噬菌体展示技术筛选bFGF抗原表位

目的：以抗—bFGF单克隆抗体GF22为目标，用噬菌体随机七肽库进行筛选。经三轮筛选后的噬菌体阳性克隆能特异地抑制bFGF与CF22结合。测序结果表明与CF22结合的序列高度保守，为LP(P／L)GH(F／1)K，LPPGHFK与bFGF分子(155氨基酸)上22—27位氨基酸一致，表明该序列在bFGF上是一个主要的抗原表位。用此序列的阳性噬菌体克隆免疫小鼠，发现此序列模拟肽能诱导抗bFGF抗体反应，且序列LPLGHIK诱导的抗体反应比IPPGHFK序列强三倍，序列IPLGHIK可能作为一种有价值的肽疫苗诱导抗bFGF抗体的产生。     

VEGF受体结合抑制肽的筛选及其特性鉴定

目的　筛选能抑制VEGF与血管内皮细胞表面受体结合的VEGF模拟短肽 ,探讨小分子短肽作为血管内皮细胞生长抑制剂、肿瘤疫苗的可行性。方法　以抗 VEGF单克隆抗体分别对噬菌体随机 7肽、12肽库进行筛选。通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定。用噬菌体克隆免疫小鼠检验这种短肽可否模拟VEGF的抗原决定簇诱发机体产生能与VEGF结合的抗体 ,研究小鼠抗血清、噬菌体表达的 7肽和 12肽以及人工合成 7肽对人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)生长的抑制作用。结果　对肽库进行 3轮筛选后 ,噬菌体克隆具有良好的富集效果。硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到 10 0 % ,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列 :GWYYDAL、VASAVFYSALVE。这两种噬菌体短肽免疫小鼠能激发产生高效价的抗 VEGF抗体。噬菌体表达的 7肽和 12肽对HUVEC的生长有明显的抑制作用。由短肽GWYYDAL阳性克隆免疫的抗血清对VEGF诱导的内皮细胞生长起抑制作用 ,人工合成的 7肽 (GWYYDAL)呈剂量依赖性阻拮VEGF促HUVEC增殖作用。结论　从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽GWYYDAL、VASAVFYSALVE模拟了VEGF的抗原表位 ,为研究VEGF受体结合抑制肽和设计肿瘤疫苗奠定了实验基础。     

VEGF、bFGF与抗肿瘤血管新生治疗

1 血管新生与肿瘤 血管新生与肿瘤生长有非常密切的关系,实体瘤要超过 2 mm2以上,必须要有新生血管的支持才能与肿瘤宿主的血管系统保持一定的连续性,而且肿瘤的转移和转移部位的生长也有赖于肿瘤组织血管新生。因此,血管新生是肿瘤增生、扩散和微转移灶发展的重要条件之一。开发新生血管生成抑制剂成为目前肿瘤治疗研究的一个新策略。主要优势在于:（1）血管生成抑制剂针对的是血管内皮细胞,血管内皮细胞遗传特性比较稳定,不易产生耐药性,也     

抗肿瘤树突状细胞疫苗研究进展

近代肿瘤学的新发展主要在于其对抗原提呈过程的新认识 ,大多数抗原都需要经过抗原提呈细胞(ａｎｔｉｇｅｎｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌｓ ,ＡＰＣｓ)的摄取、加工、内化 ,产生短链多肽并与主要组织相容性复合体 (ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏ ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘ ,ＭＨＣ)结合后表达于细胞膜表面才能被Ｔ细胞受体所识别 ;同时 ,ＡＰＣｓ与Ｔ细胞之间通过共刺激分子的结合发出第二信号 ,从而更加有效地促进Ｔ细胞的活化、增殖。因此 ,在抗肿瘤免疫过程中 ,ＡＰＣｓ的功能越来越受到人们的重视。近年来 ,作为抗原提呈能力最…