一种改良的弹力纤维染色提高肺癌脏胸膜侵犯(VPI)的诊断率

正病理医师清晰解读周围型肺癌与脏层胸膜的弹力纤维关系,准确判读肿瘤是否侵犯脏层胸膜,对制定治疗方案具有重要的指导意义~([1-2]);第7版TNM分类中也说明了肺胸膜侵犯(visceral pleural invasion, VPI)可以作为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)预后不良的因素~([3])。已有文献~([4])报道采用特殊染色法和免疫组化法先后标记弹力纤维和肿瘤细胞,能更好的观察肿瘤细胞与周围胸膜     

FISH检测TOPⅡ在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 利用荧光原位杂交技术检测拓扑异构酶（topoisomerase Ⅱ,TOPⅡ）在乳腺癌组织中的表达情况及相关临床意义.方法 采用荧光原位杂交技术和免疫组织化学方法,对临床资料完整的264例浸润性乳腺癌标本分别进行TOPⅡ基因及TOPⅡ蛋白检测.结果 264例浸润性乳腺癌标本中,TOPⅡ基因表达的阳性率为34％ （91/264）,且与乳腺癌临床分期、HER-2蛋白表达密切相关（P＜0.05）,而与患者年龄、淋巴结转移、肿瘤大小及ER、PR、TOPⅡ蛋白表达（P＞0.05）无关.结论 拓扑异构酶Ⅱ可能与乳腺癌的发生发展密切相关,在乳腺癌的治疗和预后中可能起重要作用.     

荧光实时定量PCR检测肺癌组织表皮生长因子受体基因突变的临床应用价值——附71例分析

目的:建立1种检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变的荧光实时定量PCR的新方法,并探讨应用这种方法检测肺癌组织EGFR基因突变的临床应用价值.方法:通过自行设计探针及引物,应用荧光实时定量PCR方法,检测71例女性非小细胞肺癌患者的肺癌组织中EGFR基因的第19号和第21号外显子上的突变情况,并与直接测序法比较.结果:中国女性非小细胞肺癌的病人中EGFR基因的突变率为30%(21/71);荧光实时定量PCR与直接测序法的特异度符合率是95%(20/21),敏感度符合率是100%,检测时间为直接测序法的1/12,而且结果判读直观.结论:应用荧光实时定量PCR检测肺癌组织中的EGFR基因特定位点的突变是一种快速、可靠的方法,具有较高的临床应用价值.     

MMP9基因单核苷酸多态性与鼻咽癌遗传易感性的关系

目的研究MMP9基因单核苷酸多态性与广东人鼻咽癌患病风险及临床病理分期的关系。方法以聚合酶链反应（PCR）和限制性片段长度多态性（RFLP）分析方法检测433例鼻咽癌患者和437例健康对照MMP9基因C-1562T和第6外显子R279Q基因型。结果吸烟显著增加鼻咽癌的患病风险（OR=4．01,95％CI=2．86—5．63）。MMP9基因C．1562T和R279Q基因型频率病例组与对照组相似,均未能增加鼻咽癌的发病风险,-1562CT／TF基因型相对于cc基因型AdOR=0．99,95％CI=0．70—1．39;279RQ／QQ基因型相对于RR基因型OR=0．96,95％C1=0．70～1．32;而且与吸烟增加鼻咽癌发病风险无交互作用。鼻咽癌病例组中,-1562CT／TT和RQ／QQ基因型并未表现出更高的T分期（经年龄、性别和吸烟校正后的OR值分别为1．23和0．84,P〉0．05）和淋巴结转移潜能（经年龄、性别和吸烟校正后的OR值分别为0．88和0．68,P〉0．05）。结论MMP9基因C-1562T和第6外显子R279Q多态性与广东地区鼻咽癌患病风险无关,可能不是广东人鼻咽癌发病遗传易感因素。     

外泌体通过促进神经轴突再生治疗神经损伤性疾病

目的探索骨髓间充质干细胞外泌体对神经轴突再生的影响规律。方法提取SD大鼠骨髓间充质干细胞并通过细胞形态及流式细胞学进行鉴定,利用超速离心法提取细胞上清液中的外泌体并通过透射电镜、粒径及蛋白免疫印迹法进行鉴定。培养肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞及提取SD大鼠原代神经干细胞。将PC12细胞分为空白对照组、30μg外泌体组及60μg外泌体组。通过荧光标记大鼠外泌体观察靶细胞吞噬情况。采用免疫荧光染色检测PC12细胞及神经干细胞轴突生长情况,通过蛋白免疫印迹法检测细胞神经丝蛋白(NF-200)和生长相关蛋白(GAP-43)的表达水平。结果细胞形态及流式细胞学证实成功提取出大鼠骨髓间充质干细胞,透射电镜、粒径及蛋白免疫印迹法检查证实成功提取出骨髓间充质干细胞外泌体,外泌体可以被神经细胞摄取促进PC12细胞及神经干细胞轴突生长及轴突蛋白表达,并且这一促进作用随着外泌体量的增加而增强,3组PC12细胞及神经干细胞轴突长度及轴突蛋白表达比较差异均有统计学意义(P均<0.001)。结论骨髓间充质干细胞外泌体可通过促进神经轴突再生进而发挥神经损伤修复作用。     

新柏超薄细胞涂片技术的应用体会

新柏液基薄层细胞学技术(thinPrep cytologic test,TCT)是具有革命性的细胞学代表制作技术之一,该技术制作的涂片具有背景清晰、细胞平铺且随机选取的细胞有代表性等优点,与传统方法相比假阴性率减少50%以上.     

DLL4表达水平与浸润性导管癌术后生存率的关系

目的 研究DLL4 (Delta-like 4 Notch Ligand)在乳腺癌中的表达水平及其与临床病理特征及预后的关系。方法 通过芯片技术及免疫组织化学方法回顾性分析102例具有5年以上临床随访资料的乳腺癌病例中DLL4的表达水平。结果 DLL4在乳腺癌组织及癌旁中的表达主要位于肿瘤细胞胞浆内。DLL4在乳腺癌组织中的表达水平与乳腺癌患者的临床分期（P<0.01）、淋巴结转移（P<0.05）及预后( P<0.05)相关。Cox多重回归分析显示DLL4表达量（P<0.05）为乳腺癌的独立预后因素之一。结论 DLL4表达水平与乳腺癌患者预后不良有关,其可能是一种潜在的乳腺癌独立预后指标。     

鼻咽癌组织线粒体DNA突变的研究

[目的]通过检测鼻咽癌组织中线粒体DNA(mitochodrial DNA,mtDNA)部分区域的突变,探讨mtDNA突变在人鼻咽癌发生中的作用.[方法]提取23例鼻咽癌组织及其同一患者外周血白细胞的总DNA,经PCR扩增mtDNA,产物直接测序测定mtDNA序列.[结果]23例鼻咽癌组织中8例(34.8%)发现33个突变,包括点突变27个,插入突变3个,缺失突变3个;这些突变分布于mtDNA序列中,27个mtDNA突变位于D-loop区,其中21个是属于基因库中的多态变化,6个为新发现的突变;另外6个mtDNA突变位于线粒体编码区.[结论]鼻咽癌组织线粒体DNA的D-loop区是一个高度多态性和突变性的区域,mtDNA的突变可能与鼻咽癌的发生有一定的联系,有望成为肿瘤诊断的分子标记.     

miR-21表达异常与乳腺癌临床病理特征及预后的关系

目的： 应用荧光定量PCR技术研究miR-21表达量与乳腺癌临床病理特征及患者预后的关系。方法: 搜集具有5年以上随访资料的乳腺癌病例113例,从甲醛固定、石蜡包埋（FFPE）乳腺癌(BRCA)及其癌旁组织(NATs)中提取总RNA,应用荧光定量RT-PCR技术检测miR-21在乳腺癌及其癌旁组织中的表达量。结果: 与相应癌旁组织比较,miR-21在乳腺癌组织中表达显著上调（P<0.01）,平均上调倍数为1.74 ± 0.48。miR-21表达上调水平与乳腺癌临床分期(P<0.01)、淋巴结转移（P<0.01)及预后［hazard ratio (HR)=5.476, P<0.01］相关。 Cox多重回归分析显示miR-21相对表达量(HR=4.133, P<0.01)为乳腺癌的独立预后因素之一。结论: miR-21表达上调与乳腺癌患者预后不良有关,其可能是一种潜在的乳腺癌独立预后指标。     

联合检测EB病毒相关抗体和抗原对诊断鼻咽癌的价值

背景与目的：近年来随着分子生物学的发展,提供了多项EB病毒（Epstein-Barrvirus）相关的检测指标。本研充通过同时检测EB病毒VCA-IgA、EA、IgA、EBV-特异性DNA酶（EBV-DNase）抗体、EB病毒DNA（EBV-DNA）,评价联合检测对诊断鼻咽癌的价值。方法：收集160例治疗前的鼻咽癌患者和76例健康成人的血清和血浆,应用免疫酶染色法检测血清VCA-IgA、EA-IgA：用正丁酸与巴豆油激发Raji细胞方法检测EBV-DNase抗体：用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timefluoresc,eneequantitativePCR,RQ．PCR）分析血浆EBV-DNA,评什其在诊断鼻咽癌中的价值。结果：单项检测时对鼻咽癌患者诊断的敏感性和特异性分别为：VCA-IgA90．0％、89．5％,EA-IgA75．0％、94．7％,EBV-DNase抗体76．3％、90．8％,EBV-DNA68．8％、88．2％。联合检测的敏感性和特异性分别为98．8％和84．2％。VCA-IgA、EA-IgA阳性率与临床分期无关（P〉0．05）,各临床分期中EBV-DNase抗体阳性率、EBV-DNA水平与阳性率的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：VCA-IgA、EA-IgA、EBV-DNase和EBV-DNA单项检测时VCA-IgA敏感性最高,EA-IgA特异性最好;四项指标联合检测可提高鼻咽癌诊断的敏感性和准确度。EBV-DNase抗体、EBV-DNA有助于评估鼻咽癌病程和协助判断临床分期。