应用焦磷酸测序技术检测VKORC1和CYP2C9基因型

目的建立基于焦磷酸测序技术的维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因分型的方法,用于检测华法林药物代谢酶相关基因多态性。方法收集50份健康人外周血样本,提取全血基因组DNA。针对VKORC1-1639GA、CYP2C9 430CT和CYP2C91075AC 3个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套带生物素标记的扩增引物和测序引物。样本经PCR扩增后进行焦磷酸测序,结合信号峰型分析每个样本基因型,以Sanger测序法为对照,比较两种方法检测基因型结果的一致性。结果根据待测位点出峰的碱基和峰高,可以清晰判断3个SNP位点的基因型,50份样本中,VKORC1-1639GA基因型AA和AG分别有41例和9例,各占82%和12%;CYP2C9基因型*1/*1和*1/*3分别有45例和5例,各占90%和10%,未检出等位基因CYP2C9*2。焦磷酸测序技术与Sanger测序法所检测的基因型结果一致。结论焦磷酸测序技术在SNP基因分型中具有操作简便、耗时短、成本低和结果准确可靠等优点,该检测方法可快速对CYP2C9和VKORC1的SNP位点进行分型。     

贵州地区57例遗传性持续性胎儿血红蛋白增高症遗传因素分析

目的探讨遗传性持续性胎儿血红蛋白增高症(HPFH)患者存在的珠蛋白基因突变类型及相关单核苷酸多态性(SNP)位点的基因型,分析HPFH中血红蛋白F(HbF)水平升高的分子机制。方法收集HPFH标本,提取全血基因组DNA,采用Gap-PCR检测常见缺失型HPFH;采用PCR扩增与HbF水平升高相关的SNP位点,Sanger测序进行基因分型检测。结果57份HPFH标本中,缺失型HPFH复合β珠蛋白生成障碍性贫血2份(均为SEA-HPFH/CD17);在非缺失型HPFH标本和对照标本中,rs4671393、rs3817621位点基因型分布比较,差异有统计学意义(P<0.05),rs7482144、rs4527238、rs28384513、rs9399137、rs2072597、rs117351327、rs10128556等SNP位点基因型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论SEA-HPFH/CD17、BCL11A基因rs4671393和KLF1基因rs3817621位点多态性可能是导致HPFH发生的遗传因素之一。     

1例罕见Melnick-Needles综合征患者基因变异分析

目的 研究1例Melnick-Needles综合征家系的致病基因并为该家系提供遗传咨询依据。方法 采集先证者即1例不明原因骨骼发育异常、身材矮小的青年女性患者及其父母外周血标本,提取基因组DNA,采用家系全外显子组测序(Trio-WES)筛查先证者致病基因及突变位点,并通过Sanger测序进行验证。结果 先证者位于X染色体上的FLNA基因有一杂合变异位点：NM＿001110556.2:c.3562G>A(p.A1188T),父母均为野生型。根据ACMG指南,提示FLNA基因的c.3562G>A突变为1个致病突变位点,与X连锁显性遗传疾病Melnick-Needles综合征相关。国内未见该致病位点报道。结论 确诊1例罕见Melnick-Needles综合征,致病FLNA突变c.3562G>A在国内为首次报道,为患者及家属遗传咨询提供了依据。     

一例Cornelia de Lange综合征患儿的致病基因突变分析

患儿,男,4岁2个月,因智力低下,身材矮小就诊.患儿为孕1产1,足月顺产,出生时有窒息史.婴儿期喂养困难,易吐奶(呈喷射状),进食少.身高、体重增长缓慢,头较小.2岁多才能独立行走、开始叫爸妈,现只会说单个字.查体:身高92 cm(-3.48标准差),体重 12.5 kg(-2.56标准差),头围46.2 cm(-3....     

应用变性高效液相色谱对EPHX1基因进行分型

目的 基于变性高效液相色谱技术,建立一种快速检测环氧化物水解酶(EPHX1)基因多态位点rs4653436(G＞A)的基因分型方法.方法 标准酚-氯仿法提取275例健康人外周血基因组DNA,应用聚合酶链反应/变性高效液相色谱(PCR/DHPLC)方法检测rs4653436(G＞A)位点基因型.结果 275例无关个体中,基因型GG、GA和AA分别有176例、93例和6例,各占64.0%、33.8%和2.2%,G和A等位基因的频率分别为80.9%和19.1%.结论 变性高效液相色谱技术检测EPHX1 rs4653436基因型简便、准确,为研究rs4653436多态性与华法林用量个体差异的相关性打下基础.     

六项自身抗体联合检测在系统性红斑狼疮诊断中的价值

SLE是一种伴有多器官多系统损伤的自身免疫性疾病,以自身抗体的产生和免疫复合物的聚集为特征.其临床表现复杂和多样化,不典型的或早期的SLE易被误诊为其他疾病,ANA是筛查自身免疫性疾病不可或缺的自身抗体.SLE免疫学的显著特点为出现ANA[1]现行的SLE的实验室检查主要通过检测血清中的ANA、抗-ds-DNA、抗Sm等,后两项为SLE的特异性指标,但阳性率低,而ANA尽管阳性率高,但特异性又不好,近几年来,越来越多的学者认为AnuA、AHA、抗r-RNP也是SLE的诊断标志.本研究旨在评价抗Sm抗体、抗ds-DNA抗体、抗r-RNP抗体、AnuA、AHA、ANA在诊断SLE中的临床意义及自身抗体联合检测在SLE诊断中的意义及临床价值.     

240例脑梗死患者相关危险因素分析

脑梗死是一种致残率和致死率都非常高的疾病,严重威胁人们的生活安全和生活质量。过去认为脑梗死多发于老年人,随着CT的广泛应用,青中年脑梗死也越来越多的被发现,且病因很复杂。因此,探讨脑梗死的相关危险因素就显得极其重要。近20年随着我国经济及生活水平大幅提高，生活节奏及膳食结构改变，人口老龄化快速进展，脑梗死的危险因素研究需要更多流行病学研究资料来阐明，为探讨脑梗死危险因素，     

灭蚊真菌-卡地腐霉蚊虫宿主范围初探

目的：调查和探讨灭蚊真菌．卡地腐霉的蚊虫宿主范围。方法：野外采集蚊幼虫标本，通过形态鉴定其种属，在实验室按标准化方法测定卡地腐霉对其感染能力。结果：野外5处采集蚊虫标本约600只，受感染蚊虫分属2属7种，加上原有调查资料，到目前为止，已知卡地腐霉的蚊虫宿主共3属12种，内含重要疾病媒介蚊虫3种。结论：本研究初步给出了卡地腐霉在常见蚊虫特别是媒介蚊虫中的灭蚊谱。     

1180例新生儿脐血红细胞参数分析

目的:探讨影响新生儿脐血红细胞参数的因素。方法:采集1 180例新生儿脐血,利用全自动红细胞分析仪检测红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HB)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞压积(HCT)、红细胞体积分布宽度(RDW)。分析不同性别、孕周及分娩方式新生儿脐血红细胞参数的差异。结果:男性新生儿的RBC、HB、HCT和RDW高于女性新生儿(P<0.05),MCV和MCH低于女性新生儿(P<0.05);足月产儿的HB、MCV、MCH和RDW低于早产儿(P<0.05);顺产新生儿的RBC、HB和HCT较剖宫产儿高(P<0.05)。结论:新生儿脐血红细胞参数受性别、孕周及分娩方式等因素的影响;了解新生儿红细胞参数,有助于某些遗传性血液病的早期筛查。