排序方式: 共有31条查询结果,搜索用时 13 毫秒
1.
实时定量RT-PCR方法检测初诊白血病患者常见分子标志物 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立实时定量RT-PCR(RQ-RT-PCR)方法,检测初诊白血病患者骨髓细胞中的常见特征性分子生物学标志物的表达水平,评价其在疾病诊断和微量残留病(MRD)监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-RT-PCR法对常见融合基因转录本(bcr-abl、AML-ETO、PML-RARα)和abl阳性模板进行扩增,检测202例初诊白血病患者的融合基因转录本含量.结果 初诊白血病患者中的融合基因表达水平以绝对量表示,bcr-abl转录本b3a2或b2a2型拷贝数为47 614.63,bcr-abl转录本e1a2型拷贝数为98 847.53,AML1-ETO转录本拷贝数为300 029.51,PML-RARα转录本拷贝数为25 506.28.以abl校正拷贝数(NCN)表示相对量,bcr-abl转录本b3a2或b2a2型为1.05、bcr-abl转录本e1a2型为0.91、AML1-ETO转录本为5.33、PML-RARα转录本为0.55.结论 以abl校正拷贝数计算融合基因表达水平,结果更准确、直观,优于绝对定量.同时,不同类型融合基因转录本在初诊白血病患者中表达水平不同. 相似文献
2.
摘要:目的:建立检测NK细胞表面免疫球蛋白样受体基因 KIR2DS1 mRNA表达水平的荧光定量PCR方法并评价其性能。 方法:以行异基因造血干细胞移植的供患者共57对为研究对象,针对 KIR2DS1 基因设计特异性引物及探针,构建TaqMan-MGB荧光定量PCR反应体系,并评价该实验方法的性能,包括:总符合率、重复性、灵敏度及仪器适用范围、技术人员再现性。 结果:以KIR-SSO基因定性分型法为金标准,通过检测其中35例样品,荧光定量PCR方法对 KIR2DS1 基因阳性及阴性检测率均为100%。在重复性试验中,选取Ct值分别为高、中、低值3个样品的批内、批间CV分别为0.09%~0.46%、0.71%~1.13%。该方法的灵敏度达102 copies/μL,且对拷贝数为102 copies/μL的3个样品进行5次重复试验的CV分别为5.37%、2.71%、5.51%。仪器比对结果显示,参比仪器ABI-7500与实验仪器LC-480之间的拟合直线回归方程为Y=0.973 6X+0.118 3(R2=0.961 9,R2>0.95)。2名技术人员对10个 KIR2DS1 基因阳性样品的再现性比对试验结果显示其偏倚(%)均<±5%。 结论:建立了TaqMan-MGB荧光定量PCR检测 KIR2DS1 mRNA表达水平的检测方法,其性能良好。 相似文献
3.
4.
目的 研究造血干细胞捐献者资料库供、受者HLA-A、HLA-B、HLA-Cw、HLA-DRB1、HLA-DQB1位点等位基因高分辨全相合及不相合的概率.方法 采用基因测序分型(sequence based typing,SBT),序列特异性寡核苷酸探针(sequence-specific oligo nucleotide probes,SSOP),聚合酶链反应序列特异性引物(sequence-specific primers,SSP)对741对HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1低分辨全相合的无关供、受者进行HLA-A、HLA-B、HLA-Cw、HLA-DRB1、HLA-DQB1基因高分辨检测.结果 HLA-A、HLA-B、HLA-Cw、HLA-DRB1、HLA-DQB1基因位点高分辨分型供、受者全相合的概率为0.1916(142/741);1个等位基因不相合的概率为0.1930(143/741),不相合的位点频率次序为:HLA-A>-Cw>-DQB1>-B>-DRB1;2个等位基因不相合的概率为0.2362(175/741).其中仅在一个位点(loci)上的概率为0.0175(13/741),位于两个位点上的概率为0.2186(162/741),以A+Cw组合位点不相合的概率最高,其次以B+Cw和DRB1+DQB1组合位点次之.结论 对判断无关供、受者HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1低分辨全相合,而HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1、HLA-Cw、HLA-DQBI高分辨基因分型全相合或部分相合的概率有重要参考价值,并且不仅能提高非亲缘造血干细胞移植的成功率,还有助于提高造血干细胞捐献者资料库数据的使用率. 相似文献
5.
Objective To investigate the prediction of anti-human leukocyte antigen antibodies (HLA) and anti-major histocompatibility complex class I-related chain A antibodies (MICA) to the development of acute rejection (AR) and kidney allograft function. Methods Forty-one kidney transplant patients were prospectively tested for anti-HLA and anti-MICA. Thirty-seven patients were screened using Luminex/single-antigen beads to determine the HLA and MICA-specific antibody levels at 0,30,90, 180,360,720 and 1080 days post-transplantation. The patients and donors of HLA and MICA allele typing were determined by PCR-SSOP, and donor specific antibody (DSA) and non-donor specific antibody (NDSA) were identified.Simultaneously,their serum creatinine (SCr) levels and clinical data were analyzed. Results Nine patients (21.95 % ,9/41 ) had pre-existing anti-HLA and(or) anti-MICA, including 6 cases of anti-MICA,2 cases of anti-HLA, and one case of anti-MICA and anti-HLA. Nine patients had pre-existing DSA and NDSA. In the 37 patients, 6 patients (16.2% ) developed de novo anti-HLA, and 3 (8.1%) developed de novo antiMICA. In patients positive for de novo anti-HLA, the titer of antibody was gradually increased during the follow-up of three years. Four patients out of 9 patients with pre-existing antibodies were suffered from AR (44.4%); In 6 patients positive for de novo anti-HLA,three cases (50.0%) were suffered from AR; In three patients positive for de novo anti-MICA,no AR occurred (P<0.05). In two patients positive for DSA of HLAⅡ antibody detected at the third and seventh day after transplantation, the renal grafts were renovecd due to rejection. The Scr levels in patients positive for pre-existing MICA with AR were higher than in those positive for pre-existing MICA without AR at each scheduled time point during the follow-up period (P<0.05). The Scr levels in patients negative for antibodies pre-transplantation and having AR were higher than in those having no AR at each scheduled time point during the follow-up period (P<0. 01 ). The Scr levels in patients positive for de novo HLA and MICA and having AR one month following transplantation were higher than in those negative for antibodies and having no AR (P<0.01 ). Conclusion Pre-existing and de novo anti-HLA were the irnportant factors for the development of AR, but the mismatch of HLA and MICA alleles in donors and patients was primary causes for generation of de novo antibodies. 相似文献
6.
目的通过美国组织相容性和免疫遗传学委员会(ASHI)组织的国际间能力验证(PT)结果, 设立抗人类白细胞抗原(HLA)抗体的判定界限值。方法在液相芯片(Luminex)技术平台采用Single Antigen试剂检测HLA抗体, 回顾分析2012年至2019年间江苏省血液研究所HLA配型实验室参加ASHI组织的11次共55个质控样本的HLA抗体PT结果。结果在79种HLA-Ⅰ类抗体中检测到HLA-A、B、Cw抗体21、43、15种类型;44种HLA-Ⅱ类抗体中检测到HLA-DRB1、DQB1、DPB1抗体18、7、19种类型。分析每个质控样本中本实验室上报的所有HLA抗体的中位荧光强度(MFI)值, 以及ASHI汇总的同期多中心对该特异性抗体判断其阴/阳性结果的符合率, 并以95%、90%、80%、79%~50%、<50%的符合率范围, 将MFI值由高到低排列成HLA抗体可能饱和度值、阳性决定值、阳性判定界限值、可疑阳性参考值及可疑阴性参考值的区间, 建立了本实验室HLA抗体的判定界限值表, 其中42种HLA-Ⅰ类、Ⅱ类特异性抗体类型数据完整。当实验室检测HLA-Ⅰ类、Ⅱ类抗体的... 相似文献
7.
8.
目的 探讨移植物非去T细胞的无关供体造血干细胞移植(HSCT)后患者巨细胞病毒(CMV)激活与供受体杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)和HLA-Cw基因的相关性.方法 以2003年1月至2008年12月48例行无关供体HSCT患者为研究对象,采用PCR-SSP和PCR-SSOP方法 检测供受体KIR基因单体型和HLA-Cw位点,免疫组化监测这些患者移植后CMV感染情况.结果 供受体HLA-Cw相合33例,不合15例,CMV激活率分别为48.5%和66.7%,两组比较差异无统计学意义(χ~2=1.39,P=0.2375),供受体均属于HLA-C1组的有37例,均属于HLA-C2组11例,CMV激活率分别为64.9%和18.2%,两组比较差异有统计学意义(χ~2=18.13,P<0.0001).供体为KIR单体型A的移植有26例,供体为KIR单体型B的移植有22例,CMV激活率分别为57.7%和50.0%,两者比较差异无统计学意义(χ~2=0.28,P=0.5941).供体激活性KIR基因小于、等于受体的激活性KIR基因的有34例,CMV激活率为70.6%,供体激活性KIR基因大于受体激活性KIR基因的有14例,CMV激活率为14.3%,两者比较差异有统计学意义(χ~2=12.44,P=0.0004).结论 在无关供体HSCT中受体和供体不同激活性KIR的数量和HLA-Cw位点差异可能与CMV激活存在相关性. 相似文献
9.
目的分析NK细胞免疫球蛋白样受体(KIR)B/X基因型对无关供者HLA全相合造血干细胞移植患者预后的影响。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP.PCR)和序列特异性寡核苷酸探针聚合酶链反应(SSOP-PCR)的方法,对52对HLA全相合供.受者进行KIR与HLA分型.患者中急性淋巴细胞白血病(ALL)22例,急性髓系自血病(AML)13例,慢性粒细胞白血病(CML)15例,骨髓增生异常综合征(MDS)l例,急性杂合型白血病(HAL)l例。结果①28例供者KIR基因型为B/X,24例供者KIR基因型为A/A。②KIR基因型B/X组患者移植后中性粒细胞和血小板的重建时间与A/A基因型组相比差异无统计学意义(P〉0.05);两者的Ⅲ^。-Ⅳ^。急性GVHD(10.7%VS20.8%,P=-0.266)和慢性GVHD(53.6%Vs29.2%,P=0.067)之间的差异无统计学意义。B/X基因型组患者移植后3年持续缓解率(70.7%VS62.5%.P=0.414)和3年总生存率(75.5%VS62.5%,P=0.194)高于A/A组,但差异无统计学意义。结论在无关供者HLA全相合造血干细胞移植中,供者KIR基因型B/X可能增加了患者慢性GVHD的发生率,对持续缓解率和总生存率无明显影响。 相似文献
10.
目的 探讨肾移植前后人类白细胞抗原(HLA)和主要组织相容性一类相关链A基因(MICA)抗体特异性对移植后排斥反应和移植肾功能的影响. 方法采用免疫荧光液相芯片技术检测27例肾移植(尸供22例,亲属活体供肾5例)受者手术前后抗HLA抗体和MICA抗体的特异性和阳性值变化,并结合供受者的基因分型,区分供体特异性抗体和非供体特异性抗体.取同期的临床资料和SCr水平进行分析. 结果 27例移植患者中带肾存活26例,移植肾失功1例.移植后1、3、6、12个月时动态随访24例,失访2例.27例患者移植前预存抗体7例(25.9%),其中HLA抗体阳性2例、MICA抗体阳性3例,HLA和MICA抗体均阳性2例.肾移植前HLA和MICA抗体均阴性者中移植后3~6个月产生新生抗体3例.1例新生HLA-Ⅱ类特异性抗体者,移植半年后出现慢性排斥反应,经治疗术后1年SCr>200 btmol/L.3例肾移植前MICA抗体阳性者,术后MICA抗体的特异性均无改变,但抗体的阳性分值呈现2~8分的变化,1年后均升高到移植前(4~8分)水平.移植前预存低阳性率HLA-Ⅱ类特异性抗体者1例,移植后2周有发热等排斥反应,巨细胞病毒检测阳性,移植后1个月时SCr为171μmol/L,3个月升高到236μmol/L.24例分为抗体阴性组(14例)和抗体阳性组(10例).移植后1个月和1年时SCr水平2组间比较差异有统计学意义(P=0.03,0.05). 结论 移植后3~6个月是新生抗体变化的重要随访时间,可根据HLA和MICA抗体的特异性和阳性分值变化,尽早采取有效方法预防排斥反应和减少移植肾功能减退的发生和发展. 相似文献