探讨神经组织的讲授方法

<正>每年对学生讲授神经组织时,他们尚未学过神经解剖学.在这种条件下,如何使学生在较短时间内从大体结构→显微结构→超微结构,以至分子水平,清楚认识神经组织的结构及功能,乃是每位讲授教师的艰巨任务.为了改进这一项教学的效果,近几年我们对教学方法,进行了一些尝试,现介绍于下.1.建立局部与整体的关系神经组织组成神经系统,神经系统又分中枢神经系统和周围神经系统,利用图1作简单介绍,神经组织是由神经元及神经胶质细胞组成,神经元的胞体在中枢及神经节内,它们的突起则组成中枢神经系统内的神经通路和神经网络以及遍布全身的神经.这样大局明了之后,讲神经元分类、分布、形态和功     

应用氚胸腺嘧啶核苷标记成年大白鼠创伤大脑皮层追踪其分裂神经细胞的来源

作者从五十年代开始就发现了成年大白鼠大脑皮层当其部分损伤时,在未损伤部位出现神经细胞有丝分裂的现象,从而否定了“高度分化的神经细胞在任何情况下都不能分裂和繁殖”的说法。但分裂的神经元来自何处?是已成熟的神经元受刺激后再分裂,还是大脑中存在某些低分化的成神经细胞在某些因素作用下再繁殖?为了搞清这个问题,作者采用氚胸腺嘧啶核苷标记的方法,在部分切除大脑皮层的动物腹腔内注射氚胸腺嘧啶核苷,术后第四天取脑,按放射自显影的程序制作显微标本。其结     

36 bFGF对大脑皮质中央前区创伤后侧脑室外侧壁的影响

<正>成年雄性大白鼠30只,切除大脑皮质双侧中央前区部分(3×3×1mm).其中15只大鼠术时用海绵胶粒浸入 bFGF 4μg/0.5毫升PBS(PH7.4)半小时后,放入损伤腔内.另15只大鼠用PBC放入损伤腔内.全部术后第四天取材.通过侧脑室(起自胼胝体膝至侧脑室与第三脑室相通止)冠状切取脑块,连续切片20张,一半选染神经丝(NF)抗体,另一半选染胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体.苏木素复染胞核.实验组,NF抗体免疫染色,与大脑皮质损伤区相邻的侧脑室外侧壁与侧脑室上壁交界处的室管膜下层发现细胞增生明显,并见于尾状核背侧紧靠胼胝体处.少数细胞是NF免疫染色阳性,这些细胞是单个存在,胞体呈圆形或卵圆形,直径约在18μm左右,有1个小突起,长约10～16μum.核圆形,中位,核仁明显.对照组未见这类细胞.GFAP免疫染色,部位与上述同,室管膜细胞出现有丝分裂中期,对照组未见有.室管膜下层有较多细胞增生,GFAP免疫染色呈阳性,亦有分裂像出现.对照组也有星形胶质细胞增生,但远不及实验组明显.bFGF有对大脑皮质中央前区损伤腔相邻的侧脑室外侧壁室管膜细胞及其下层的细胞促分裂增生,大量是星形胶质细胞,其中有少数是神经元,这些细胞对中枢神经再生可能会有重要作用,有待进一步研究.     

免疫组织化学法研究大脑皮质创伤后室管膜细胞及其下层的细胞变化

65只成年雄性大鼠,切除大脑皮质顶叶正中部分(4×3×1mm),术后第4d取材。其中10只大鼠用胶质原纤维酸性蛋白抗体,30只用烯醇酶抗体,25只用神经丝抗体,应用免疫组织化学方法显示室管膜细胞和室管膜下层的细胞。位于损伤区邻近的室管膜细胞呈胶质原纤维酸性蛋白免疫染色阳性,在室管膜细胞间可见有伸展细胞,也呈胶质原纤维酸性蛋白阳性,并具有特殊的形态。与损伤区邻近的室管膜下层,细胞出现增生分裂现象,个别细胞的胞体较大,直径约20～24μm,这些大细胞经用烯醇酶抗体和神经丝抗体免疫染色均呈阴性,胶质原纤维酸性蛋白免疫染色则出现强阳性。这些细胞可能是分化较低的星形胶质细胞。     

以神经特异性标记识别成年大白鼠大脑皮层损伤引起的细胞分裂

切除成年大白鼠双侧大脑皮层顶叶正中部分,术后第四天取损防区及附近的大脑组织,用烯醇化酶(NSE)抗体和神经丝(NF)抗体免疫组织化学法显示了分裂神经元的形态。30只大白鼠用NSE免疫染色,有15只发现部分免疫反应阳性细胞有分裂象。25只大白鼠经NF免疫染色,有10只发现部分免疫反应阳性细胞有分裂象。进行分裂的神经元是颗粒细胞及小型和中型的锥体细胞,分布在损伤区边缘100—500 μm范围之内,以皮层的第Ⅲ层出现较多。本文结果提示在大脑皮层损伤条件下损伤区旁神经元出现分裂象,可能是神经元可塑性反应。     

激光对大白鼠受损伤后的大脑皮质的影响(摘要)

<正> 高等动物成年有机体的神经细胞是高度分化的细胞,但在创伤的条件下可以出现神经细胞的有丝分裂,如摘除部分皮质后给予机械刺激(浸入生理盐水的纱布复盖于皮质表面)或滴入异体创伤脑的提取液,都能略微增加神经细胞有丝分裂的数量和延长有丝分裂象出现的时间(徐静1962)。对促进神经细胞分裂的条件的探讨这一项工作还只是刚刚开始。曾有人提出氦氖激光的波长6328埃可穿透组织1.5厘米的深度。激光对切断     

成年大鼠大脑皮质创伤后其分裂神经元的来源——~3H-胸腺嘧啶核苷示踪研究

本文用~3H-胸腺嘧啶核苷标记法,研究了大鼠在部分切除大脑皮质后,所出现的分裂神经细胞的来源。实验用成年大白鼠,切除其双侧顶叶正中部大脑皮质,术后立即腹腔注射~3H-胸腺嘧啶核苷,第4天取大脑组织,Carnoy液固定,连续切片,焦油紫染色。结果表明,大脑皮层部分切除后,在损伤区边缘100～200μm范围内的脑组织中,有2～5％的细胞被标记,即细胞核内有银粒分布。其中巨噬细胞、血管内皮细胞和周细胞居多,胶质细胞和神经细胞次之。被标记的细胞绝大部分是分裂间期,少数处在有丝分裂状态。无论那一类细胞,其间期细胞标记得越多,有丝分裂亦多,反之则少,两者成正比,神经细胞亦不例外。因为分裂中的神经细胞有相当一部分具有典型的锥体细胞形态,由此推测,有丝分裂的神经元可能发生于脑皮质原位,由于损伤产生某些物质,引起已经成熟的神经细胞分裂。     

免疫组织化学和电镜观察成年大鼠大脑皮质损伤后星形胶质细胞的反应

<正>实验用成年SD大鼠15只,经切除双侧大脑皮质顶叶正中部分(3×3×1mm),术后第四天取脑组织,其中10只用于胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫染色,用以标记星形神经胶质细胞的形态结构,其余5只用于电镜常规制作标本.每只动物在损伤区旁左右四壁各边取lmm~3脑组织块,进行超薄切片、电镜观察.实验结果:GFAP免疫染色:在损伤区旁边缘～300μm范围内,可见星形胶质细胞明显增加及细胞增大.其细胞增生程度在各层并不一致.在皮质的深层,v～Ⅵ层,星形胶质细胞增生最明显,在浅层Ⅰ～Ⅱ层增生也较明显,其次是浅层与深层之间增生的细胞稍为稀疏,并见星形胶质细胞各期分裂像.星形胶质细胞增大、胞质丰     

免疫组化方法简介(光镜与电镜结合的PAP法)

<正> 免疫组化技术是现代形态学科的重要研究工具之一。虽然40年代初出现了荧光抗体技术,但其标本不能用电镜观察。后来建立了酶标抗体法,特别是Sternberger(1979)的非酶标记抗体法(PAP),才使免疫电镜技术得到长足的发展。酶标抗体法是把酶(常用辣根过氧化物酶,简称HRP)标记在第一抗体(直接法)或第二抗体(间接法)上,     

bFGF对成年大鼠损伤的大脑皮质神经元的作用

实验用ＳＤ大鼠４０只，其中３０只分为实验组和对照组各１５只，切片用甲基绿－派洛宁染色；另１０只也分为实验组和对照组，各５只，切片用神经丝免疫组化染色．手术毁损大鼠大脑顶叶皮质，立即放入分别浸有碱性成纤维细胞生长因子（实验组）或ＰＢＳ（ｐＨ７．２，０．２ｍｏＬ／Ｍ）（对照组）的海绵胶粒（１ｍｍ３），于术后１４ｄ，２４ｄ，３４ｄ在损伤的皮质腔内重复注射相应的实验用液２５μｌ．术后４０ｄ取材，在大脑皮质损伤腔颞侧边缘Ⅱ～Ⅲ层距边缘５００μｍ范围内，对每只大鼠计数了１ｍｍ２面积中的存活神经元数目，并观察神经元的形态学变化．结果发现，实验组大脑皮质存活神经元数目较多，对照组存活神经元较少．经体视学定量方法分析，结果其均数±标准差为：实验组９１９．４５±１６５．４０，对照组６２８．３９±５７．５０／ｍｍ２，经两样本均数ｔ检验，Ｐ＜０．０５．提示碱性成纤维细胞生长因子对大鼠大脑皮质损伤神经元有一定的维持存活作用．