纳米粒子-siRNA复合物抑制脐血树突状细胞SOCS1基因表达的实验研究

目的:构建复合纳米粒子载体,传递siRNA序列,抑制脐血树突状细胞SOCS1基因表达.方法:构建PEI包覆的以SiO2和Fe3O4为主要成分的复合纳米粒子载体,以LipofectamineTM2000为对照,琼脂糖凝胶电泳检测纳米粒子-siRNA的结合效率;荧光显微镜和流式细胞术检测纳米粒子-SOCS1-siRNA序列被细胞摄入的效率;Western blot检测纳米粒子-siRNA复合物转染脐血树突状细胞后对SOCS1基因表达的抑制.MTT法检测纳米粒子-SOCS1-siRNA处理的脐血DCs对肿瘤细胞的杀伤活性.结果:纳米粒子可以高效结合siRNA序列,纳米粒子-SOCS1-siRNA序列可被脐血树突状细胞摄取,但是单独的纳米粒子抑制SOCS1基因表达效率比较低,在外加磁场的作用下,基因沉默作用显著增强,抗肿瘤作用也相应提高.结论:纳米粒子载体传递siRNA安全性好,效率高,可以高效沉默脐血树突状细胞SOCS1基因表达,能为设计更有效的以树突状细胞为基础的抗肿瘤疫苗提供新思路和实验依据.     

加热对肿瘤细胞热休克蛋白70产生的影响及意义

目的探讨加热对肿瘤细胞热休克蛋白70产生的影响,为热疗治疗肿瘤提供理论依据。方法对体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721进行加热,42℃,2h,用超声细胞破碎仪破碎已经加热的SMMC-7721细胞,高速离心,用SDS-PAGE和Western blot方法对上清中HSP70的表达进行鉴定。结果加热42℃,2h的肝癌细胞热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）有较高表达。结论经加热42℃,2h的肝癌细胞热休克蛋白70（HSP70）有较高表达,为热疗治疗肿瘤提供了实验数据。