流感嗜血杆菌基因分型研究

目的应用生物学分型、血清学分型和脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分析从健康人群分离的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)的分子流行病学规律以及与Hi生物学分型、血清学分型、青酶素酶之间的关系。方法对深圳市1月龄以上380名健康人群采集咽拭子,共分离培养175株流感嗜血杆菌,参照Pitt-man方法对菌株进行血清学分型,应用PCR方法进行流感嗜血杆菌属及荚膜鉴定,参照Kilian方法对其中的141株菌株进行生物学分型,从不同年龄组选出共59株流感嗜血杆菌株,应用PFGE技术进行分子分型研究。结果 141株流感嗜血杆菌分为8个生物型,Ⅰ~Ⅷ型分别为8.51%、36.88%、34.04%、4.96%、7.80%、0.71%、6.38%、0.71%。分离的菌株以无荚膜的不可分型Hi为主(97.14%),5株为有荚膜型,其中2株为b型,3株为e型,Hi产青霉素酶的阳性率为14.18%,59株Hi菌株分为52个PFGE基因型。结论深圳市健康人群Hi携带菌株多为无荚膜的不可分型流感嗜血杆菌,生物学分型以Ⅱ、Ⅲ型为主。PGFE基因分型呈明显的多态性。     

肠炎沙门菌PFGE分子分型及耐药性研究

目的：对本地区及相邻地区2004～2007年分离的肠炎沙门菌菌株的分子分型及耐药性进行分析。方法：采用PFGE进行分子分型,利用药敏卡通过仪器对分离菌株进行药敏检测。结果：5起肠炎沙门菌食物中毒分离的菌株分成3型,其中2型之间存在3条带的差异,菌株间有相近关系。结论：PFGE是一种非常有效的分子分型方法,建立细菌PFGE指纹图谱数据库及PulseNet,对于控制食源性疾病非常重要。     

深圳市南山区1～15岁健康人群百日咳和白喉抗体水平调查

目的了解南山区1-15岁健康人群百日咳毒素抗体、百日咳Ig G总抗体、白喉抗体水平,为疫苗接种政策的评估提供依据。方法采用整群抽样的方法,采集1-3、4-6、7-9、10-12和13-15岁组不同年龄段人群的血清,用酶联免疫吸附试验检测血清中的百日咳毒素（PT）抗体、百日咳Ig G总抗体和白喉抗体水平。结果共收集到256份1-15岁人群的血清标本,PT抗体均数是10.17 IU/m L（95%CI：8.26-12.18 IU/m L）,PT抗体总阳性率为6.25%,13-15岁组PT抗体（17.40 IU/m L,95%CI：10.88-24.71）高于其他年龄组,差异有统计学意义（P〈0.05）。百日咳Ig G总抗体均数是47.91IU/m L（95%CI：41.14-54.37 IU/m L）,总阳性率为37.50%。白喉抗体均数为1.95 IU/m L（95%CI：1.21-2.69 IU/m L）,4-6岁组白喉抗体水平（6.57 IU/m L,95%CI 3.36-9.78 IU/m L）高于其他年龄组,差异有统计学意义（P〈0.05）,白喉抗体总阳性率为69.14%。各年龄组的3种抗体阳性率差异均无统计学意义。结论 13-15岁组青少年是百日咳感染的危险人群,有必要调整我国的百日咳疫苗接种政策,进行青少年百日咳疫苗的加强免疫。白喉抗体阳性率相对较高,形成有效的免疫屏障。     

深圳市南山区流感流行特征分析

目的 分析深圳市南山区2015—2017年流感病例的流行病学特征及一般人群血清抗体水平,初步预测流行趋势,为流感防控提供有效依据。方法 收集2015—2017年哨点医院以及暴发疫情的流感样病例（ILI）的鼻咽拭子标本, 采用实时荧光定量 PCR技术对采集的鼻咽拭子标本进行病毒鉴定;采用微量半致敏血凝抑制方法（HI）对一般人群血清抗体进行检测。结果 2015—2017年深圳市南山区哨点医院共采集ILI 鼻咽拭子样本784份,检出阳性标本208份（26.53%）;共报告ILI暴发疫情175起,累计报告病例数367例。哨点医院和流感暴发疫情的ILI检测结果在时间分布上基本一致。一般人群血清学检测结果显示一年中某亚型的流感病毒活动性越强,人群针对该亚型流感病毒的抗体阳性率及GMT值随之升高。结论 南山区流感流行特征有一定规律,每年1—7月份为季节性流感的发病高峰期。一般人群抗体水平随着ILI流行特征的变化而发生变化。ILI流性特征与流感病毒活动趋势基本一致。     

深圳市腹泻患者、禽源和牛源空肠弯曲菌的脉冲场凝胶电泳分析

目的 对深圳市禽源、牛源空肠弯曲菌进行脉冲场凝胶电泳,与相同时期和地区腹泻患者分离的空肠弯曲菌比较,寻找空肠弯曲菌传播的证据。方法 对深圳市2016年3—11月分离的不同来源空肠弯曲菌进行复苏、鉴定和脉冲场凝胶电泳,应用BioNumerics软件进行聚类分析。结果 共收集到空肠弯曲菌126株,其中腹泻患者来源22株、禽源44株、牛源60株。除3株不能分型外,其他123株菌成功获得PFGE图谱。不同来源空肠弯曲菌呈现不同的基因特征：人源菌株PFGE带型高度多态化,未发现集中型别;P1是禽源空肠弯曲菌的主要型别;牛源菌株呈现多型别分布,主要型别有C1~C6。综合分析发现,有3个型别（T1、T2和T3）同时包含患者和禽牛来源的菌株。T1型别有12株菌,分别来自患者（3株）、禽类（6株）和牛（3株）,T2型别包含5株菌,来自患者（1株）、禽类（2株）和牛（2株）;T3型别包含7株菌,仅来自患者（1株）和牛（6株）。结论 本研究发现3个空肠弯曲菌型别（T1,T2和T3）同时包含腹泻患者和禽牛来源菌株,为空肠弯曲菌的溯源提供证据。T1可能是深圳市空肠弯曲菌的主要流行型别,在腹泻患者、禽源、牛源菌株中均有分布。     

深圳市健康人群2005-2006年A、C、Y和W135群流脑抗体水平的测定

目的 了解2005-2006年深圳市健康人群A、C、Y和W135群流脑抗体水平,为制定有效的预防控制措施提供依据.方法 2005年11月至2006年5月采集深圳市健康人群血液样本,采用酶联免疫试剂盒定量测定血清样本中A、C、Y、W135群流脑抗体含量.结果 共采集800份血液样本,A、C、Y、W135群流脑抗体平均含量中位数分别是4.07、2.31、1.35和1.75μg/mL,抗体阳性率分别为68.4%、57.1%、32.4%和41.8%.A群抗体含量中位数较高的年龄组是5～9岁(6.19μg/mL)、15～24岁(5.52μg/mL)和0～4岁(5.32μg/mL),较低的是≥45岁(2.68μg/mL)和35～44岁(2.01μg/mL);C群抗体含量中位数较高的是0～4岁(3.70μg/mL)、10～14岁(3.34μg/mL),较低的是15～24岁(1.84μg/mL);Y群抗体含量中位数除5～9组(0.55μg/mL)较低外,其他均在1.21～1.68μg/mL之间;W135群抗体含量中位数在1.34～2.01μg/mL之间.结论 深圳市35岁以上健康人群的A群流脑抗体水平以及各年龄段Y群和W135群流脑抗体水平均较低.     

深圳市中央空调冷却塔军团菌核糖体基因型研究

军团病(Legionnaires' disease)是由军团菌感染引起的以肺炎为主要症状的急性呼吸道传染病,嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,Lp)是引起军团病的主要菌群。目前研究发现军团菌广泛存在于自然界的土壤和各种水环境中,中央空调冷却塔是军团菌主要的传染源,近30年来军团病大的暴发多与中央空调冷却塔被军团菌污染有关。     

实时荧光PCR法检测b型流感嗜血杆菌

目的利用荧光定量PCR技术,建立b型流感嗜血杆菌的快速敏感特异的检测方法。方法以b型流感嗜血杆菌荚膜基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以b型流感嗜血杆菌菌株,提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和退火温度。以b型流感嗜血杆菌和8种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为800 nM、200 nM,退火温度为56℃时,具有良好的特异性和敏感性。在8株相关菌株的检测中,除b型流感嗜血杆菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。在纯菌条件下,定量检测低限100 cfu/mL。稳定性分析表明:同一样品重复检测4次C t值的最大变异系数为5.46%。与常规方法比较,符合率达100%。结论该方法特异性强,稳定性高,操作简便快速,具有较大的推广及应用价值。     

深圳市学龄前儿童流感嗜血杆菌带菌情况及分型研究

目的了解深圳市健康学龄前儿童口咽部流感嗜血杆菌（Haemophilus influenza,Hi）携带情况及菌型特点。方法选择深圳市具有代表性的3所日托幼儿园健康儿童181名,进行口咽部Hi携带率监测,Hi分离株进一步作生物学分型、血清分型及PFGE分子分型。结果从181份样品中共分离到Hi45株,阳性率为24．9％。生物学分型分别为Ⅰ型2株（4．4％）、Ⅱ型13株（28．9％）、Ⅲ型18株（40．0％）、Ⅳ型2株（4．4％）、Ⅴ型2株（4．4％）、Ⅵ型2株（4．4％）、Ⅶ型0、Ⅷ型6株（13．3％）。血清分型为不可分型44株,占97．8％（44／45）,b型为1株,占2．2％（1／45）。PFGE分型：39株血清不可分型}H分为38个基因型。结论深圳市学龄前健康儿童口咽部Hi携带率为24．9％,与国内南方各大城市无差异,生物学分型以Ⅱ型、Ⅲ型为主,PFGE结果显示,深圳市学龄前儿童携带的Hi菌株基因高度多态性,无优势菌株。     

臭氧被服消毒机杀菌效果的影响因素研究

目的研究臭氧被服消毒机消毒效果的影响因素。方法采用载体定量杀菌法,在不同的臭氧浓度、相对湿度、温度、有机物浓度、载体条件下,观察消毒机杀菌效果。结果开机20min,消毒袋内臭氧达到765.21mg/m3,温度恒定,湿度为50%、70%、90%时,消毒机对金黄色葡萄球菌的杀灭率分别为90.96%、95.46%、99.35%;温度、湿度恒定,含0、25%、50%小牛血清的菌悬液,其细菌杀灭率分别是95.56%、68.36%、66.42%;温度和载体对杀菌效果影响不明显。结论臭氧被服消毒机杀菌效果受相对湿度、有机物影响较大,在实际操作中,应充分考虑这些因素,以保证消毒效果。