肝组织HBV cccDNA与HBV复制水平的相关性分析

目的 探讨乙肝患者肝组织中乙型肝炎病毒（HBV ） cccDNA与血清 HBV DNA及乙肝病毒e抗原（HBeAg）含量的关系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测乙肝患者肝组织 HBV cccDNA和血清HBV DNA ,采用化学发光法检测其血清中 HBeAg。结果 肝组织HBV cccDNA与血清HBV DNA定量呈正相关（ r ＝0．806,P ＜0．01）,与血清 HBeAg定量值无相关关系（ r ＝0．219,P ＞0．05）。结论 血清HBeAg阳性组病毒复制较阴性组活跃,HBV DNA阴性不能完全反映肝组织内 HBV是否存在复制,而检测肝组织HBV cccDNA可精确反映肝内 HBV复制情况。     

重组人野生型P53融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化

目的研究wtP53蛋白对肿瘤的治疗效果,提供药用wtP53融合蛋白。方法在本室构建的人野生型P53融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X-P53的基础上,IPTG诱导大肠杆菌表达wtP53融合蛋白,通过亲和层析柱纯化和因子Xa处理,SDS-PAGE分离。结果通过IPTG诱导后,在大肠杆菌中获得人野生型P53融合蛋白的高效表达,经过亲和层析纯化和Western印迹实验,表明获得重组人野生型P53融合蛋白。结论原核细胞表达的人wtP53融合蛋白具有天然P53蛋白的抗原性,可用于P53蛋白的体内外活性鉴定,以进一步应用于临床。     

重组人P53融合蛋白抗肝癌细胞的实验研究

研究蛋白传导域(PTD)与人野生型P53(WtP53)融合表达的P53融合蛋白PTD-P53对HepG2的增殖抑制和凋亡的影响.用PTD-P53处理HepG2后,采用MTT法分析处理后细胞的生长增殖情况,流式细胞术(FCM)分析处理后细胞周期变化及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况.PTD-P53对:HepG2的生长有明显抑制作用.细胞周期也出现阻滞现象,细胞凋亡明显增加.PTD-P53有一定的抗肝癌细胞作用.     

人胎盘提取物对实验性肝损伤保护作用的观察

本文采用CCL4诱导大鼠肝损伤模型，治疗各组采用不同途径、不同剂量给予人胎盘提取物观察大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)，乳酸脱氢酶(IDH)，胆城酯酶(CHE)，超氧化物歧化酶(SOD)的变化，并做肝脏病理切片检查，研究人胎盘提取物对实验性肝损伤大鼠的保护作用结果表明，人胎盘提取物对CCL4肝损伤有一定的保护作用。     

重组人野生型P53融合蛋白的克隆表达和对肿瘤细胞的作用

目的通过基因重组改善P53蛋白的功能，并研究它对肿瘤细胞的作用。方法构建人野生型P53(wtP53)融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X—PTD—P53，诱导表达和亲和层析纯化后，采用MTT法和流式细胞仪检测它对肿瘤细胞的增殖抑制作用和促细胞凋亡。结果成功构建P53融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X—PTD—P53，通过诱导表达和纯化获得重组人wtP53融合蛋白。MTT法和细胞流式分析证明该蛋白对几种癌细胞有明显的增殖抑制作用和促细胞凋亡。结论这种原核细胞表达的重组人wtP53融合蛋白保留了wtP53蛋白的生物学性状。     

人肝细胞生长因子真核质粒的克隆及活性测定

目的构建肝细胞生长因子的真核表达载体,为进一步利用基因治疗肝损伤打下基础。方法利用DNA体外重组技术,从胎盘提取HGFcDNA克隆到pcDNA3.1载体上,经限制性内切酶、PCR及测序鉴定重组体。转染HepG2和L02细胞并建立稳定细胞株,MTT法测其活性,并通过流式细胞技术检测细胞凋亡。结果pcDNA3.1-HGF重组体测序结果与GeneBank对照完全相同,MTT比色结果,转染HGF基因的HepG2细胞增殖速度明显低于未转染HGF基因的HepG2细胞（P〈0.05）,而转染HGF基因的L02细胞增殖速度明显高于未转染HGF基因的L02细胞（P〈0.05）,细胞流式技术检测结果也与之相符。结论成功构建了pcDNA3.1-HGF真核表达载体,pcDNA3.1-HGF对HepG2细胞有抑制作用而对L02细胞的生长有促进作用。     

中西医结合治疗急性脑梗死临床分析

目的:观察中西医结合治疗对急性脑梗死的临床疗效。方法:观察肝肾阴亏、肝阳偏亢型急性脑梗死病人120例,随机分为对照组和治疗组各60例。两组分别采有西医常规治疗、西医常规治疗加中医辨证论治。结果:中西医结合治疗对肝肾阴亏、肝阳偏亢型急性期脑梗死患者具有较好的疗效。     

酒中毒和精神分裂症患者自杀行为的特征比较

本文就一组住院酒中毒和精神分裂症患者自杀行为的特征进行了比较分析 ,旨在寻求适合的护理对策。现报道于后。1　对象与方法本文对象系 1997年 1月～ 2 0 0 0年 10月住我院的患者共116例 ,均符合中国精神疾病分类方案与诊断标准第二版(ＣＣＭＤ - 2 -Ｒ)中嗜酒所致精神障碍诊断标准[1] 。并随机抽取且符合ＣＣＭＤ - 2精神分裂症诊断标准 ,而无嗜酒史的精神分裂症 2 0 4例 (对照组 )。在这两组中分别有 31例 (2 6 .7%)和 34例 (16 .7%)有自杀行为 (χ2 =4.6 2 13,Ｐ <0 .0 5 )。本文患者的自杀行为包括自杀行为、自杀企图和自伤。2　结　　…     

紫河车促肝细胞生长的研究

目的研究紫河车提取液对肝细胞(7402细胞)的再生作用。方法采用过滤、酶消化、柱层析,获得一种有效物质(分子量为14kD)。氨基酸组成分析有18种氨基酸。经细胞培养,用MTT(四唑盐比色实验)检测生物活性。结果发现提取物有显著刺激肝细胞再生作用。结论提取物中有促肝细胞生长物质,为治疗肝坏死寻找出有效物质。     

siRNA XIAP表达载体的构建及其生物学作用

目的构建靶XIAP的siRNA表达载体,研究其对Hep3B细胞中XIAP表达的影响。方法根据siRNA设计原则,设计并合成三段XIAP的siRNA序列,克隆到pRNAT—U6．1／Neo质粒构建重组质粒;经序列分析确认质粒构建成功后,将重组质粒转染入人肝癌细胞Hep3B,通过RT．PCR、Westernblot和免疫组化分析X!AP的表达。结果重组质粒pRNAT—u6．1／Neo．XIAP经过基因序列分析,siRNA片段成功插入,转染不同siRNAXIAP质粒均可使XIAP的翻译和蛋白表达水平不同程度的降低。结论成功构建并筛选出靶向XIAP基因的siRNA表达载体,为进一步研究XIAP在调控肝癌细胞凋亡方面的作用奠定了基础。