双歧杆菌DNA对J774A.1巨噬细胞的活化作用

双歧杆菌的细胞壁成分能有效的激活免疫细胞,促使这些效应细胞释放免疫活性物质,并对多种肿瘤的发生与发展具有一定的抑制作用。本研究利用我室提取的双歧杆菌DNA观察了其对小鼠J774A.1巨噬细胞的活化作用。收集厌氧培养的双歧杆菌(菌种由山东省防疫站提供),加入溶菌酶(1mgm1)与10%SDS(终浓度为1%)裂解菌体,饱和酚抽提去除菌体蛋白,透析,用紫外分光光度计测定所提取的双歧杆菌DNAA260/A280为1.823,经薄板层析证实所制备的双歧杆菌DNA中无脂多糖存在,经HpaⅡ酶酶切证实所制备的双歧杆菌DNA具有一定的非甲基化CpG基序,冷冻干燥后备用…     

“学导式”教学法在微生物教学中的实践与思考

为培养适应社会和经济发展需要的跨世纪医学人才,根据医学微生物学中细菌学各论的内容易混、难记的特点,在教学中优化了教学内容并采取了以学生为主体的“学导式”教学法,激发了学生的学习兴趣,提高了教学质量。     

抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建

目的 构建抑癌基因FHIT真核表达质粒pHCMVsp1A-FHIT。方法 用限制性内切酶EcoRⅠ酶切抑癌基因FHIT的克隆载体pGEM-FHIT获得FHIT基因片段,长度为0.9kb,将其插入真核表达载体pHCMVsp1A CMV启动子的下游,用HindⅢ酶切鉴定FHIT基因插入方向。结果 PCR扩增及EcoRⅠ、HindⅢ酶切鉴定证实FHIT基因以正确方向插入表达质粒pHCMV1A中。结论 成功构建抑癌基因FHIT真核表达质粒pHCMVsp1A-FHIT,为研究FHIT的抑癌作用提供有效的分子工具。     

FasL对CD28基因启动子活性的抑制作用

目的探讨FasL对CD28基因启动子活性的影响，为研究凋亡信号在免疫衰老中的作用提供资料。方法采用MTY法和annexin V—FITC染色测定细胞凋亡，Northern blot检测CD28 mRNA的表达水平，构建CD28基因上游非编码区序列的报告基因载体，并瞬时转染Jurkat E6-1细胞后，用Luciferase检测报告基因启动子的活性。结果FasL在Jurkat E6-1细胞介导的凋亡可使CD28 mRNA水平降低。CD28启动子的有效序列在上游-400 bp的范围内，并且FasL介导的凋亡信号可明显降低CD28启动子活性。结论FasL介导的凋亡信号是CD28基因启动子活性降低的重要原因。     

中药息敏饮的抗炎作用

通过炎症部位PGE2检测，有核细胞浸润测定和角叉菜胶诱发大鼠足爪肿胀实验，观察中药息敏饮的抗炎作用。结果表明，息敏饮抑制炎症部位PGE2的产生和有核细胞的浸润，效果与消炎痛一致。角叉菜胶诱发的大鼠足爪水肿，初期息敏饮的疗效优于消炎痛；二期和后期水肿，息敏饮与消炎痛的作用效果类似。     

IL-18基因修饰增强肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞的抗肿瘤效应

目的:观察经肿瘤细胞裂解物致敏的白细胞介素18(IL-18)基因修饰的树突状细胞(DC)体内诱导的抗肿瘤免疫应答反应.方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞经IL-18重组腺病毒感染后(IL18-DC),再经Hepal-6肝癌细胞裂解物冲击致敏后通过皮下注射用于荷瘤小鼠的治疗.用ELISA检测细胞因子,4 h51Cr释放法检测NK细胞活性及CTL杀伤活性.结果:致敏IL18-DC组体内诱导NK细胞活性与未致敏IL18-DC组无明显差别(P＞0.05),但明显高于致敏DC组和DC组(均P＜0.01);致敏IL18-DC组体内诱导特异性CTL杀伤活性明显高于IL18-DC组、致敏DC组和DC组(均P＜0.01);致敏IL18-DC组免疫治疗作用明显优于未致敏IL18-DC组、致敏DC组和DC组(均P＜0.01).结论:肿瘤细胞裂解物致敏的IL-18基因修饰的DC疫苗进行体内免疫治疗,能诱导出显著的抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肿瘤基因治疗开辟了新的途径.     

清开灵有效组分对MCAO大鼠脑微血管内皮细胞的影响

目的:观察脑缺血后不同时间段MCAO大鼠血浆ET-1、TXB2、6-keto-PGF1α、vWF表达水平及清开灵注射液有效组分黄芩苷、栀子苷、胆酸、珍珠母水解液对其表达的影响,探讨不同组分对脑缺血后微血管内皮功能状态干预的作用环节.方法:采用大鼠MCAO模型,用放免法检测脑缺血12 h及24 h血浆ET-1、TXB2、6-keto-PGF1α含量,ELISA法检测不同时段血浆vWF的含量.结果:血浆ET-1含量在不同时段均升高,各有效组分于缺血12 h未表现有意义的生物效应,合方、栀子苷阻抑缺血24 h血浆ET-1高表达;血浆TXB2含量在缺血12 h显著升高,除合方外有效组分均有阻抑其高表达作用,其中珍珠母作用更显著,至缺血24 h,MCAO大鼠TXB2表达与正常组差异不显著,黄芩苷、合方能较强的抑制其表达;血浆6-keto-PGF1α含量在缺血后两个时段均显著降低,黄芩苷可升高缺血12 h血浆6-keto-PGF1α水平,珍珠母可升高缺血24 h血浆6-keto-PGF1α水平,胆酸于两个时段均发挥有意义的生物效应;TXB2/6-keto-PGF1α比值在不同时段均显著升高,栀子苷、胆酸、黄芩苷、合方能降低缺血12 h其比值,黄芩苷、合方能降低而栀子苷可升高缺血后24 h其比值;血浆vWF水平于缺血后不同时间段均显著升高,珍珠母在不同时段均有阻抑作用,黄芩苷阻抑缺血12 h vWF释放,栀子苷在缺血12 h、黄芩苷在缺血24 h可升高血浆vWF水平.结论:血浆ET-1、TXA2、PGI2参与了脑缺血后脑组织损伤的病理过程而致微血管挛缩、血管内皮受损,清开灵中有效组分能通过多环节的综合作用不同程度的阻抑血浆ET-1、TXB2的表达,增加6-keto-PGF1α的表达,降低TXB2/6-keto-PGF1α的比值和vWF含量,从而减轻内皮细胞损伤,改善微血管灌流.     

中药息敏饮的抗炎作用

通过炎症部位PGE2检测，有核细胞浸润测定和角叉菜胶诱发大鼠足爪肿胀实验，观察中药息敏饮的抗炎作用。结果表明，息敏饮抑制炎症部位PGE2的产生和有核细胞的浸润，效果与消炎痛一致。角叉菜胶诱发的大鼠足爪水肿，初期息敏饮的疗效优于消炎痛；二期和后期水肿，息敏饮与消炎痛的作用效果类似。     

清开灵有效组份对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞间黏附分子表达的影响

脑缺血后脑组织的炎症损伤反应因其预后差，死亡率高，而日益受到人们的关注，已成为该领域的研究热点。此炎症反应是以脑微血管内白细胞聚集并穿越血管壁，浸润脑组织，同时伴有微血管功能紊乱，局部脑组织中液体和血浆蛋白积聚为标志的急性炎症。白细胞转化为病源性细胞之前，必须与内皮紧密相连，     

清开灵有效组份对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞间黏附分子表达的影响

脑缺血后脑组织的炎症损伤反应因其预后差，死亡率高，而日益受到人们的关注，已成为该领域的研究热点。此炎症反应是以脑微血管内白细胞聚集并穿越血管壁，浸润脑组织，同时伴有微血管功能紊乱，局部脑组织中液体和血浆蛋白积聚为标志的急性炎症。白细胞转化为病源性细胞之前，必须与内皮紧密相连，