Investigation of the mechanisms of Genkwa Flos hepatotoxicity by a cell metabolomics strategy combined with serum pharmacology in HL-7702 liver cells

1. To investigate Genkwa Flos hepatotoxicity, a cell metabolomics strategy combined with serum pharmacology was performed on human HL-7702 liver cells in this study.

2. Firstly, cell viability and biochemical indicators were determined and the cell morphology was observed to confirm the cell injury and develop a cell hepatotoxicity model. Then, with the help of cell metabolomics based on UPLC-MS, the Genkwa Flos group samples were completely separated from the blank group samples in the score plots and seven upregulated as well as two down-regulated putative biomarkers in the loading plot were identified and confirmed. Besides, two signal molecules and four enzymes involved in biosynthesis pathway of lysophosphatidylcholine and the sphingosine kinase/sphingosine-1-phosphate pathway were determined to investigate the relationship between Genkwa Flos hepatotoxicity and these two classic pathways. Finally, the metabolic pathways related to specific biomarkers and two classic metabolic pathways were analyzed to explain the possible mechanism of Genkwa Flos hepatotoxicity.

3. Based on the results, lipid peroxidation and oxidative stress, phospholipase A₂/lysophosphatidylcholine pathway, the disturbance of sphingosine-1-phosphate metabolic profile centered on sphingosine kinase/sphingosine-1-phosphate pathway and fatty acid metabolism might be critical participators in the progression of liver injury induced by Genkwa Flos.     

白内障围手术期结膜囊菌群分布及药敏试验

目的 分析白内障围手术期结膜囊菌群的分布及药敏试验结果。方法 选取264例白内障患者,分别在患者入院后、手术消毒前、手术消毒后、手术结束后四个时间点取样,进行细菌培养及药敏试验,比较不同时期的细菌培养结果和药敏结果。结果 入院后结膜囊细菌培养阳性率明显高于手术消毒前、手术消毒后及手术结束后;入院后结膜囊细菌培养以表皮葡萄球菌为主;革兰氏阳性球菌对头孢西丁、加替沙星、左氧氟沙星等敏感性较高。结论 表皮葡萄球菌是结膜囊最常见的细菌,术前应常规应用抗生素点眼,聚维酮碘冲洗结膜囊等来预防术后感染性眼内炎。     

肝阳上亢证甲皱微循环观察与分析

以我所统一标准,确诊为“肝阳上亢证”者,进行微循环观察,肝阳上亢证者90例;阴虚阳上亢证者88例,健康对照组48例。观察发现肝阳上亢组与健康对照组及阴虚阳亢组与健康对照组均有显著性差异。通过卡方证明本检测数据可靠,微循环观测可作为“肝阳上亢证”的客观检测指标之一。     

重组人生长激素降解产物的检测分析

本文详细介绍了Ｓ－Ｂ电导率模型确定泥质砂岩储层含水饱和度的基本原理以及相应参数的确定方法。用该方法处理了大庆地区的树１３１井、萨南５丁４－检１３２井及杏９丁３检１３４井的一些层位，并将求得的含水饱和度与岩心分析的含水饱和度进行了对比，吻合得比较好。这说明了应用Ｓ－Ｂ模型确定储层的含水饱和度是可行的，结果比较好。     

清洁手术的围手术期抗菌药物预防使用分析

目的:观察术前 术后未使用抗菌药,仅术前使用抗菌药和术前 术后均使用抗菌药三组病人清洁手术的切口愈合情况.方法:将三组病人术后情况进行统计分析.结果:三组病人切口愈合情况无显著性差异.结论:清洁手术术后一般不需要应用抗菌药物预防切口感染.     

基于肺水肿模型探讨葶苈子升降浮沉药性

目的 基于葶苈子药性沉降，根据“病位在里者宜沉降”的治则，建立病位在里的肺水肿模型，结合病势趋向的改变，验证葶苈子药性“沉降”的科学性，以期初步阐释中药升降浮沉药性的科学内涵。方法 选择60只雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型组（20 mg·kg^-1）、阳性药地塞米松组（0.075 mg·kg^-1）、葶苈子低、中、高剂量（1.167、2.334、4.668 g·kg^-1）组并通过胸膜腔注射1%角叉菜胶（2 mL·kg^-1）建立肺水肿模型，检测肺水肿评价指标（肺剖检、胸腔渗出液量、白细胞数量、肺湿重/干重比、肺含水量及肺通透性），确定葶苈子干预肺水肿的最佳剂量；检测与机体气机调节密切相关的五大系统（中枢系统、呼吸系统、循环系统、消化系统、泌尿系统）相关指标，观察葶苈子干预对肺水肿大鼠病势趋向的改变，确定其升降浮沉之性；并观察各组大鼠苏木素-伊红（HE）染色切片、炎症细胞种类和数目等，初步探究葶苈子改善肺水肿的作用机制。结果 与假手术组比较，胸腔积水量和胸腔积水中白细胞渗出量显著增加（P<0.01），肺湿重/干重比、肺含水量及肺通透性显著升高（P<0.01），并出现咳嗽、喘促、呼吸困难、弓背现象，少量大鼠鼻子湿润，鼻孔出现泡沫状液体等症状，剖检时肺出现体积增大或伴有瘀血，气管处出现大量粉红色泡沫状液体；与模型组比较，葶苈子可减少大鼠胸腔积水量和胸腔积水中白细胞渗出量，降低肺脏器系数、肺湿重/干重及肺含水量，改善肺组织水肿出血等，且以葶苈子中剂量治疗肺水肿效果最佳（P<0.01）；对于呼吸系统，与假手术组比较，模型组大鼠咳嗽潜伏时间、引喘潜伏时间明显减少（P<0.05，P<0.01），咳嗽次数和喘息次数显著增加（P<0.01），与模型组比较，葶苈子低、中、高剂量组均显著增加咳嗽潜伏期、引喘潜伏期，减少咳嗽次数、喘息次数（P<0.01）；对于泌尿系统，与假手术组比较，模型组大鼠显著减少尿量，葶苈子中、高剂量显著增加尿量（P<0.01），低剂量组明显增加尿量（P<0.05），但均对排汗无影响；对于消化系统，与假手术组比较，模型组大鼠胃残留率显著增加（P<0.01），胃排空率、小肠推动率显著下降（P<0.01），胃泌素（GT）明显增加（P<0.05），和模型组比较，葶苈子低剂量组显著增加小肠推动率（P<0.01），中、高剂量组可显著增加胃排空率、小肠推动率（P<0.01），显著减少胃残留率（P<0.01），显著或显著减少GT以促进胃肠运动及胃肠道的运输（P<0.01），增加胃动素（MTL）促进大鼠的胃排空（P<0.05，P<0.01）；对于循环系统，与假手术组比较，大鼠左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、心输出量（CO）显著降低（P<0.01），模型组大鼠的心率有升高趋势，收缩压（SBP）显著升高（P<0.01），舒张压（DBP）明显升高（P<0.05）；与模型组比较，葶苈子低剂量组明显增加LVEF、降低大鼠的DBP（P<0.05），葶苈子中剂量组显著增加LVEF、LVFS、CO和SBP（P<0.01），明显降低大鼠的DBP（P<0.05），葶苈子高剂量组显著增加LVFS（P<0.01），显著降低大鼠的SBP（P<0.01），明显降低大鼠的DBP（P<0.05）；对于中枢系统，与假手术组比较，模型组大鼠站立次数显著降低（P<0.01），葶苈子明显减少大鼠的运动距离、运动时间、站立次数和在旷场中心活动时间，增加静止时间和旷场边缘活动时间（P<0.05，P<0.01）；此外，与假手术组比较，模型组大鼠肺管腔周围的炎症浸润严重，气管增厚、内有水肿液聚集，肺组织破坏严重，血中白细胞计数、中性粒细胞比例显著增加（P<0.01），单核细胞比例明显增加（P<0.05），肺泡灌洗液中γ干扰素（IFN-γ）显著降低（P<0.01），白细胞介素-4（IL-4）明显提高（P<0.05）、免疫球蛋白E（IgE）水平显著升高（P<0.01），肺组织活性氧（ROS）水平显著升高（P<0.01），与模型组比较，葶苈子能减少白细胞计数和中性粒细胞积聚，减少肺小血管充血和肺间质水肿，降低肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-4水平，升高IgE水平，降低肺组织ROS水平（P<0.05，P<0.01）。结论 葶苈子对病位在里的肺水肿模型具有显著改善作用，通过泻水逐饮、调节水液排泄，降泻肺气、调节气机、泻肺气之壅闭，促肺气肃降、调节气机下行，提示葶苈子作用趋势为沉降。其中以葶苈子中剂量作用最佳，其作用机制可能是通过调控中性粒细胞炎症反应来发挥干预作用的。     

一封来自武汉的家书

2020年的春节,一场突如其来的新型冠状病毒肺炎疫情,让整个世界陷入阴霾。在中国,一批批来自全国各地的援鄂医疗队员出征武汉,他们有父母,有子女,有亲人,有战友,但是面对这样一场没有硝烟的战场,他们义无反顾。出征前,每个人都做好了最坏的打算,因为他们只是普通人,并不是超人,也都有被感染的风险。在援鄂的日子里,像这样没有寄出的家书,不下千封,家书里的点点滴滴都承载了他们的真情真意。每个援鄂的"战士"应该都想过,如果自己牺牲了怎么办?这并不是怕,敢上前线的没有一个是怕的,给家里留书一封只是为了留下一分念想,这是爱的真情流露,因为他们不仅爱家人,爱朋友,更爱我们的国家。     

基于C1GALT1/C1GALT1C1通路探讨加味升降散对IgA肾病大鼠Gd-IgA1的影响

目的 通过观察加味升降散对免疫球蛋白（Ig）A肾病大鼠血清及肾组织中微小RNA-148b（miRNA-148b）、白细胞介素-6（IL-6）、核心1β1，3-半乳糖基转移酶（C1GALT1）、分子伴侣Cosmc（core1β3-Gal-T特异性分子伴侣，C1GALT1C1）、半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgA1）表达的影响探讨其可能作用机制，为临床运用加味升降散治疗IgA肾病提供科学依据。方法 将42只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常组8只、造模组34只，将大鼠适应性饲养1周后采用联合牛血清白蛋白（BSA）灌胃+尾静脉注射脂多糖（LPS）+皮下注射四氯化碳（CCl₄）、蓖麻油的免疫复合的方法建立实验性IgA肾病大鼠模型。造模完成后随机选取2只大鼠取材，检测造模是否成功。造模成功后，将造模组大鼠按照随机数字表法分成模型组、中药低剂量（加味升降散，6.27 g·kg^-1）组、中药高剂量（加味升降散，12.54 g·kg^-1）组、贝那普利（10 mg·kg^-1）组各8只，进行药物灌胃，1次/d，治疗4周。于实验第1周末、第9周末、第13周末检测24 h尿蛋白定量（24 h-UTP），第14周各组大鼠麻醉后取材，股动脉取血后离心取上清检测白蛋白（ALB）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检IL-6、Gd-IgA1表达水平变化；苏木素-伊红（HE）/马松（Masson）/碘酸六胺银（PASM）法观察肾组织病理改变；透射电镜观察肾小球超微结构变化；免疫组化法观察IL-6、C1GALT1、C1GALT1C1表达情况；免疫荧光观察肾小球系膜区；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）观察miRNA-148b、IL-6、C1GALT1、C1GALT1C1 mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测IL-6、C1GALT1、C1GALT1C1蛋白水平变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠24 h-UTP、SCr、ALT、IL-6、Gd-IgA1含量水平明显升高（P<0.05），ALB含量水平明显降低（P<0.05）；肾小球系膜细胞增生、系膜区增厚、足细胞足突融合，大量颗粒状IgA免疫复合物沉积于肾小球系膜区；IL-6在系膜区、足细胞表达增强，C1GALT1、C1GALT1C1在系膜区、足细胞表达减弱；IL-6 mRNA、miRNA-148b表达增强（P<0.01），C1GALT1 mRNA、C1GALT1C1 mRNA表达减弱（P<0.01）；IL-6蛋白表达显著增强（P<0.01），C1GALT1、C1GALT1C1蛋白表达显著减弱，差异具有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，加味升降散干预后，24 h-UTP、SCr、ALT、IL-6、Gd-IgA1含量水平显著降低，差异具有统计学意义（P<0.05，P<0.01），ALB含量水平升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；病理损害减轻；基底膜IgA免疫复合物沉积明显减少；IL-6在大鼠肾小球系膜区、足细胞的表达减弱，C1GALT1、C1GALT1C1在系膜区、足细胞表达增强；IL-6 mRNA、miRNA-148b表达减少（P<0.01），C1GALT1 mRNA、C1GALT1C1 mRNA表达增加（P<0.01）；IL-6蛋白表达明显减弱（P<0.05，P<0.01），C1GALT1、C1GALT1C1蛋白表达增强，差异具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；中药组表现出明显的量效趋势。结论 加味升降散可能通过降低IgA肾病大鼠血清及肾组织中miRNA-148b、IL-6表达，使C1GALT1、C1GALT1C1表达恢复，减少Gd-IgA1的生成，从而减轻肾脏病理损害，减少蛋白尿，发挥保护肾脏的作用，达到延缓疾病进展的目的，并且随剂量增加效果增强。