饥饿环境中活性氧激活人牙周膜细胞自噬的研究

目的:研究饥饿环境下人牙周膜细胞(hPDLCs)的自噬水平变化,探讨活性氧(ROS)在自噬过程中的作用。方法:分离培养hPDLCs, EBSS模拟营养缺乏环境,透射电镜观察自噬小体的产生评估hPDLCs中的自噬水平;抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理抑制ROS的生成,DCFH-DA染色检测ROS水平,RT-qPCR、Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1、p62表达情况,探究饥饿环境下自噬激活的调控机制。结果:经EBSS饥饿培养,hPDLCs自噬激活。NAC通过抑制ROS生成,部分逆转了饥饿的hPDLCs中的自噬水平。结论:ROS作为信号分子介导自噬,饥饿通过诱导ROS生成激活hPDLCs自噬,保护细胞免受营养缺乏的损害。     

正畸牙压力区牙周膜细胞自噬相关蛋白Beclin-1与微管相关蛋白2轻链3的表达

目的 探究正畸牙压力区牙周膜细胞自噬相关蛋白Beclin-1与微管相关蛋白2轻链3（LC3Ⅱ）的表达。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组和9个实验组,实验组正畸加力0.392 N近中移动右上第一磨牙,加力时间分别为15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、12 h、1 d、3 d、7 d,空白对照组不做任何处理。处死大鼠后,行苏木精-伊红（HE）染色观察压力区牙周膜形态学变化、免疫组织化学染色检测Beclin-1与LC3Ⅱ的表达、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色计数破骨细胞。结果 HE染色显示,加力1 d后压力区牙周膜透明样变出现,并随加力时间延长逐渐加重。免疫组织化学染色显示,实验组Beclin-1和LC3Ⅱ表达均上调,1 h达峰值,随后逐渐降低,1 d时再次增强达一小峰值,后又回降,7 d时降低至基线水平。破骨细胞中也可见Beclin-1和LC3Ⅱ的表达。TRAP染色提示,加力1 d后破骨细胞数量开始增加。结论 自噬或许通过介导牙周膜透明样变发生和影响破骨细胞生物学作用参与正畸牙压力区牙周膜改建的过程。