壳聚糖纳米粒的制备及体外抗幽门螺杆菌效果评价◆

背景：壳聚糖是甲壳素的脱乙酰产物,这种碱性氨基多糖具有天然抗菌活性,且抗菌广谱,但将其纳米化后抗幽门螺杆菌作用的报道较少。 目的：制备壳聚糖纳米粒并评价其体外抗幽门螺杆菌的疗效。 设计、时间及地点：体外对比观察实验,于2008-03/10在中南大学湘雅医院卫生部纳米生物技术重点实验室完成。 材料：采用聚合物分散法用脱乙酰度分别为88.5%和95%的2种壳聚糖粉末制备壳聚糖纳米粒。 方法：取0.5 mL含幽门螺杆菌(NCTC11639和NCTC11637)5×108 CFU/mL的布氏肉汤菌液均匀涂布于培养基上待干燥后,采用打孔法检验不同质量浓度(5,10,15,20 g/L),不同pH值(pH=6,5,4)和不同脱乙酰度(88.5%和95%)壳聚糖纳米粒溶液的抑菌效果。 主要观察指标：抑菌环直径。抑菌环直径越大,说明该菌对此药敏感性越大,抗菌效果越好;反之越小,抗菌效果越差;若无抑菌环,则说明该菌对此药具有耐药性。 结果：pH值在4~6时,壳聚糖纳米粒的抑菌作用与pH值呈负相关(P < 0.01),且在pH值为4时的抑菌效果最强。2种不同脱乙酰度壳聚糖对幽门螺杆菌的抑菌作用差异有显著性意义(P < 0.05),壳聚糖纳米粒(脱乙酰度95%)的抑菌效果优于壳聚糖纳米粒(脱乙酰度88.5%),在质量浓度处于5~20 g/L时抗幽门螺杆菌的作用差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：壳聚糖纳米粒提高了在体外对幽门螺杆菌的抑菌作用,且此作用在酸性条件下明显增强。用脱乙酰度为95%的壳聚糖粉末制备的壳聚糖纳米粒具有更好的抑幽门螺杆菌的作用。     

促进我国纳米生物医学高端创新人才培养的对策

该文针对我国纳米生物医学高端创新人才现状,从人才培养环境、平台建设、专业教育、质量保障与评价机制、激励机制、选拔机制等方面提出人才培养的对策.特别强调加快学科带头人的培养,重在培养年轻的高端创新人才.     

壳聚糖纳米粒的制备及体外抗幽门螺杆菌效果评价

背景:壳聚糖是甲壳素的脱乙酰产物,这种碱性氨基多糖具有天然抗菌活性,且抗菌广谱,但将其纳米化后抗幽门螺杆菌作用的报道较少.目的:制备壳聚糖纳米粒并评价其体外抗幽门螺杆菌的疗效.设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2008-03/10在中南大学湘雅医院卫生部纳米生物技术重点实验室完成.材料:采用聚合物分散法用脱乙酰度分别为88.5%和95%的2种壳聚糖粉末制各壳聚糖纳米粒.方法:取0.5mL.含幽门螺杆菌(NCTC11639和NCTC11637)5×108 CFU/mL 的布氏肉汤菌液均匀涂布于培养基上待干燥后,采用打孔法检验不同质量浓度(5,10,15,20 g/L),不同pH值(pH=6,5,4)和不同脱乙酰度(88.5%和95%)壳聚糖纳米粒溶液的抑菌效果.主要观察指标:抑菌环直径.抑菌环直径越大,说明该菌对此药敏感性越大,抗菌效果越好;反之越小,抗菌效果越差;若无抑菌环,则说明该菌对此药具有耐药性.结果:pH值在4～6时,壳聚糖纳米粒的抑菌作用与pH值呈负相关(P＜0.01),且在pH值为4时的抑菌效果最强.2种不同脱乙酰度壳聚糖对幽门螺杆菌的抑菌作用差异有显著性意义(P＜0.05),壳聚精纳米粒(脱乙酰度95%)的抑菌效果优于壳聚糖纳米粒(脱乙酰度88.5%),在质量浓度处于5～20 g/L时抗幽门螺杆菌的作用差异无显著性意义(P＞0.05).结论:壳聚糖纳米粒提高了在体外对幽门螺杆菌的抑菌作用,且此作用在酸性条件下明显增强.用脱乙酰度为95%的壳聚糖粉末制备的壳聚糖纳米粒具有更好的抑幽门螺杆菌的作用.     

纳米磁流体介导的重组pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性肝癌细胞HepG2的杀伤作用的体外实验

目的: 探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用.方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK 并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2 及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下动态观察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2 细胞中TK 基因的表达情况,MTT法检测转染重组TK表达质粒后的细胞在更昔洛韦(GCV)作用下的存活率并观察旁观者效应,用流式细胞术分析HepG2细胞的凋亡.结果:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转入AFP阳性的HepG2 细胞,其转染效率高于脂质体;RT-PCR 及Western blot证明转染的AFP阳性的HepG2 细胞有TK基因的表达;MTT 及流式细胞术分析说明TK基因发挥杀伤细胞作用.结论:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体,采用AFP增强子可使目的基因在HepG2 细胞中特异性表达,并且在前药GCV的作用下,能使AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2发生凋亡及旁观者效应.     

我国纳米生物医学高端创新人才的培养对纳米生物医学产业化的作用

该文在对我国纳米生物医学高端创新人才现状进行分析的基础上.根据柯布-道格拉斯函数建立回归模型,研究我国纳米生物医学高端创新人才的培养对纳米生物医学产业化的作用.     

阳离子氧化铁纳米粒作为基因载体的体外实验研究

目的 探讨阳离子氧化铁纳米粒(Cationic IONPs)的制备及其作为体外基因裁体的可行性.方法 改进的共沉淀法制备Fe3O4纳米粒,利用3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)进行表面修饰.利用原子力显微镜,激光粒度分析仪,琼脂糖凝胶电泳等手段对Cationic IONPs的形貌、粒径、Zeta电位、DNA结合能力等进行表征.以增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-C1)作为靶基因,荧光显微镜和流式细胞仪分别观察和测定Cationic IONPs和脂质体体外转染效率. 结果 Cationic IONPs粒径为(32.1±1.8)nm,在pH=7条件下,Zeta电位为(13.5±1.6)mV,与质粒质量比为1:1时结合效率最高,可以携带pEGFP-C1进入细胞并获得表达,转染效率为(32.8±5.2)%,高于阳性对照组LipofectamineTM 2000转染效率(28.8±5.6)%.结论 氨基硅烷偶联剂修饰的氧化铁纳米粒是一种可用于体外转染的新型非病毒载体.