基于中老年MRI腰椎椎基静脉孔的影像解剖学研究

目的 基于中老年腰椎矢状面MRI测量椎基静脉孔(basivertebral foramen,BF)的解剖学参数,为相关手术提供解剖学依据。方法 回顾2018年2月至2022年12月广州中医药大学第一附属医院43例成年患者,共计172例椎体的腰椎矢状面MRI,使用PACS影像系统测量L₁～L₄BF的深(basivertebral foramen depth,BFD)、BF的高(basivertebral foramen height,BFH)、椎体宽(vertebra width,VW)、椎基静脉孔上端至上终板距离(the upper end of BF between the upper boundary and the endplate,VH1)以及椎基静脉孔下端至下终板距离(the lower end of BF between the lower boundary and the endplate,VH2),计算BFD与VW的比值BFD/VW以及BFH与椎体高(vertebra height,VH)的比值BFH/VH。结果 在STIR序...     

小鼠髓核细胞体外衰老模型的建立及评价

【摘要】 目的：建立并评价小鼠髓核细胞（nucleus pulposus cells，NPCs）体外衰老模型。方法：取8周龄C57BL/6雄性小鼠，体外分离培养小鼠NPCs，并采用细胞免疫荧光（immunofluorescence，IF）检测NPCs标志蛋白聚集蛋白聚糖（aggrecan）的表达进行细胞鉴定。取不同浓度（0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L、400μmol/L、500μmol/L）的叔丁基过氧化氢（tert-Butyl hydroperoxide，TBHP）干预NPCs，采用CCK8法检测干预2h、4h后的细胞活性，筛选TBHP的最佳干预浓度及时间。应用最佳干预浓度TBHP、最佳干预时间干预P1代NPCs后换成完全培养基继续培养24h、48h、72h，采用衰老相关β半乳糖苷酶染色（senescence-associated β-galactosidase staining，SA-β-gal）检测各时间点的衰老NPCs阳性率，观察不同时间点NPCs的衰老变化。将P2代NPCs分为对照组和模型组，对照组在完全培养基中培养，模型组加入最佳干预浓度TBHP干预最佳时间干预后换成完全培养基培养，采用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，RT-qPCR）检测两组细胞衰老相关基因p53、p21、p16以及Aggrecan、Ⅱ型胶原蛋白（collagen Ⅱ）、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-5，ADAMTS-5）、基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）mRNA表达，免疫印迹法（Western blot，WB）检测Aggrecan、Collagen Ⅱ、MMP-3、MMP-13、p53、p21蛋白表达水平。结果：分离培养的细胞高表达Aggrecan，为NPCs。TBHP最佳干预浓度为100μmol/L，最佳干预时间为4h。在100μmol/L TBHP干预4h后培养24h、48h、72h，NPCs的SA-β-gal染色阳性率均显著性增加（P＜0.05），三个时间点间无统计学差异（P＞0.05），后续模型组加入最佳干预浓度TBHP干预最佳时间干预后换成完全培养基培养24h，对照组培养相同时间。RT-qPCR检测模型组p53、p21、p16、MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5 mRNA表达较对照组显著性升高（P＜0.05），Aggrecan、Collagen Ⅱ mRNA表达较对照组显著性降低（P＜0.05）；WB检测模型组MMP-3、MMP-13、p53、p21蛋白表达较对照组显著性升高（P＜0.05），Aggrecan、Collagen Ⅱ蛋白表达较对照组显著性降低（P＜0.05）。结论：采用TBHP诱导能成功构建小鼠NPCs体外衰老模型，可为椎间盘退行性变的发病机制研究提供良好的研究样本。     

龟板通过抑制炎症反应改善小鼠软骨终板退变

目的 探究龟板是否能够通过抑制炎症反应改善自然衰老小鼠的软骨终板退变。方法 以3月龄小鼠作为年轻对照组，采用自然衰老模型，选取24月龄的小鼠12只，随机分为老年组与龟板组，每组6只。采用苏木素伊红染色及番红O-固绿染色实验明确自然衰老小鼠是否发生软骨终板退变；免疫组化检测IL-1β在各组小鼠软骨终板组织中的表达情况；免疫荧光染色检测Ⅱ型胶原蛋白在各组小鼠软骨终板组织中的表达情况。结果 与年轻对照组相比，老年组小鼠的HE染色表明其出现较为严重的软骨终板组织退变；与老年组相比，龟板组有一定程度的改善。番红O-固绿染色实验表明，与年轻对照组相比，老年组小鼠的软骨终板组织含水量减少；与老年组相比，龟板组小鼠的软骨终板组织胶原含量及含水量增加。组织免疫组化结果表明，老年组小鼠的软骨终板组织中IL-1β表达增加，药物干预后，龟板组小鼠的软骨终板组织中IL-1β表达减少。组织免疫荧光表明，与年轻对照组相比，老年组出现了明显的Ⅱ型胶原蛋白降解；药物干预后，龟板组有效地减少了Ⅱ型胶原蛋白的降解。结论 龟板可以通过抑制IL-1β减轻炎症，减少Ⅱ型胶原蛋白降解，从而改善自然衰老小鼠的软骨终板退变。     

男性原发骨质疏松症骨密度与新型炎症指标的相关性

目的 了解系统性炎症相关指标及其他炎症指标水平与男性原发性骨质疏松症患者骨密度(bone mineral density, BMD)值的相关性。方法 筛选出2021年1月至2022年5月在广州中医药大学第一附属医院符合纳入标准与排除标准的男性患者，共311例。根据诊断标准将患者分为骨质疏松组、骨量减少组以及骨量正常组并进行回顾性研究。结果 骨质疏松组中SII、NLR、MLR以及ESR明显高于骨量正常组，差异有统计学意义(P<0.05)。二元Logistics回归分析发现PLR(P<0.05)与ESR(P<0.05)为男性发生原发性骨质疏松的危险因素。受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线显示PLR曲线下面积为0.658,临界值为189.17;ESR的曲线下面积为0.639,临界值为18.50;多指标联合曲线下面积为0.713。在男性原发性骨质疏松症患者中对不同部位骨密度与炎症指标进行相关性分析，结果表明除MLR与L1～L4 BMD无明显相关性，SII、NLR、PLR、CRP、ESR与L1～L4 BMD呈负相关...