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[王曦,王百忍,黄文晋,段晓莉,鞠躬. 解剖学报,2001;32(2):121-125] 目的研究活化形式的p44/42 MAPK在成年大鼠脑内的分布. [ HTH〗方法免疫组织化学方法(ABC 法). 结果磷酸化的p44/42 MAPK在正常大鼠脑内有广泛的表达,出现在许多核团,特别是在岛皮质、感觉运动及视、听皮质、扣带前皮质、海马尾侧的内嗅区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和中介核、视上核、视交叉上核、A14区、下丘脑室旁核大细胞部、弓状核、前腹侧视前核、下丘脑后区、顶盖前区、室周灰质腹外侧柱、蓝斑、臂旁外侧核、小脑Purkinje细胞、A5区、旁巨细胞外侧核、吻侧(C1区)和尾侧(A1区)延髓腹外侧网状结构等. 阳性结构主要见于神经元的胞浆、胞核和突起内,在部分脑膜细胞和少突胶质细胞内也有表达. 结论活化的p44/ 42 MAPK在脑内的广泛存在提示其作为重要的信号转导分子在正常状态下的脑功能活动可能起重要作用. (甄志强) 相似文献
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磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶1/2在正常小鼠脑内的免疫细胞化学定位 总被引:2,自引:2,他引:0
细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1/2是重要的信号转导分子。现已知在正常动物的中枢神经系统内有其活化形式即磷酸化的ERK1/2(pERK1/2)分子的存在,但其在小鼠脑内的分布目前还没有全面的观察。本研究用免疫组织化学技术(ABC法)研究了pERK1/2样免疫反应阳性产物在脱臼处死的正常小鼠全脑内的分布。结果发现pERK1/2在正常小鼠脑内有广泛的表达,阳性产物主要存在于神经元,亦见于个别白质内的胶质细胞,脑膜及室管膜细胞也有表达。强阳性表达的核团主要有:岛皮质、视听皮质、边缘前皮质、扣带前皮质、海马垂直部、弓状核、蓝斑和小脑Purkinje细胞;中等阳性表达的核团主要有:感觉运动皮质、外侧隔区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和外侧杏仁核、丘脑室旁核前部、视交叉上核、穹隆下器、终板血管器、前腹侧视前核和下丘脑背内侧核;弱阳性表达的核团主要有:视上核、下丘脑室旁核大细胞部、下丘脑后区、顶盖前区、室周灰质腹外侧柱、A5区、孤束核和延髓腹外侧网状结构等。本文结果观察到pERK1/2在正常小鼠脑内广泛存在,提示pERK1/2作为重要的信号转导分子,可能参与许多脑区在正常状态下的功能活动,揭示其分布特点为了解其在脑内的多样性功能提供了形态学依据。 相似文献
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目的 探讨SV40早期区域基因编码产物大T抗原(Tag) 表达及与抑癌蛋白p53的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义。方法 采用免疫共沉淀及Western印迹法检测43例人脑肿瘤组织及5例正常人脑组织中Tag的表达,并对18例Tag阳性瘤组织检测Tag-p53复合物的存在。结果 Tag在5例室管膜瘤及2例脉络丛乳头状瘤中全部表达,垂体腺瘤(5/6)、星形胶质细胞瘤(7/10)、脑膜瘤(4/6)、多形性胶质母细胞瘤(3/5)及髓母细胞瘤(2/5)均有Tag的表达,3例少枝胶质细胞瘤、1例松果体瘤及5例正常人脑组织无Tag表达;检测18例Tag阳性瘤组织均发现Tag与p53形成特异性复合物。结论 在人脑肿瘤组织中Tag广泛表达,Tag可与p53形成特异性复合物,Tag-p53特异性复合物的形成导致p53失活,可能是SV40致人脑肿瘤发生的一个重要机理。 相似文献
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GAP-43原核表达载体的构建、表达及抗GAP-43单克隆抗体的制备 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:原核表达神经生长相关蛋白-43(GAP-43),并制备抗GAP-43的单克隆抗体(mAb)。方法:从含有GAP-43 cDNA的质粒中,用PCR扩增GAP-43 cDNA的全长编码序列,克隆人表达载体pGEX-4T-1中,构建GAP-43的高表达工程菌,并以IPTG诱导表达日的蛋白。通过亲和层析法纯化表达的GST-GAP-43融合蛋白,并以此为抗原制备mAb。结果:酶切鉴定证明,获得含有目的基因片段的重组质粒.表达的GST-GAP-43融合蛋白以可溶性的形式存在。ELISA检测表明,获得的抗GAP-43 mAB效价为1:10^8,其IgG的亚类为IgG2a,亚型为κ型。用Western blot检测大鼠脑匀浆蛋白,在相对分子质量(Mr)为50000处有一条特异性带。用此mAb进行荧光免疫法检测表明,在致敏豚鼠的肺切片中,有GAP-43阳性的神经纤维。结论:所获抗GAP-43mAb的特异性强、效价高,对进一步研究(GAP-43在神经系统中的作用提供了有用的试剂。 相似文献
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目的 探讨 SV40早期区域基因编码产物大 T抗原(Tag)的表达及与抑癌蛋白 p5 3,p Rb的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义 .方法 采用免疫共沉淀结合银染色及Western印迹法检测 6 5例人脑肿瘤及 8例正常人脑组织中Tag的表达 ,并对 18例和 15例 Tag阳性瘤组织分别检测Tag- p5 3和 Tag- p Rb复合物的形成 .结果 SV40 Tag在人脑肿瘤中广泛表达 ,阳性率为 6 6 % (4 3/ 6 5 ) ,而 8例正常人脑组织均无 Tag表达 ,二者差异显著 (P<0 .0 5 ) ;分别检测 18例和 15例 Tag阳性瘤组织 ,均发现 Tag可与 p5 3,p Rb形成特异性复合物 .结论 SV40 Tag的表达与人脑肿瘤的发生有一定关系 ;SV40 Tag与 p5 3,p Rb形成特异性复合物并导致其失活 ,可能是 SV40致人脑肿瘤发生的一个重要机制 . 相似文献
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目的 将肌腱蛋白-R不同功能片段在原核中表达、纯化、并研究其初步的生物学功能。方法 将编码肌腱蛋白-R不同功能片段的表达质粒pGEX-EGFL,pGEX-EGFS,pGEX-FN1-2,pGEX-FN6-8,pGEX-FG及空载pGEX-KG转化入E.Coli JM109中,用IPTG诱导表达,以谷胱甘肽琼脂糖为填充料进行亲合层析,纯化所表达的融合蛋白。以纯化的融合蛋白作为培养液成分,GST为对照,观察纯化的肌建蛋白-R各功能片段对体外培养脊髓细胞活性及突丰收生长的影响。结果 肌腱蛋白R的5个片段在大肠杆菌中都有表达,通过谷胱甘肽琼脂糖亲合层析,都得到了初步纯化。通过对培养细胞进行MTT染色,NSE染色后图像分析,结果表明,EGFL,FN1-2促进神经元的存活,EGFL,EGFS和FN6-8对突起的生长有明显的促进作用。结论 肌腱蛋白-R的不同功能片段可以通过大肠杆菌表达,经纯化获得蛋白,肌腱蛋白-R不同的片段对体外培养的脊髓细胞有不同的作用。 相似文献