基于IL-17、IL-31/STAT3信号通路探讨马齿苋对急性湿疹大鼠炎症和瘙痒反应的影响

目的 研究马齿苋对急性湿疹模型大鼠皮肤组织IL-17、IL-31表达的影响及其对IL-17、IL-31/STAT3信号通路的调控作用，探讨其治疗急性湿疹可能机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组和马齿苋组，每组8只。对模型组和马齿苋组采用2,4-硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹动物模型。成功造模后，分别给予模型组无菌蒸馏水和马齿苋组予马齿苋液。待观察大鼠一般情况后，断颈处死动物，剪去皮肤。对皮肤组织进行病理HE染色观察其病理改变，并做病理损伤评分，免疫组化染色检测IL-17、IL-31、STAT3的积分光密度，并进行统计学分析。结果 与正常组相比，模型组大鼠皮肤组织IL-17、IL-31、STAT3蛋白含量明显升高，具有显著的统计学意义(P<0.01)。与模型组相比，马齿苋组IL-17和IL-31蛋白含量降低，具有统计学意义(P<0.05),STAT3蛋白含量有一定的下降趋势，但不具有统计学意义(P>0.05)。结论 马齿苋可通过减少大鼠皮肤组织IL-17、IL-31的含量达到治疗急性湿疹的作用。急性湿疹的发病机制可能是通过抑制炎症信号通路IL-17/STA...     

二氢丹参酮Ⅰ联合氨苄西林对生物膜阳性MRSE耐药基因表达的影响

目的:探讨二氢丹参酮Ⅰ联合氨苄西林对生物膜阳性的耐甲氧西林表皮葡萄球菌(methicillin resistant S.epidermidis,MRSE)耐药基因mecA表达的影响。方法:筛选mecA阳性MRSE临床菌株,体外建立生物膜模型,使用抑制生物膜最小的联合用药部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)药物组合、各单用药物以及阳性对照药物万古霉素进行干预,qRT-PCR检测mecA基因、ELISA检测青霉素结合蛋白2a(penicilin binding protein 2a,PBP2a)的表达。结果:2μg﹒mL~(-1)氨苄西林与2μg﹒mL~(-1)二氢丹参酮Ⅰ联用组抑制了SE21021菌株mecA、PBP2a的表达(P0.05),且联用组PBP2a低于氨苄西林组、万古霉素组(P0.05)。各组药物均促进了SE26508菌株mecA基因的表达(P0.05),但是联用组mecA基因的表达相对低于氨苄西林单用组、二氢丹参酮Ⅰ单用组、万古霉素组(P0.05);联用组能够抑制PBP2a的表达,但是效果不如氨苄西林单用组、二氢丹参酮Ⅰ单用组(P0.05)。联用组同时抑制了SE30291菌株mecA和PBP2a蛋白的表达,但无统计学意义(P0.05)。结论:二氢丹参酮Ⅰ和氨苄西林联用可能对生物膜阳性MRSE具有抑制作用,但需要加大菌株数量进一步深入研究求证。     

二氢丹参酮Ⅰ协同氨苄西林对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响研究

目的探讨丹参酮单体与β-内酰胺类抗菌药物联用对表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)早期生物膜形成的抑制作用及其机制。方法采用半定量黏附实验检测SE生物膜基质含量、XTT实验检测膜内菌代谢活性,以及qRT-PCR检测生物膜形成关键基因,来验证丹参酮单体与β-内酰胺类抗菌药物联用的药效作用及可能的机制。结果 2μg/ml的二氢丹参酮Ⅰ和2μg/ml的氨苄西林联用对SE生物膜具有协同抑制作用(FICI0.5);两药联用可明显抑制SE黏附(6h)、聚集阶段(24h)基质形成,影响生物膜内细菌代谢活性并杀死细菌,且联用组优于2μg/ml二氢丹参酮Ⅰ、2μg/ml氨苄西林单药组;联用组降低了黏附阶段SE生物膜形成关键基因icaA、atlE、aap和stk的表达量,但并不能抑制聚集阶段上述基因的表达。结论二氢丹参酮Ⅰ和氨苄西林联用对SE生物膜形成早期具有协同抑制作用,其机制可能与影响基质形成、细胞代谢活性以及生物膜形成关键基因的表达有关。     

基于H1R、PAR-2/ TRPV1 痒信号通路探讨马齿苋对急性湿疹的干预作用

目的:探讨马齿苋提取液对急性湿疹大鼠背部皮肤组胺受体1(H1R)、蛋白酶激活受体2(PAR-2)和瞬时感受器电位受体1(TRPV1)表达的影响及其对H1R、PAR-2/ TRPV1 信号通路的调控作用。方法:SD 大鼠30 只,分为正常组、模型组、马齿苋组,各组10 只。采用二硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹模型,正常组除外。造模成功后,各组分别给予相应药物。末次给药后对各组大鼠进行湿疹面积及严重度指数(EASI)评分。免疫组化法检测H1R、PAR-2 和TRPV1 的表达,流式细胞技术测定细胞内钙离子(Ca2+ )浓度。结果:与正常组比,模型组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.05)和PAR-2(P<0.01)的含量、Ca2+浓度(P<0.01)显著增加,TRPV1 增加差异不明显(P>0.05)。与模型组比,马齿苋组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.01)和PAR-2(P<0.01)的含量及Ca2+ 浓度(P<0.05)显著减少,TRPV1 减少差异不明显(P>0.05)。结论:马齿苋可减少H1R、PAR-2 含量及降低Ca2+浓度,发挥治疗急性湿疹的作用,其机制可能是通过降低上游分子H1R、PAR-2 含量,使其下游分子TRPV1 失活,减少Ca2+内流,达到抗瘙痒的作用。     

马齿苋提取液通过IL-4途径对急性湿疹大鼠皮肤屏障功能和免疫反应的调控作用

目的通过白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)对皮肤屏障功能和免疫反应的调控探讨马齿苋提取液治疗急性湿疹的可能机制。方法 SD大鼠30只,分层随机分为3组,正常组、模型组和马齿苋组,各组10只。除正常组外其余各组采用二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB)建立急性湿疹模型。造模成功后,模型组和马齿苋组分别外敷1ml无菌蒸馏水和马齿苋提取液,正常组不做任何处理。用药后,采用皮肤表皮水分丧失测定仪测定各实验组大鼠经皮水分丢失量(transepidermal water loss,TEWL);ELISA技术检测大鼠血清中总免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)的含量;免疫组化法(SP法)染色IL-4和蛋白酶激活受体2(protease activated receptor-2,PAR-2)并采用病理图像分析系统半定量检测其含量。结果与正常组比,模型组大鼠IgE、IL-4、PAR-2和TEWL显著增加(P0.01);与模型组比,马齿苋组大鼠IgE、IL-4、PAR-2和TEWL显著降低(P0.05)。结论马齿苋提取液可通过抑制IL-4的分泌,降低IgE的释放,调节免疫反应,同时抑制PAR-2的表达,降低TEWL,恢复皮肤屏障功能,达到治疗急性湿疹的作用。