型心绞痛患者血清Cys C水平与HDL-C水平成负相关,与Lp(a)水平成正相关,临床可通过检测血清Cys C、HDL-C及Lp(a)水平有效评估患者病情,为实施对症且有效的治疗方案提供依据。     

对腹腔镜输卵管开窗取胚术、输卵管切除术治疗输卵管妊娠价值比较

目的：对比腹腔镜输卵管开窗取胚术、输卵管切除术在输卵管妊娠中的手术效果。方法：选取2018年1月～2020年1月在本院行腹腔镜术治疗的输卵管妊娠患者86例,依据奇数偶数分组法将患者分成观察组和对照组,各43例。将实施腹腔镜下输卵管切除术治疗的作为对照组,将实施腹腔镜下输卵管开窗取胚术的作为观察组,对比2组手术治疗效果。结果：观察组术中出血量、术后VAS评分、手术时间均低于对照组,P<0.05;2组术后排气时间、HCG恢复正常时间、住院时间相比,P>0.05;观察组术后1年宫内妊娠率为67.14%高于对照组的44.19%,2组再次异位妊娠率、手术成功率比较,P>0.05;观察组治疗后的FSH、LH、E2等性激素水平均高于对照组,P<0.05。结论：相较于腹腔镜下输卵管切除术,采用腹腔镜下输卵管开窗取胚术手术过程更加安全,宫内妊娠率高,再次异位妊娠发生率并未明显增加,值得借鉴。