无创通气对AECOPD患者的临床疗效及对TNF-α、CRP影响

目的探讨无创机械通气对慢性阻塞性肺疾病急性加重患者TNF-α和CRP的影响。方法回顾性分析笔者所在医院2009年1月～2011年11月收治的40例慢性阻塞性肺疾病患者的临床资料,按照患者的治疗方式分为观察组及对照组,各20例,两组患者行常规药物治疗,观察组患者加用双水平气道无创正压通气呼吸机治疗,治疗72h后,对两组患者进行TNF-α和CRP测定,比较两种治疗方法对TNF-α和CRP的影响。结果两组患者在经过治疗后TNF-α和CRP均出现明显下降,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后TNF-α和CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论无创机械通气治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重,能改善患者的TNF-α和CRP水平,同时对患者无明显的肺损伤,值得在临床推广。     

IL-22对人气道细胞的作用

目的 探讨IL-22对人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞的生理学作用.方法 用实时定量PCR 检测气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、气道成纤维细胞哮喘血清刺激前后IL-22R1 mRNA表达的变化.不同浓度的IL-22(10 ng/ml,100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道上皮细胞、气道平滑肌细胞和气道成纤维细胞后,用MTT法检测细胞的增殖,用流式细胞技术(FACS)检测细胞的凋亡和坏死.结果 哮喘血清刺激后气道上皮细胞IL-22R1 mRNA表达降至正常对照组的9%,气道平滑肌细胞IL-22R1 mRNA表达升高至正常对照组的345倍,而气道成纤维细胞IL-22R1 mRNA表达无明显变化.高剂量(1 000 ng/ml)的IL-22刺激气道上皮细胞和气道成纤维细胞12、24 h可显著降低细胞增殖(P<0.05,P<0.01).三种不同浓度的IL-22刺激气道上皮细胞24 h后均导致细胞凋亡显著下降(P<0.05),低浓度的IL-22(10 ng/ml)导致细胞坏死增加(P<0.01).不同浓度的IL-22刺激气道平滑肌细胞后,细胞凋亡和坏死无显著性变化.中、高浓度IL-22(100 ng/ml,1 000 ng/ml)刺激气道成纤维细胞后,细胞坏死率显著下降(P<0.05).结论 IL-22在支气管哮喘中对气道上皮的作用具有双重性,并与支气管哮喘的病程相关;而对气道平滑肌细胞的作用则可能与浓度及病程相关.支气管哮喘后续阶段,IL-22对气道成纤维细胞作用轻微.     

Rho激酶信号通路参与ET-1诱导的人气道平滑肌细胞迁移和细胞骨架的变化

目的 研究Rho激酶信号通路在内皮素-1(ET-1)诱导的人气道平滑肌细胞(ASMCs)迁移及细胞骨架变化中的作用.方法 组织块贴壁法培养人ASMCs,改良的Boyden小室检测ASMCs的迁移能力;激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架的变化;Western blotting检测ET-1刺激不同时间后Rho激酶底物肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(MYPT1)的磷酸化水平.结果 ET-1在0.1、1、10、100 nmol/L浓度具有趋化ASMCs的迁移能力,10 nmol/L的ET-1趋化ASMCs迁移的能力最强(与对照组相比,P<0.01).Rho激酶抑制剂Y-27632可浓度依赖性地抑制ET-1趋化的ASMCs跨膜迁移,与ET-1组相比,10μmol/L的Y-27632显著抑制了ASMCs迁移(P<0.01);ET-1(10 nmol/L)刺激后ASMCs细胞骨架和形态改变,伪足生成,应力纤维形成增多,Y-27632可显著抑制ET-1诱导的上述改变;ET-1刺激15、30min后p-MYPT1表达显著增高(与对照组相比,P<0.01),随着刺激时间的延长,p-MYPT1表达下降(P>05).结论 Rho激酶信号通路在ET-1诱导的ASMCs迁移和细胞骨架变化中发挥重要的作用.     

紫草素抑制人气道平滑肌细胞的增殖

目的 研究紫草素对体外培养的人气道平滑肌细胞(HASMCs)增殖的影响.方法 组织块贴壁法原代培养传至4～8代的HASMCs,经40、20、10、5、2、1、0.5 ?mol/L及0 ?mol/L(对照组)的紫草素分别作用12、24、48 h后,应用MTS法测定紫草素对HASMCs的细胞增殖的影响;经40、20、10、5 ?mol/L及0 ?mol／L(对照组)的紫草素分别作用24 h后,应用流式细胞术分析紫草素对细胞周期的影响;经20 ?mol/L及0 ?mol/L(对照组)的紫草素分别作用24 h后,应用SP免疫细胞化学法检测紫草素对增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.结果 (1)与对照组相比,20 ?mol/L和40 ?mol/L的紫草素均可有效抑制细胞增殖(均P<0.05),以48 h最为显著(抑制率分别为30.1％与42.9％),但两者之间无显著性差异(P0.05).(2)20 ?mol/L及40 ?mol/L的紫草素均可显著提高G0/G1期比例(P<0.05),阻滞细胞周期进程,但两者之间无显著性差异(P0.05).(3)20 ?mol/L的紫草素可显著下调PCNA的表达(P<0.01).结论 紫草素对HASMCs具有明确的抗增殖作用.     

罗格列酮对PDGF-BB刺激的人气道平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨罗格列酮对血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）刺激的人气道平滑肌细胞（HASMCs）增殖的影响。方法组织块贴壁法培养HASMCs鉴定后，接种于96孔板，除空白对照组外，A、B、C、D组各孔在加入PDGF-BB前30min分别加入0、1、5、10μmol／L罗格列酮。MTS／PMS微量比色法检测各组HASMCs细胞A490吸光度，流式细胞仪检测细胞周期分布。结果A组A490值高于空白对照组，B、C、D各组均高于A组（P均〈0．05）；与空白对照比较，单加入PDGF-BB后G0／G1期细胞比率降低，S期升高；用1、5、10μmol／L罗格列酮预处理的ASMCs在G0／G1期细胞比率逐渐升高，S期逐渐降低（P均〈0．05）。结论罗格列酮呈剂量依赖性抑制PDGF-BB刺激的HASMCs增殖。     

巨噬细胞移动抑制因子经Rho激酶途径促进人胚肺成纤维细胞表型转化

 目的：观察重组巨噬细胞移动抑制因子（rMIF）对人胚肺成纤维细胞（MRC-5）表型转换的作用,探讨哮喘气道重塑的发生机制。方法：不同浓度的rMIF (25~100 μg/L)分别作用于MRC-5细胞24 h或48 h,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）  mRNA表达,Western blotting检测α-SMA蛋白合成;100 μg/L rMIF刺激MRC-5细胞48 h,刺激前0.5 h加入Rho拮抗剂Y27632,RT-PCR法检测α-SMA mRNA表达,Western blotting法检测α-SMA表达;100 μg/L rMIF分别刺激MRC-5 6 h、12 h、24 h或48 h,Western blotting检测磷酸化肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1（p-MYP1）蛋白合成。结果：刺激MRC-5 24 h,不同浓度的rMIF对α-SMA mRNA转录未见显著影响（P>0.05）。刺激MRC-5细胞48 h,rMIF可呈剂量依赖地促进α-SMA mRNA （r=0.697,P<0.01）和蛋白（r=0.957,P<0.01）表达。Y27632预刺激后,显著抑制rMIF100 μg/L促进α-SMA mRNA和蛋白表达的作用（均P<0.01）。rMIF刺激6 h后,p-MYPT1表达显著增加（P<0.01）,12 h达到高峰（P<0.01）,24 h开始下降,但24 h和48 h其水平仍高于对照组（均P<0.01）。结论：rMIF通过Rho信号通路刺激成纤维细胞表型转化,可能在哮喘气道重塑的发病机制中发挥关键作用。     

有创-无创序贯机械通气治疗COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者的疗效观察

目的探讨有创-无创序贯通气治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床疗效。方法选取我院2009年-2011年收治的38例COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者的临床资料,按照患者治疗方式分为观察组(20例)及对照组(18例),两组患者均采取有创机械通气治疗,观察组患者出现肺部感染控制窗后,拔出气管插管,改为面罩无创通气模式,比较两组患者在随访期内临床疗效及血气分析。结果治疗组血气分析结果及临床症状改善优于对照组,两组患者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于应用有创机械通气治疗COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者,出现肺部感染控制窗后应用无创机械通气,能改善患者的临床症状及血气指标,值得在临床推广。     

IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达及其受体IL-22R1在人气道细胞中的表达

\[摘要\]目的检测IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达,检测IL-22R1在人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞中的表达,寻找IL-22作用的靶细胞。方法应用ELISA法检测36例支气管哮喘患者及20例正常对照者血清IL-22及IL-17的表达,同时检测36例患者肺通气功能,根据1秒率(FEV1/FVC)及FEV1占预计值的百分比将支气管哮喘患者分为支气管激发试验阳性组(17例)和支气管舒张试验阳性组(19例)。应用实时定量PCR检测人气道平滑肌细胞、人肺成纤维细胞、人气道上皮细胞IL-22R1 mRNA的表达,用免疫荧光以及蛋白质印迹法检测IL-22R1蛋白在上述3种细胞中的表达。结果支气管哮喘患者血清IL-22及IL-17水平与正常对照组相比差异无统计学意义,但支气管舒张试验阳性组患者血清IL-22和IL-17水平高于支气管激发试验阳性组(P<0.05)。IL-22R1 mRNA及蛋白在上述3种细胞均有表达。结论IL-22可能涉及支气管哮喘的发生发展过程,气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞、人气道上皮细胞可能均是IL-22发挥作用的靶细胞。     

舒利迭吸入对重度阻塞性肺疾病患者血气及肺功能的影响分析

目的探讨舒利迭吸入对重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血气及肺功能的影响。方法将确诊为重度COPD稳定期92例患者随机分为治疗组和对照组各46例。对照组予以常规治疗加盐酸氨溴索片和茶碱缓释片口服;治疗组在对照组治疗基础上加用舒利迭(沙美特罗/丙酸氟替卡松)50μg/250μg吸入,2吸/次,bid。两组患者疗程均为3个月。结果两组患者治疗后的FVC、FEV1及FEV1/FVC均显著优于组内治疗前,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗后,治疗组FVC、FEV1及FEV1/FVC改善优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的PaO2、PaCO2均显著优于组内治疗前,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗后,治疗组PaO2、PaCO2改善优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论舒利迭吸入是治疗重度COPD的一种有效方法,值得推广使用。