外周血单个核细胞宫腔内灌注治疗对反复种植失败患者妊娠结局的影响

目的探讨自体外周血单个核细胞（PBMCs）宫腔内灌注治疗对反复种植失败（RIF）患者胚胎种植率和临床妊娠率的影响。方法按随机数字表法将纳入的39例拟行冷冻胚胎移植的RIF患者随机分为治疗组（20例）和对照组（19例）,治疗组在移植前3d抽取外周血20ml,应用淋巴细胞分离液分离PBMC后行宫腔灌注。对照组移植前未行自体PBMC宫腔灌注。结果两组患者年龄、血清卵泡刺激激素（FsH）、取卵周期数、移植周期数、移植胚胎数和单周期移植优质胚胎数均无统计学差异（P〉0．05）。两组胚胎种植率（22．8％VS．6．4％）和临床妊娠率（50．0％VS．17．6％）比较,治疗组均显著高于对照组（P％0．05）。两组单周期活婴出生率（45．0％VS．17．6％）比较无统计学差异（P〉0．05）。结论自体PBMC宫腔内灌注治疗可以提高RIF患者胚胎种植率和临床妊娠率,故可作为RIF患者胚胎移植前提供可选择的处理方案。     

HLA—DQA1／DQB1组织相容性及不同来源淋巴细胞在免疫治疗中对复发性流产患者封闭抗体产生的影响

目的探讨夫妇双方HLA—DQA1／DQB1组织相容位点匹配个数及丈夫或第三方淋巴细胞免疫治疗（LIT）对复发性流产患者封闭抗体水平的影响。方法选取2010年10月至2012年6月在本院确诊为不明原因复发性流产患者177例。治疗前分别检测患者夫妇双方HLA—DQA1和HLA—DQB1基因型,根据血液传播疾病筛查结果选择丈夫（140例）或第三方健康个体（37例）淋巴细胞经皮内注射免疫治疗3次,分别在治疗前和治疗后以流式细胞术交叉配型实验（FCXM）检测抗丈夫淋巴细胞抗体（APLA）和抗第三方淋巴细胞抗体（ATLA）的水平。结果HLA—DQA1／DQB1组织相容性匹配程度不同的夫妇在LIT后APLA无统计学差异（P〉O．05）;丈夫和第三方LIT诱导产生的封闭抗体（包括APLA和ATLA）均显著高于治疗前（P〈O．05）;丈夫LIT诱导产生的APLA显著高于第三方LIT（P~0．05）;第三方LIT诱导产生的ATLA显著高于APLA（P〈O．05）。结论HLA—DQA1／DQB1组织相容性增高在LIT中对封闭抗体产生无影响。在封闭抗体生成水平上,丈夫LIT效果优于第三方uT。     

维生素D对复发性流产患者外周血自然杀伤细胞的调节作用

目的探讨维生素D对复发性流产(recurrent miscarriage,RM)患者外周血自然杀伤细胞(natural killer cells,NK)的调节作用。方法收集99例RM患者黄体中期的外周血,流式细胞术检测外周血NK细胞的数量和细胞毒性。根据患者体内维生素D水平将其分为三组:维生素D正常组(vitamin D normal,VDN)、维生素D不足组(vitamin D insufficiency,VDI)和维生素D缺乏组(vitamin D deficiency,VDD)。对维生素D缺乏和不足的RM患者补充1,25(OH)2D,分析维生素D补充对RM患者的NK细胞的调节作用。结果 CD3~-CD56~+NK细胞比例在三组间无显著差异(P0.05)。VDI组中NK细胞毒性在效靶比(effector-to-target ratio,E:T)为50∶1(51.6±8.8 vs.45.3±12.4)(P0.05)、25∶1(43.2±9.1 vs.35.8±11.8)(P0.01)和12.5∶1(30.2±10.3 vs.23.0±10.6)(P0.01)这三个条件下均显著高于VDN组。补充维生素D后,可显著降低E:T为50∶1(41.6±14.0 vs.51.0±10.5)(P0.01)、25∶1(34.9±14.3 vs.43.1±10.8)(P0.01)和12.5∶1(22.6±11.4 vs.29.9±10.7)(P0.01)的NK细胞毒性。结论低水平维生素D的RM患者外周血NK细胞毒性增加,而补充1,25(OH)2D可在一定程度上降调NK细胞毒性。     

CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)调节性B细胞在复发性流产合并抗磷脂综合征患者中的表达及意义

目的探讨调节性B细胞(Breg)在复发性流产(RM)合并抗磷脂综合征(APS)中的作用。方法应用流式细胞术检测11例对照女性、18例复发性流产合并抗磷脂综合征患者(APS/RM)和37例无抗磷脂综合征的复发性流产患者(Non-APS/RM)外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例及表达IFN-γ或TNF-α的辅助性T细胞(Th)的比例。结果与对照组相比较,CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例在APS/RM组[(3.42±1.31)%vs.(7.16±1.28)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(4.79±1.10)%vs.(7.16±1.28)%,P0.01]显著降低,外周血表达IFN-γ的Th细胞比例在APS/RM组[(29.20±8.01)%vs.(20.60±2.63)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(25.00±6.06)%vs.(20.60±2.63)%,P0.01]中均显著增高,表达TNF-α的Th细胞比例在APS/RM组[(46.30±7.36)%vs.(29.70±3.94)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(39.70±9.35)%vs.(29.70±3.94)%,P0.01]中亦显著增高。与Non-APS/RM组相比,外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例在APS/RM组显著降低(P0.01),而表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加(P0.05)。相关性分析结果显示,在对照组中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例与表达IFN-γ(r2=0.38,P0.05)或TNF-α(r2=0.49,P0.05)的Th细胞比例呈显著负相关性,而在APS/RM组和Non-APS/RM组中无显著相关性(P0.05)。结论 APS/RM患者存在明显免疫失衡,即表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加,可能与CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

35周岁以下女性囊胚冻融周期移植策略的探讨

目的探讨35周岁以下女性囊胚冻融周期移植策略,以期为保证单个移植周期妊娠率提供参考。方法选择2015年1月1日至2016年10月1日在本院生殖中心行冻融囊胚移植、年龄35岁的患者,共1 539个移植周期。根据囊胚移植数目和囊胚等级分为4组:单优质囊胚移植组(单优组)、双优质囊胚移植组(双优组)、单非优质囊胚移植组(单非优组)、双非优质囊胚移植组(双非优组)。比较4组的临床妊娠率、种植率、早期流产率、继续妊娠率和双胎率。结果双优组的临床妊娠率(77.9%)、种植率(61.0%)、继续妊娠率(90.8%)显著高于单优组、单非优组、双非优组(P均0.05),早期流产率(8.3%)显著低于其它3组(P0.05),但双胎率(47.6%)亦显著高于其它3组(P0.05)。单优组的临床妊娠率(51.6%)、继续妊娠率(80.1%)和早期流产率(18.5%)与双非优组(分别为49.6%、80.2%、18.9%)比较无显著差异(P0.05),但双胎率(2.7%)显著低于双非优组(27.0%)(P0.05)。单非优组的双胎率(1.4%)与单优质组(2.7%)相似,均显著低于双优组、双非优组,但临床妊娠率(37.6%)亦显著低于其它3组(P0.05)。结论 35周岁以下女性囊胚冻融移植周期中,可优先选择移植1个优质冻融囊胚;当无优质冻融囊胚时,可选择移植2个非优质冻融囊胚以保证一定的单个移植周期妊娠率。     

调节性B细胞在妊娠过程中的免疫调节研究进展

由于妊娠独特的免疫学特性,B细胞的多效功能被高度关注。调节性B(Breg)细胞是一类具有负性免疫调节功能的B细胞亚群,可通过产生白介素-10(IL-10)、IL-35和转化生长因子β(TGF-β)等抑制性细胞因子调节免疫耐受。近年来,Breg细胞在妊娠期间母-胎界面和周围血免疫耐受调节过程中的重要作用越来越受到关注,本文对Breg细胞在妊娠过程中的免疫调节进行综述。     

D-二聚体对反复种植失败患者妊娠结局的预测价值

目的探讨D-二聚体与反复种植失败(RIF)患者体外授精-胚胎移植(IVF-ET)后妊娠结局的预测价值。方法 2016年1月至2017年1月在本院就诊的RIF患者在IVF-ET后验孕日(2周),孕早期(6~12周),孕中期(13~24周)以及孕晚期(25~37周)均需抽取枸橼酸钠抗凝血,使用Mini VIDAS全自动化荧光酶标免疫测试系统进行D-二聚体检测。本研究通过回顾性分析,根据妊娠结局将患者分为种植失败组、种植成功(自然流产和成功分娩)组,比较组间D-二聚体水平以及妊娠期D-二聚体水平在孕期的变化情况。结果验孕日,种植失败组与种植成功(自然流产和成功分娩)组的D-二聚体浓度无显著性差异(205ng/ml vs.194ng/ml,P>0.05);孕早期(6~12周),自然流产组与成功分娩组D-二聚体浓度无显著性差异(276ng/ml vs.237ng/ml,P>0.05);成功分娩组患者的D-二聚体浓度随着孕期逐渐升高(F=20.3,P<0.001),并且与孕期呈显著正相关关系(r=0.762,P<0.001)。结论 D-二聚体水平与RIF患者IVF-ET后的种植失败无显著相关性,孕早期D-二聚体的浓度对其早期流产无预测价值,临床医生应根据RIF患者的不同妊娠期的D-二聚体浓度参考范围进行血栓前状态诊断。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因突变与不明原因复发性流产的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因C677T和A1298C突变与不明原因复发性流产（unexplained recurrent miscarriage,u RM）的关系。方法利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphisms,RFLP）方法,检测52例u RM患者（u RM组）和16例可孕妇女（对照组）MTHFR C677T和MTHFR A1298C位点多态性。结果 u RM组中MTHFR 677C/T（26.9%vs 25.0%,P=1.00）和677T/T（17.3%vs 6.3%,P=0.43）基因型频率以及T等位基因频率（30.8%vs 18.8%,P=0.19）高于对照组但无显著性差异;u RM组中MTHFR 1298 A/C（23.1%vs 18.8%,P=0.98）和1298 C/C（13.5%vs 12.5%,P=0.73）基因型频率以及C等位基因频率（25.0%vs 15.6%,P=0.27）高于对照组亦无显著性差异。结论我们的研究结果表明MTHFR C677T和A1298C基因位点突变可能与u RM无关。     

35周岁以下女性移植不同等级及不同发育速度冻融囊胚的临床结局

目的探讨囊胚发育速度(D5或D6)分别对35周岁以下女性不同等级冻融囊胚(优质冻融囊胚或非优质冻融囊胚)发育潜能的预测价值。方法回顾性分析取卵年龄35岁,行D5或D6冻融囊胚移植的周期1 539个,根据移植囊胚数目和囊胚等级,单个优质冻融囊胚移植组(283个移植周期)、两个优质冻融囊胚移植组(838个移植周期)、单个非优质冻融囊胚移植组(194个移植周期)、两个非优质冻融囊胚移植组(224个移植周期)。各组内再根据冷冻前形成的囊胚时间,分为D5组和D6组,比较各组内D5和D6冻融囊胚移植周期的妊娠结局。结果在单个非优质冻融囊胚移植中,D5组的临床妊娠率(46.88%)和种植率(46.88%)高于D6组(分别为33.08%和33.08%),但均无统计学差异(P均0.05);在两个非优质冻融囊胚移植周期中,D5组的种植率显著高于D6组(41.67%vs.31.01%,P0.05),临床妊娠率(54.54%vs.47.47%)和继续妊娠率(88.89%vs.76.00%)均高于D6组,早期流产率(11.11%vs.22.67%)低于D6组,但均无统计学差异(P均0.05);在单个优质冻融囊胚移植周期中,D5组的临床妊娠率(50.85%vs.52.83%)、种植率(51.41%vs.52.83%)、早期流产率(18.89%vs.17.86%)、继续妊娠率(80.00%vs.80.31%)与D6组比较均无统计学差异(P均0.05);在两个优质冻融囊胚移植周期中,D5组的临床妊娠率(78.40%vs.74.86%)、种植率(61.48%vs.59.38%)、早期流产率(7.90%vs.9.70%)、继续妊娠率(91.52%vs.88.06%)与D6组比较亦均无统计学差异(P均0.05)。结论在35周岁以下的女性中,囊胚的发育速度对非优质冻融囊胚的发育潜能可能有着一定的预测价值,但是对于优质冻融囊胚发育潜能的预测价值不大。因此,在35周岁以下的冻融囊胚移植周期中,若无优质囊胚,可考虑优先选择D5非优质冻融囊胚移植。