蛋白激酶CK2β SiRNA对肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用

目的:探讨蛋白激酶CK2β特异性小干RNA对肺腺癌细胞系A549生长增殖的影响.方法:构建CK2βsiRNA表达质粒稳定转染A549细胞,RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学技术检测转染前后CK2β的mRNA和蛋白表达水平,同位素掺入法测定细胞内CK2活性,细胞计数法绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间,流式细胞术分析细胞周期.结果:与空白组和阴性对照组相比,稳定转染pGPU6-CSNK2B质粒后.A549细胞中Cl(2B的mRNA水平、胞浆蛋白表达水平以及CK2活性均明显下降(P＜0.05),但各组间细胞核中CK2β的蛋白表达水平无明显差异(P＞0.05);A549细胞生长明显受到抑制,倍增时间增加;A549细胞阻滞于G0/G1期.结论:CK2B siRNA可以下调A549细胞中CK2β表达及其激酶活性,并抑制细胞增殖;本研究为CK2特异性siRNA作为抗肿瘤药物的开发和CK2药靶的研究奠定了基础.     

广东省佛山市鼠伤寒沙门菌分子分型及其多重耐药分析

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蛋白激酶CK2与衰老的关系

衰老的发生和发展取决于遗传因素、内外环境因素和社会心理因素的作用，而且是多因素诱发和多层次变化的综合结果。有关衰老的机制目前存在着多种假说，如自由基学说、端粒学说、DNA损伤学说和衰老基因调控学说等。这些学说都只能从某一侧面反映衰老的因或果，很难完全解释衰老的机制。蛋白激酶CK2是一种具有潜在活性的信使非依赖性丝／苏氨酸蛋白激酶，在生物界各物种中均呈高度保守性，广泛参与细胞正常功能的调控。有报道指出CK2调控DNA修复蛋白-X线修复交叉互补基因1（X-raycrosscomplementinggene1，XRCC1）的活性，参与大脑神经元染色质和多种蛋白质（如、微管相关蛋白MAP等）的磷酸化，调节神经中枢系统某些基因（M6b-2）的功能等。这些机制的失效可能导致衰老的发生。     

佛山市沙门菌多重耐药及第Ⅰ类整合子携带情况分析

目的 了解佛山市沙门菌的多重耐药以及第I类整合子的携带情况,为研究沙门菌耐药机制提供参考。方法 收集2015—2017年佛山市食源性疾病监测中分离的390株沙门菌作为本研究的样本菌株,按照Kauffman-White的分类标准进行沙门菌血清分型,采用半定量药敏检测法测定沙门菌对14种抗生素的最小抑菌浓度（ MIC）,采用聚合酶链反应（PCR） 检测第I类整合子相关的整合酶intI基因。结果 390株沙门菌共分为9个血清群、43个血清型,其中以B群的鼠伤寒沙门菌变种（I4,5,12：i：-）检出数最多（136株,占34.87%）。药敏试验结果显示,耐药率最高的是氨苄西林,耐药率为69.23%,其次为四环素,耐药率为67.95%。390株沙门菌中共检出329株耐药菌株,耐药率为84.36%;其中多重耐药菌株252株,多重耐药率为64.62%（252/390）。37.95% （148/390） 的沙门菌检测出第Ⅰ类整合子,54.37%（137/252）多重耐药菌株检出第Ⅰ类整合子。结论 佛山市沙门菌血清型别多样,耐药率及整合子携带率均较高,提示应从基因水平对沙门菌耐药性及其传播机制进行监测 。     

重组金属硫蛋白2A质粒的构建与表达

目的构建重组金属硫蛋白2A(MT-2A)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究MT-2A奠定基础。方法从人骨骼肌细胞cDNA文库中PCR扩增MT-2A基因DNA序列,构建重组表达质粒MT2A-pET32a,PCR与DNA测序法鉴定插入序列;重组细菌用IPTG诱导表达,His-bind亲和层析柱纯化MT-2A蛋白,Western blotting鉴定蛋白特性。结果扩增获得的MT-2A基因片段长186bp,DNA测序证实MT2A-pET32a重组质粒构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约为29×103,Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒MT2A-pET32a,在大肠埃希菌内诱导表达并纯化获得MT-2A。     

佛山市食源性和人源沙门氏菌血清型分布与耐药性研究

目的 了解佛山市食源性和人源沙门氏菌的血清型分布和耐药性关系,为今后的防制工作及临床合理用药提供参考.方法 采用国家标准检测方法进行沙门氏菌检验,纸片扩散法进行抗微生物药物敏感性试验.结果 48株沙门氏菌分离出6个群别17种血清型,其中23株食源性沙门氏菌分离出6个群别13种血清型,25株人源沙门氏菌分离出5个群别12种血清型,2个来源中有8种共同血清型,以B群、CI群、E1群为主.食源性和人源沙门氏菌分别对10类13种和7类7种抗生素有耐药株,耐药率分别为72.2％和38.9％;有5种药敏谱相同;14株3种以上耐药的沙门氏菌有10种多重耐药谱.结论 佛山市食源性和人源沙门氏菌血清型差异不大,有多重耐药现象,提示应从动物和人类两方面引导抗生素的合理使用,建立从源头治理到最终消费目标明确的理性筛选控制体系.     

佛山市食源性和人源沙门氏菌血清型分布与耐药性研究

目的了解佛山市食源性和人源沙门氏菌的血清型分布和耐药性关系。为今后的防制工作及l临床合理用药提供参考。方法采用国家标准检测方法进行沙门氏菌检验,纸片扩散法进行抗微生物药物敏感性试验。结果48株沙门氏菌分离出6个群别17种血清型,其中23株食源性沙门氏菌分离出6个群别13种血清型,25株人源沙门氏菌分离出5个群别12种血清型,2个来源中有8种共同血清型,以B群、Cl群、E1群为主。食源性和人源沙门氏菌分别对10类13种和7类7种抗生素有耐药株,耐药率分别为72．2％和38．9％;有5种药敏谱相同;14株3种以上耐药的沙门氏菌有lO种多重耐药谱。结论佛山市食源性和人源沙门氏菌血清型差异不大,有多重耐药现象．提示应从动物和人类两方面引导抗生素的合理使用,建立从源头治理到最终消费目标明确的理性筛选控制体系。