蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白治疗胶原诱导性关节炎大鼠的相关作用机制研究

目的探讨蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白（CⅡ）治疗胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的相关作用机制。方法60只10周龄Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组和空白组、模型组、塞来昔布（对照）组,每组10只。除空白组外,其余5组采用牛CⅡ-弗氏完全佐剂乳剂注射法构建CIA大鼠模型,2周后分别给予相应药物治疗,治疗30d后处死大鼠,获得左后足膝关节滑膜组织和肠系膜淋巴结。采用HE染色法观察大鼠关节滑膜组织病理学变化,ELISA法检测大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞（MLNLs）中IL-2、IL-4、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）水平,流式细胞术检测辅助性T细胞17（Th17）、调节性T细胞（Treg）细胞比例。结果与空白组比较,模型组大鼠膝关节滑膜组织细胞体积增大、炎症细胞浸润、新生血管生成,MLNLs中IL-2、IL-4水平明显降低（均P＜0.05）,TGF-β、IL-17水平明显升高（均P＜0.05）,Th17、Treg细胞比例明显升高（均P＜0.05）;与模型组比较,对照组和蕲蛇CⅡ高、中、低剂量组大鼠膝关节滑膜组织内炎症细胞聚集、新生血管明显减少,MLNLs中IL-2、IL-4、TGF-β水平明显升高（均P＜0.05）,IL-17水平明显降低（P＜0.05）,Treg细胞比例升高而Th17细胞比例降低（均P＜0.05）,其中蕲蛇CⅡ不同剂量组间呈一定的量效关系（均P＜0.05）。结论蕲蛇CⅡ治疗能改善CIA大鼠关节滑膜组织的病理性改变,其作用机制可能是通过调节MLNLs中细胞因子水平和Th17、Treg细胞比例实现的。     

丙种球蛋白无反应型川崎病的临床特点和治疗分析

目的 探讨丙种球蛋白无反应型川崎病(Kawasaki disease,KD)的临床特点和治疗,为其预防和治疗提供参考。 方法 回顾性分析2013年2月-2015年2月杭州市儿童医院收治的158例川崎病患儿临床资料。首次用药有效者为敏感组,无效者为无反应组。对比分析2组患儿的临床表现、实验室检查、心血管并发症、预后等资料以及无反应组的再次治疗情况。 结果 丙种球蛋白治疗后,敏感者132例(83.54%),无反应者26例(16.46%)。无反应组患儿冠脉损害发生率显著高于敏感组(61.54%比9.09%);临床表现中无反应组患儿颈部淋巴结肿大、皮疹发病率显著高于敏感组(84.62%比64.39%,88.46%比65.15%);无反应组实验室检查中血小板计数(platelet,PLT)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme MB,CK-MB)显著高于敏感组,血红蛋白(hemoglobin,Hgb)显著低于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05)。无反应组26例患儿追加丙种球蛋白治疗、糖皮质激素治疗后热退。随访1年,2组患儿恢复良好。 结论 丙种球蛋白无反应型KD发生率较高,且更易发生冠状动脉损害。颈部触痛性淋巴结肿大(直径>2 cm)、皮疹,血沉、谷丙转氨酶、血小板计数显著升高,血红蛋白降低可能是丙种球蛋白无反应型KD的危险因素。      

5岁以下川崎病合并肺炎支原体感染患儿临床特征分析

目的:探讨5岁以下川崎病(KD)合并肺炎支原体(MP)感染患儿的临床特征,以提高临床医师对该病的认识和诊治水平。方法:选取于2013年12月至2016年4月在我院住院的合并MP感染的25例KD患儿为观察组,无M 感染的167例KD患儿为对照组,比较两组患儿治疗前、治疗1周后的实验室检测指标,包括白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、红细胞沉降率(ESR)、C 反应蛋白(CRP)水平、降钙素原(PCT)水平,并比较两组辅助检查及转归。结果:观察组发热天数、杨梅舌比例高于对照组。治疗前观察组WBC、CRP、ESR、PCT水平均高于对照组,PLT水平低于对照组;治疗后两组患儿WBC、CRP、ESR、PCT均降低,PLT均增高;观察组肺部X线和(或)CT、心电图、心脏彩超异常率均高于对照组。所有患儿预后均良好,未见复发患儿。结论:MP感染导致免疫功能紊乱可能与KD的发生有关。在5岁以下KD患儿中,应重视排除是否存在MP感染,以便早期使用大环内酯类抗菌药物根除MP,减少并发症。     

P38MAPK通路在BMP9诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用

目的：研究P38丝裂原活化蛋白激酶（P38 mitogen-activated protein kinases,P38MAPK）通路在骨形态发生蛋白9（Bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导 C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法：免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK和P38MAPK表达水平,免疫荧光定位磷酸化P38MAPK;SB203580抑制C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK活性,pAdEasyBMP9诱导21 d时免疫印迹检测心肌特异性蛋白CX43、cTnT表达,免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT、α-MHC表达,RT-qPCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达。结果：pAdEasyBMP9促进磷酸化P38MAPK表达增高,却不影响P38MAPK表达水平;磷酸化P38MAPK有表达于胞浆和胞核、仅表达于胞核的不同状态。SB203580可显著性地抑制由pAdEasyBMP9诱导的C3H10T1/2干细胞CX43、cTnT、α-MHC、GATA4、MEF2C表达。结论：pAdEasyBMP9诱导C3H10T1/2干细胞能激活P38MAPK通路,并促进其向心肌样细胞分化。     

小儿室间隔缺损3种不同手术方式的对比分析

目的：对经皮导管介入封堵术、直视修补术和经胸微创封堵术3种治疗小儿室间隔缺损（ventricular septal defect,VSD）的手术方式进行回顾性对比分析以有助于VSD手术方式的合理化选择。方法：2011年1月1日至2011年12月31日在我院分别行经皮导管介入封堵术（介入组,n=123）、直视修补术（直视组,n=104）和经胸微创封堵术（微创组,n=23）的VSD患儿共250例,比较3组的手术时间、输血量、术后机械通气时间、术后重症监护室（intensive care unit,ICU）监护时间、术后住院时间、成功率和并发症发生率。结果：直视组手术时间、输血量、术后机械通气时间、术后ICU监护时间、术后住院时间明显大于介入组和微创组（P<0.001）。介入组无需输血、机械通气和ICU监护;微创组手术时间和术后住院时间明显长于介入组（P<0.001）。3组手术成功率和主要并发症发生率比较无统计学差别（P >0.05）。结论：3种手术方式均是治疗VSD安全、有效的方法。应充分评估病情,根据不同的手术适应证选择合适的手术方式。     

P38 MAPK信号通路参与BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化

 目的 探讨P38MAPK对BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化的影响。方法 实验4个部分分组如下：1.BMP-13腺病毒（Ad-BMP-13）对P38MAPK的作用：Ad-BMP-13转染组、Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测磷酸化P38MAPK（p-P38MAPK）和总P38MAPK（t-P38MAPK）的表达变化,免疫荧光技术定位p-P38MAPK;2.P38MAPK干扰腺病毒（Ad-si-P38）对P38MAPK的作用：si-P38干扰组、si-NC干扰对照组和C3H10空白组。Western blot检测t-P38MAPK的表达;3.Ad-si-P38阻断P38MAPK后对BMP-13诱导分化的影响：si-P38+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-BMP-13转染组、si-NC+Ad-GFP转染组和C3H10空白组。Western blot检测cTnT和Cx43的表达,荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达;4.SB203580阻断P38MAPK后对BMP-13诱导分化的影响： DMSO+Ad-BMP-13转染组、SB203580(2、5和10μmol/L)+Ad-BMP-13转染组 。荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达。结果 BMP-13促进P38MAPK的磷酸化。Ad-si-P38可以有效降低P38MAPK表达水平。Ad-si-P38阻断P38MAPK后BMP-13诱导组cTnT、Cx43表达有明显降低（P<0.05）,GATA-4和MEF-2C的表达也有显著降低（P<0.05）。随P38MAPK特异性抑制剂SB203580浓度增加,BMP-13诱导组GATA-4和MEF-2C的表达降低（P<0.05）。结论 Ad-BMP-13可以通过激活P38MAPK信号通路来调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化。     

P38MAPK通路在BMP9诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用

目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinases,P38MAPK)通路在骨形态发生蛋白9(Bonemorphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法:免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK和P38MAPK表达水平,免疫荧光定位磷酸化P38MAPK;SB203580抑制C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK活性,pAdEasyBMP9诱导21 d时免疫印迹检测心肌特异性蛋白CX43、cTnT表达,免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT、α-MHC表达,RT-qPCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达。结果:pAdEasyBMP9促进磷酸化P38MAPK表达增高,却不影响P38MAPK表达水平;磷酸化P38MAPK有表达于胞浆和胞核、仅表达于胞核的不同状态。SB203580可显著性地抑制由pAdEasyBMP9诱导的C3H10T1/2干细胞CX43、cTnT、α-MHC、GATA4、MEF2C表达。结论:pAdEasyBMP9诱导C3H10T1/2干细胞能激活P38MAPK通路,并促进其向心肌样细胞分化。     

沐舒坦不同给药途径佐治毛细支气管炎的疗效观察

毛细支气管炎是婴幼儿较常见的下呼吸道疾病,多由呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起,亦可由腺病毒、副流感病毒、鼻病毒等感染而引起,在临床上以喘憋、三凹征、喘鸣为主要特征。我们在一般治疗的基础上辅以沐舒坦不同给药途径佐治,取得较好的临床疗效,现报道如下。     

理化处理对大豆凝集素活性的影响

目的:探讨四种理化处理方法对大豆凝集素(SBA)活性的影响。 方法:分别用干热、湿热、酸碱和金属离子处理大豆植物蛋白中的SBA,用血凝法测定SBA的凝集活力,观察经这些理化处理后SBA活性的变化。 结果:120℃以下的干热处理不能使SBA的活力明显丧失;而95℃、30min,100℃、20min或105℃、10min的湿热处理,可使SBA的活力完全丧失。在pH 1.0~4.5或pH 9~13范围内提取大豆蛋白质,可使SBA的活力显著丧失。大豆蛋白抽提液中三价、四价金属离子和部分二价、一价金属离子也可显著降低SBA的活力。 结论:在不影响大豆蛋白质品质的条件下,干热处理不能除去大豆中的SBA,适宜的湿热、酸碱和金属离子处理能有效钝化大豆中SBA的活性。     

血清细胞因子鉴别儿童川崎病与感染发热性疾病的临床价值

目的 探讨川崎病患儿血清细胞因子表达情况及与川崎病的相关性。方法 选取2019年4月1日—2021年2月28日在杭州市儿童医院就诊的78例发热患儿为研究对象。其中39例川崎病患儿为研究组，39例感染发热性疾病患儿为对照组。采用多重微球流式免疫荧光发光法测定两组患儿血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)水平，评估诊断效能。结果 研究组IL-6水平为200.1(98.4,359.4) pg/ml,对照组IL-6水平为46.0(18.7,80.6) pg/ml,研究组IL-6水平较对照组显著升高(Z=-5.721,P<0.05);研究组TNF-α水平为14.3(5.4,29.8)pg/ml,对照组TNF-α水平为7.9(4.0,14.3)pg/ml,研究组TNF-α水平明显高于对照组(Z=-2.304,P<0.05)。logistic回归分析结果显示：IL-6水平升高是川崎病患病的独立风险因素(OR=0.978,95%CI:0.968～0.98...