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用超选择免疫法,诱导BALB/c小鼠对正常人肝细胞抗原产生选择性低免疫反应后,二步腹腔注射人肝癌细胞悬液,2~4周后用人肝癌细胞作强化免疫动物1次,取出脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG法融合制备杂交瘤。采用细胞抗原ELISA法,同时测定培养上清对肝癌细胞及正常肝细胞的免疫反应,筛出一株能稳定分泌抗人肝癌细胞膜抗原的单克隆抗体(HCMP-1MAb)的杂交瘤细胞株。HCMP-1MAb是一种IgG2a亚型的单抗,它与HBsAg、HBcAg、HBeAg等乙型肝炎病毒相关抗原无交叉免疫反应,与AFP-亦无阳性反应。免疫萤光法证实HCMP-1MAb对QGY-7703、BEL-7402及SMMC-7721等人肝癌细胞株呈阳性反应。改良ABC免疫组织化学证明HCMP-1MAb与肝细胞癌组织呈阳性反应。说明HCMP-1MAb对肝癌反应的阳性率较高,特导性较好。超选择免疫法,先联合应用免疫抑制药物使动物对正常肝细胞抗原产生低免疫反应性。再以肝癌细胞免疫时,有利于动物免疫系统对肿瘤相关抗原的识别及特异性抗体的产生。从而提高了杂交瘤制备的成功率。我们认为这一方法在单抗制备方面有较高的应用价值。 相似文献
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