检测胞浆抗原用于急性白血病免疫分型

目的:探讨胞浆抗原在急性白血病免疫分型中的临床意义。方法:用流式细胞仪检测42例初治急性白血病患者胞浆抗原CyCD_3,CyCD_(22),CyCD_(79a)和MPO。结果:T—ALL阳性胞浆抗原主要表达在CyCD_3,阳性率占88.9％。B—ALL阳性胞浆抗原主要表达在CyCD_(79a),AML主要表达CyMPO。结论:CyCD_3和CyCD_(79a),及MPO可分别作为T—ALL,B—ALL和AML系列特异性标志,对正确诊断白血病提供非常有价值的依据。     

重症肝炎免疫治疗与细胞因子、T细胞亚群的调控关系

了解重症肝炎患者经Ｔα１免疫治疗前后外周血中、ｓＩＬ－２Ｒ,ＩＬ－４,ＩＬ－６内毒素及Ｔ细胞亚群的变化。方法采用ＥＬＩＳＡ方法或全成基质偶氮显色法或链菌素亲生物素过氧化酶连接法检测上述指标。结果治疗前各项指标较正常值均有显著变。,后除ｓＩＬ－２Ｒ和ＣＤ＾＋４外,其他指标基本恢复到正常水平。     

粉防己碱对血小板聚集、粘附及血凝的影响

在体外实验中观测到粉防己碱可明显抑制ADP和胶原诱导的大鼠血小板聚集反应。对血小板粘附、血栓形成有明显抑制作用,而对凝血酶凝血时间、血浆凝固时间无明显影响。     

PDX1和BTC共表达的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病的实验研究

目的 观察共表达PDX-1和BTC基因的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)植入1型糖尿病大鼠肾包膜下对糖尿病的治疗作用。方法 分离纯化SD大鼠MSCs,将pTRE2hyg-PDX1,pTRE2hyg-BTC 和pTet-On共同转染MSCs,诱导MSCs分化为胰岛样细胞(pancreatic islet-like cells PILCs),并移植到糖尿病大鼠肾包膜下, 进行血糖、糖耐量实验、胰岛素的监测并作组织学分析。结果 PDX-1和BTC共表达的MSCs置于基础分化培养基7天后,形成分泌胰岛素的PILCs,移植组在移植PILCs后,血糖水平明显降低,体内胰岛素水平明显上升,腹腔糖耐量试验接近正常水平,与假手术组的差异有统计学意义（P<0.05）。移植组大鼠肾组织中检测到胰岛素的分泌。结论 通过基因工程技术可促使MSCs分化为胰岛样细胞,移植PILCs后能够有效改善糖尿病大鼠功能,缓解糖尿病症状,是一种糖尿病基因治疗的新途径。     

胎胰蛋白促进人脂肪来源的间充质干细胞向胰岛素及C-肽阳性细胞的分化及细胞鉴定

目的：利用大鼠胚胎胰腺组织蛋白提取物诱导人脂肪来源的间充质干细胞(hASCs)向胰岛素分泌细胞分化,为临床胰岛移植寻找新的细胞来源。方法：将新生SD大鼠的胚胎胰腺匀浆后提取胎胰蛋白,重建胰腺微环境,诱导hASCs向胰腺方向分化。诱导组为胎胰蛋白培养组,对照组不添加胎胰蛋白,其余培养条件相同,诱导20 d后,荧光定量PCR技术检测2组胰腺发育相关基因的表达水平,ELISA法检测细胞悬液胰岛素水平,荧光免疫组织化学检测细胞C-肽蛋白表达。结果：在胎胰蛋白诱导过程中,hASCs重要标志基因Oct3/4及Nanog的表达持续降低,说明hASCs逐渐失去全能干细胞的特性;在诱导的第6天开始检测到PDX-1和CK-19的表达上调,诱导细胞出现了胰腺方向的分化,12 d开始检测到胰岛素的阳性表达。所获分化细胞基础相分泌胰岛素量为（287.17± 15.67） mIU•L^-1,高糖刺激下为（401.09±28.94 ）mIU•L^-1,二者比较差异有统计学意义（P<0.01）,且均明显高于对照组的（4.85±1.04） mIU•L-1 (P<0.01);免疫荧光检测,诱导组可见C肽阳性细胞,对照组未见C-肽阳性细胞。结论：模拟的微环境可诱导hASCs分化为有功能的胰岛素产生细胞,具有替代胰岛细胞治疗糖尿病的潜在可能性。     

卡铂碳包铁纳米笼壳聚糖微球 在肝癌大鼠模型体内的分布和药动学研究

 目的 观察卡铂碳包铁纳米笼壳聚糖微球 （ carboplatin-Fe@C-loaded chitosan nanoparticles , C - Fe@C-CN ）结合磁场在移植性肝癌大鼠模型体内的靶向分布情况和药动学过程。 方法 建立移植性肝癌大鼠模型 40 只为 A 组, 正中开腹行肝动脉插管,按卡铂 5 mg·kg^-1 体重注入 C-Fe@C-CN 的生理盐水分散液,以肿瘤组织为靶区施加 0.5 T 磁场 30 min 。分别在给药后 0.25 , 0.5 , 1 , 3 , 6 , 12 , 24 和 48 h 各时间点,每组取 5 只大鼠处死,采集血浆、靶区肿瘤、非靶区肝、肾、脾和肺组织标本,石墨炉原子分光光度计测定血浆和组织中卡铂浓度,药物浓度数据用 3P87 药动学程序分析处理,并组织学 观察 C-Fe@C-CN 的在各脏器分布情况。 另 40 只健康大鼠为 B 组,以左肝叶为靶区,给予相同的处理作为对照。 结果 A 组靶区肿瘤组织 <> c _max 是 65.21 μg·g^-1 ,为 B 组靶区肝组织（ 38.47 μg·g^-1 ）的 1.7 倍。 48 h 时 A 组靶区肿瘤组织药物浓度是 7.27 μg·g^-1 ,为 B 组靶区肝组织（ 3.11 μg·g^-1 ）的 2.3 倍。 A 组靶区肿瘤组织 AUC 是 906 mg·h·L^-1 ,为 B 组靶区肝组织（ 421.34 mg·h·L^-1 ）的 2.2 倍。 2 组药动学参数值相近。病理学观察 显示, C-Fe@C-CN 在磁场作用下聚集于肿瘤细胞间隙中,并可栓塞于部分细小动脉。非靶区肝组织内少见 C-Fe@C-CN 的聚集和栓塞的血管。 结论 C-Fe@C-CN 在体内具有长循环和缓释特性,在磁场的引导下对肿瘤组织具有更强的靶向性,成倍提高肿瘤组织中的药物浓度,延长维持时间。     

胰岛干细胞转分化胰岛样细胞与天然胰岛功能的比较

目的:目前在胰腺干细胞体外转分化为胰岛样细胞的转化效率,转分化胰岛样细胞的成熟度,能否代替天然胰岛的功能等问题上存在争议.实验将分离纯化、扩增的大鼠胰腺导管上皮细胞,并诱导分化为胰岛样细胞团,与天然胰岛功能进行比较.方法:实验于2004 07/2005-04在暨南大学第二临床医学院暨深圳市人民医院临床医学研究中心实验室完成.实验选用SD大鼠10只,采用差异性贴学、低血清培养等方法纯化大鼠胰腺导管上皮细胞,以免疫组织化学方法鉴定后,在含exendin-4、角质细胞生长因子、尼克酰胺等细胞因子和葡萄糖的培养基中,将其转分化为胰岛样细胞团.以DTZ染色和胰岛素免疫荧光染色鉴定.分离纯化SD大鼠天然胰岛,对胰岛样细胞团与天然胰岛进行葡萄糖刺激试验,检测培养液上清液中胰岛素和C肽的水平.结果:①免疫组织化学染色显示从大鼠胰腺导管上皮细胞分离纯化的细胞呈CK-19染色阳性,PDX-1染色阴性,表明为胰腺干细胞.诱导4周后,细胞逐渐汇聚成胰岛样细胞团,免疫荧光染色为阳性,证明有胰岛索分泌.②葡萄糖刺激实验显示,在低糖和高糖刺激下,胰岛样细胞团胰岛素的分泌量约为天然胰岛的1/30和1/35,C肽分泌量为天然胰岛的1/32和1/26.结论:目前胰腺干细胞体外转分化为胰岛样细胞的成熟度与天然胰岛仍然存在较大差别,其在功能仅为天然胰岛的1/30～1/35.     

人脑膜瘤VEGF的表达和微血管检测及临床意义

目的探讨人脑膜瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达和微血管数量(MVQ)与肿瘤良恶性程度的关系。方法用免疫组织化学染色方法检测手术切除石蜡包埋的36例脑膜瘤(良性27例,恶性9例)组织中的VEGF蛋白表达情况与MVQ数量,显微镜下观察其阳性细胞数和阳性血管数。结果①良、恶性脑膜瘤组织中均有VEGF和MVQ表达,且主要表达于肿瘤细胞的胞浆和血管内皮细胞胞膜中;良、恶性脑膜瘤VEGF表达的阳性率分别为77.8%、100%,有显著性差异(P<0.05);VEGF表达阳性的MVQ平均值(47.6±8.5)高于阴性组(24.3±7.9),差异有统计学意义(P <0.01)。②VEGF的表达与MVQ值相关(r =0.75,P <0.01)。结论VEGF在脑膜瘤血管生成中起重要作用,能促进脑膜瘤血管的形成;VEGF和MVQ与脑膜瘤良、恶性程度明显相关,可作为脑膜瘤病理诊断的补充指标之一,并为脑膜瘤的基因治疗提供依据。     

慢性肾功能不全患者血浆肿瘤坏死因子α和可溶性肿瘤坏死因子α受体的 …

观察慢性肾功能不全病人及血液透析前后血浆中ＴＮＦα和ｓＴＮＦαＲ水平的变化及两者的相关性。方法采用ＥＬＩＳＡ方法检测慢性肾功能不全病人及血液透析前后血浆中ＴＮＦα和ｓＴＮＦα水平，并以正常人作为对照。结论ＴＮＦα和ｓＴＮＦαＲ在慢性功能不全主血液析前后的变化可作为观察肾脏发展的重要指标。     

肾小球肾炎治疗的新概念

肾小球肾炎是引起肾功能衰竭的主要病因。长期以来，治疗肾小球肾炎主要方法是应用皮质类固醇激素和免疫抑制剂。经过反复临床证明，这两种药物具有明显毒副作用。随着免疫学、生物化学和分子生物学进展，使人们对肾小球肾炎发病机制和病变过程有了更深入的了解，从而为寻...