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1.
树突状细胞负载肝癌抗原肽疫苗体外诱导特异性免疫学反应的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:研究树突状细胞(dendritic cell,DC)负载肝癌抗原肽EPVTKAEML体外诱导特异性CTL的能力及其抑癌效果。方法:用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR—SSP)选择HLA—B7表型供者,从脾组织中分离、培养DC-EPVTKAEML特异性CTL。用^51Cr释放法检测CTL的杀伤活性,并用抗HLA-1分子单抗(mAb)进行杀伤抑制实验。结果:找到4例HLA-B7杂合子供者,用DC负载HLA-B7限制的抗原肽EPVTKAEML可诱导特异性CTL反应,对肝癌细胞HHCC有较强的杀伤作用。结论:DC负载抗原肽EPVTKAEML在体外可诱发较强的特异性免疫反应。 相似文献
2.
间隙连接(connexin,Cx)是细胞间的蛋白通道结构,由相邻胞膜上的连接子(connexon)相互衔接而成。通过Cx介导的细胞间连接通讯(gapjunctionintercelularcommunication,GJIC),对细胞的增殖、分化进行... 相似文献
3.
作者采用PharmaciaSephacrylS—300凝胶色谱柱,建立了IgG类McAb的一步法制各级纯化方法。该法是将McAb腹水直接上样,用pH7.410mmol/LPBS洗脱(流速0.5ml/min),即得到纯化的McAb。一次上样量40~50ml腹水,回收率为85%-90%.整个纯化周期4h。纯化的McAb经SDS—PAGE测定,纯度>90%,免疫组化ABC法测定活性为1:80000(7.8×10-11mol/L)。该法操作简单、快速,只要有一台核酸/蛋白检测仪,便可进行制备级水平的纯化。 相似文献
4.
目的:构建受AFP顺式作用元件调控的超抗原表达载体,将SEA(D227A)特异性的表达于AFP阳性肝癌细胞膜表面。方法:PCR扩增AFP基因启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)。将上述片断插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,构建AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体(pLXSN SEA(D227A)—linker—CD80tm)。通过脂质体介导,以表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系,用RT—PCR和间接免疫荧光染色,检测SEA的表达。结果:成功地将AFP基因的启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)克隆到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,酶切鉴定和DNA序列分析无误,RT—PCR和间接免疫荧光法检测证实,SEA(D227A)能在AFP阳性的肝癌细胞膜特异性表达。结论:AFP顺式作用元件修饰的超抗原表达载体的构建,为下一步用其强化肝癌的免疫治疗奠定了基础。 相似文献
5.
目的: 制备高效价、特异性的兔抗人MAGE-n血清。方法: 对原核表达的MAGE-n蛋白进行纯化, 与弗氏佐剂混合免疫新西兰兔制备抗血清, 用硫酸铵盐析法及溴化氰活化的Sephrose4B(CNBr-ActivatedSephrose4B)亲和层析柱纯化抗血清, 以双向免疫扩散实验、ELISA、Westernblot和免疫组化对兔抗人MAGE-n血清进行鉴定。结果: 经免疫得到高效价的兔抗人MAGE-n血清, 抗血清能够与MAGE-n特异性结合, 免疫组化结果表明MAGE-n是一种胞质蛋白。结论: 用MAGE-n蛋白与弗氏佐剂混合免疫兔, 制备得到高效价的抗血清, 纯化后的特异性兔抗人MAGE-n血清, 为进一步研究MAGE-n在各种组织中的表达奠定了基础。 相似文献
6.
几十年来 ,人们致力于肿瘤疫苗的研究 ,旨在激活患者自身的免疫系统 ,产生持久有效的抗肿瘤免疫。在肿瘤疫苗治疗前后 ,如何准确地定量、定性判定肿瘤抗原特异性T细胞应答 ,评价疗效 ,是影响抗肿瘤疫苗发展的关键。51 Cr释放法和有限稀释法 (limitingdilutionanalyses,LDA) ,一直被认为是评价特异性T细胞反应的金标准 ,但实践证明这两种方法费时、费力且敏感性低。近 5、6年来 ,一些评价T细胞功能和特异性的新方法逐渐建立起来[1 ,2 ] ,由于这些方法更加敏感 ,提供的信息更有意义。尤为重要的是 ,有的方法… 相似文献
7.
冻存细胞计算机管理软件的研制及应用(摘要)杨连君陈志南隋延仿米力曲萍(第四军医大学病理学教研室,西安710032)我们编制了冻存细胞计算机管理软件—CM(CelManager),可对冻存的细胞系或细胞株进行自动管理、查询和统计归类。CM软件的主控程... 相似文献
8.
本文报道用临床手术切除的肝癌标本制备细胞悬液直接免疫BALB/c小鼠与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,在筛选过程中获得一株抗血管内皮细胞的单克隆抗体。该细胞株稳定地在体外连续培养四个月。抗体能直接用于常规福尔马林固定的石蜡包埋的切片染色,不需胰酶消化。经A.B.C法免疫组化染色证明,对全身各脏器血管内皮细胞定位以及30例各种类型血管瘤的内皮细胞染色均呈阳性反应。对起源于内皮细胞的5例血管内皮细胞肉瘤定位4例阳性,1例为阴性。而对血管外皮细胞肉瘤却大部份呈阴性反应。与内皮细胞以外的组织无交叉反应。提示此抗体能识别的抗原可能是Ⅷ因子相关抗原,它对起源于血管的软组织肿瘤的鉴别诊断及免疫组化定位有一定的应用价值。 相似文献
9.
Objective: To observe the expression of human leukocytic antigen DR (HLA-DR) in primary hepatocellular carcinoma (HCC) and its up-regulation by interferon (IFN). Methods: The expression of HLA-DR in 46 specimens of human HCC tissues, 4 human HCC cell lines (SMMC-7721, HCC-9204, BEL-7402 and HHCC) and a human hepatocyte cell line QZG was respectively detected by immunohistochemical ABC staining and flow cytometry. The expression of HLA-DR in the 5 cell lines was detected by ELISA before and after the cells were treated with IFN-γ or IFN-α. Results:Eighteen out of 46 HCC tissues (39.1%) expressed HLA-DR, whereas all the normal liver tissues immediately adjacent to HCC tissues were HLA-DR-negative. No obvious HLA-DR-positive staining was found in all the 5 cell lines. The expression of HLA-DR was up-regulated in all the 5 cell lines after IFN-γ or IFN-α treatment. The up-regulation of HI A-DR in QZG cells was less obvious than that in HCC cell lines. The effect of IFN-γ was more significant than that of IFN-α. Conclusion: HCC tissues can express HLA-DR to some extent, but HCC cell lines do not express detectable HLA-DR. IFN can up-regulate HLA-DR expression in HCC cells. 相似文献
10.